| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-36页 |
| ·稻瘟病抗病性的遗传基础及抗稻瘟病基因的鉴定 | 第16-18页 |
| ·植物抗病基因的定位和克隆 | 第18-31页 |
| ·基因定位 | 第18-26页 |
| ·常用分子标记技术的原理及特点 | 第18-20页 |
| ·抗稻瘟病基因的定位及其在水稻基因组中的分布特点 | 第20-26页 |
| ·基因克隆 | 第26-31页 |
| ·图位克隆技术路线及其应用 | 第26-28页 |
| ·图位克隆技术的发展 | 第28-30页 |
| ·其它基因克隆方法 | 第30-31页 |
| ·植物抗病基因结构及植物抗病的分子基础 | 第31-33页 |
| ·植物抗病基因的结构 | 第31-32页 |
| ·植物抗病的分子基础 | 第32-33页 |
| ·现代生物技术在抗病育种中的应用 | 第33-35页 |
| ·利用分子标记辅助选择进行抗病育种 | 第33-34页 |
| ·利用转基因技术进行抗病育种 | 第34-35页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第35-36页 |
| 第二章 Pik~m基因的初步定位 | 第36-52页 |
| ·前言 | 第36-37页 |
| ·材料与方法 | 第37-42页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37-38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38页 |
| ·构建作图群体 | 第38页 |
| ·稻瘟病菌分生孢子的接种和病害调查 | 第38-39页 |
| ·标样基因组 DNA的提取 | 第39-40页 |
| ·STS标记分析 | 第40页 |
| ·CAPS标记分析 | 第40-41页 |
| ·SSR标记分析 | 第41-42页 |
| ·标记筛选及连锁分析 | 第42页 |
| ·Pik~m基因遗传图的构建 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-50页 |
| ·作图群体的构建 | 第42-43页 |
| ·Pik~m基因的初步定位 | 第43-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·亲本以及病原菌小种的选择对构建作图群体的影响 | 第50页 |
| ·以 PCR技术为基础的分子标记的选择对结果的影响 | 第50-52页 |
| 第三章 Pik~m基因的精细定位 | 第52-69页 |
| ·前言 | 第52-53页 |
| ·材料与方法 | 第53-54页 |
| ·作图群体 | 第53页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第53页 |
| ·基因组 DNA的提取 | 第53页 |
| ·Pik~m基因区域物理重叠群的构建 | 第53页 |
| ·SSR标记分析 | 第53-54页 |
| ·STS和 CAPS标记分析 | 第54页 |
| ·Pik~m基因区域精细遗传图的构建 | 第54页 |
| ·Pik~m基因区域物理图的构建 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-67页 |
| ·Pik~m基因区域物理重叠群的构建 | 第54-57页 |
| ·Pik~m基因的精细定位 | 第57-67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| ·目的基因区域新标记的开发 | 第67页 |
| ·抗病基因所在区域的连锁不平衡 | 第67-69页 |
| 第四章 Pik~m目标区域的基因预测及候选基因的确定 | 第69-78页 |
| ·前言 | 第69页 |
| ·材料与方法 | 第69-72页 |
| ·植物材料 | 第69页 |
| ·主要试剂药品 | 第69-70页 |
| ·主要仪器设备 | 第70页 |
| ·目标区域的基因预测和序列分析 | 第70页 |
| ·候选基因的 RT-PCR分析 | 第70-72页 |
| ·结果 | 第72-77页 |
| ·目标区域的基因预测 | 第72-74页 |
| ·候选基因的确定 | 第74-76页 |
| ·候选基因的 RT-PCR分析 | 第76-77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| 第五章 Pik~m候选基因的克隆及序列分析 | 第78-93页 |
| ·前言 | 第78-79页 |
| ·材料与方法 | 第79-84页 |
| ·植物材料 | 第79页 |
| ·菌株 | 第79页 |
| ·主要试剂 | 第79页 |
| ·主要仪器设备 | 第79页 |
| ·培养基配方 | 第79页 |
| ·序列分析软件 | 第79-80页 |
| ·候选基因 PK1全长cDNA序列的获得 | 第80-83页 |
| ·cDNA的分段扩增 | 第80-81页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第81页 |
| ·目的片段的回收 | 第81页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第81-82页 |
| ·连接产物电击转化大肠杆菌 | 第82页 |
| ·阳性克隆的鉴定和保存 | 第82-83页 |
| ·序列拼接 | 第83页 |
| ·候选基因 PK1的克隆和测序 | 第83-84页 |
| ·候选基因 PK1全长cDNA序列的扩增和克隆 | 第84页 |
| ·结果 | 第84-91页 |
| ·候选基因 PK1全长cDNA序列的获得及其功能预测 | 第84-87页 |
| ·候选基因 PK1的扩增、克隆及序列分析 | 第87-89页 |
| ·候选基因 PK1全长cDNA的扩增及克隆 | 第89-91页 |
| ·讨论 | 第91-93页 |
| ·关于基因克隆的策略 | 第91页 |
| ·关于候选基因 PK1编码的蛋白质 | 第91-93页 |
| 第六章 Pik~m候选基因的遗传转化 | 第93-104页 |
| ·前言 | 第93页 |
| ·材料与方法 | 第93-98页 |
| ·植物材料 | 第93-94页 |
| ·载体和菌株 | 第94页 |
| ·主要试剂 | 第94-95页 |
| ·主要仪器设备 | 第95页 |
| ·培养基配方及相关溶液的配置 | 第95页 |
| ·候选基因 PK1的cDNA序列的克隆 | 第95-96页 |
| ·电击转化大肠杆菌 | 第96页 |
| ·重组质粒的提取和鉴定 | 第96页 |
| ·重组质粒转化农杆菌 | 第96-97页 |
| ·农杆菌介导的植物遗传转化 | 第97页 |
| ·转化苗的早期鉴定 | 第97-98页 |
| ·结果 | 第98-102页 |
| ·候选基因 PK1全长cDNA的克隆和鉴定 | 第98-99页 |
| ·转化质粒在农杆菌中的稳定性检测 | 第99-100页 |
| ·植物遗传转化和转基因植株的获得 | 第100-102页 |
| ·T_0代转化植株的初步鉴定 | 第102页 |
| ·讨论 | 第102-104页 |
| ·关于目的片段的克隆 | 第102-103页 |
| ·转基因效率的问题 | 第103页 |
| ·进一步研究的设想 | 第103-104页 |
| 第七章 结论 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-115页 |
| 附录 | 第115-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 作者简介 | 第124-125页 |
