| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 第一章 绪 论 | 第17-35页 |
| ·凝集素 | 第17-18页 |
| ·凝集素的定义 | 第17页 |
| ·凝集素的分布 | 第17页 |
| ·凝集素的分类 | 第17页 |
| ·凝集素的功能特性 | 第17-18页 |
| ·麦胚凝集素 | 第18页 |
| ·麦胚凝集素概述 | 第18页 |
| ·WGA的发现及早期研究 | 第18页 |
| ·WGA的合成 | 第18页 |
| ·WGA的活性机制 | 第18页 |
| ·WGA的外源性生物活性 | 第18-26页 |
| ·概述 | 第19页 |
| ·WGA的凝集活性 | 第19-20页 |
| ·WGA对于脂肪代谢的影响 | 第20页 |
| ·WGA对于细胞膜通透性的影响 | 第20页 |
| ·WGA的抑肿瘤活性 | 第20-21页 |
| ·WGA对于黑色素瘤细胞的增殖抑制作用 | 第20-21页 |
| ·WGA对于成纤维细胞的增殖抑制作用 | 第21页 |
| ·WGA对于胰腺肿瘤细胞的增殖抑制作用 | 第21页 |
| ·WGA对于结肠直肠肿瘤细胞的增殖抑制作用 | 第21页 |
| ·WGA对于其它肿瘤细胞的增殖抑制作用 | 第21页 |
| ·WGA的免疫促进及免疫抑制作用 | 第21-23页 |
| ·WGA对于抗体分泌的影响 | 第21-22页 |
| ·WGA对于人淋巴细胞周期的影响 | 第22页 |
| ·WGA对于杀伤细胞和吞噬细胞的影响 | 第22页 |
| ·WGA对于T淋巴细胞的影响 | 第22-23页 |
| ·WGA的营养作用 | 第23页 |
| ·WGA的抗营养作用 | 第23-24页 |
| ·WGA的肠道致敏作用 | 第24-25页 |
| ·WGA的致病原作用 | 第25页 |
| ·WGA的其它生物活性 | 第25-26页 |
| ·WGA的应用 | 第26-29页 |
| ·概述 | 第26页 |
| ·糖或含糖蛋白质的纯化及探查 | 第26页 |
| ·用于糖的结构鉴定 | 第26-27页 |
| ·作为膜上含有NAcGlc或唾液酸的糖蛋白和糖脂的探针 | 第27页 |
| ·作为生物学标记物 | 第27-28页 |
| ·增强生物分子的粘着性 | 第28页 |
| ·疾病诊断 | 第28页 |
| ·增强植物抗病害性 | 第28-29页 |
| ·立题背景及本论文的研究任务 | 第29页 |
| 参考文献 | 第29-35页 |
| 第二章 麦胚凝集素红细胞凝集活性检测方法的改进 | 第35-45页 |
| ·前言 | 第35页 |
| ·材料与方法 | 第35-37页 |
| ·材料与仪器 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-37页 |
| ·标准血红细胞悬液的配制 | 第36页 |
| ·标准红细胞悬液在620nm处吸收标准曲线的制作 | 第36页 |
| ·红细胞在悬液中沉降过程的监测 | 第36页 |
| ·WGA红细胞凝集活性的测定 | 第36-37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-43页 |
| ·标准红细胞悬液在620nm处吸收标准曲线 | 第37-38页 |
| ·红细胞的沉降过程 | 第38-39页 |
| ·红细胞凝集活性的测定和计算 | 第39-41页 |
| ·测定结果的灵敏度和精确度 | 第41-43页 |
| ·本章小结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-45页 |
| 第三章 麦胚凝集素的分离纯化 | 第45-60页 |
| ·绪言 | 第45页 |
| ·材料与方法 | 第45-47页 |
| ·实验材料 | 第45-46页 |
| ·实验仪器 | 第46页 |
| ·定量方法 | 第46页 |
| ·WGA的提取及纯化工艺 | 第46-47页 |
| ·十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)以及条带分子量的计算 | 第47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-58页 |
| ·单因素试验 | 第47-49页 |
| ·提取时间对于提取液总活力和总蛋白的影响 | 第47-48页 |
| ·甲酸浓度对于提取液总活力和总蛋白的影响 | 第48页 |
| ·液料比对于提取液总活力和总蛋白的影响 | 第48-49页 |
| ·提取条件的优化 | 第49-54页 |
| ·试验方案和结果 | 第49-50页 |
| ·试验结果的方差分析 | 第50-52页 |
| ·试验结果的响应面分析 | 第52-54页 |
| ·最佳提取条件验证试验 | 第54页 |
| ·硫酸铵盐析分级 | 第54-55页 |
| ·选择性热处理 | 第55页 |
| ·亲合层析 | 第55-56页 |
| ·凝胶过滤层析 | 第56页 |
| ·SDS-PAGE及相对分子质量计算 | 第56-58页 |
| ·纯化步骤总结 | 第58页 |
| ·本章小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-60页 |
| 第四章 麦胚凝集素对大鼠乳腺癌细胞的增殖抑制活性研究 | 第60-76页 |
| ·前言 | 第60-61页 |
| ·材料与方法 | 第61-63页 |
| ·材料 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61页 |
| ·主要仪器 | 第61页 |
| ·细胞株 | 第61页 |
| ·完全培养基的配制 | 第61页 |
| ·方法 | 第61-63页 |
| ·同功麦胚凝集素WGAII的纯化与鉴定 | 第61-62页 |
| ·癌细胞的培养条件 | 第62页 |
| ·WGAII对癌细胞体外增殖抑制率和LD50的测定----MTT法 | 第62页 |
| ·WGAII对癌细胞体外生长曲线的影响---苔盼蓝染色法 | 第62-63页 |
| ·WGAII对癌细胞形态的影响 | 第63页 |
| ·流式细胞术测定WGAII对癌细胞周期和细胞凋亡的影响 | 第63页 |
| ·结果与讨论 | 第63-74页 |
| ·同功麦胚凝集素WGAII的纯化与鉴定 | 第63-64页 |
| ·WGAII对癌细胞的体外增殖抑制率和LD | 第64-66页 |
| ·WGAII对癌细胞体外生长曲线的影响 | 第66页 |
| ·WGAII对癌细胞形态的影响 | 第66-72页 |
| ·光镜观察结果 | 第66-69页 |
| ·扫描电镜观察结果 | 第69-72页 |
| ·WGAII对癌细胞周期和细胞凋亡的影响 | 第72-74页 |
| ·本章小结 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-76页 |
| 第五章 麦胚凝集素结构的研究 | 第76-95页 |
| ·前言 | 第76-77页 |
| ·实验材料与方法 | 第77-78页 |
| ·实验材料 | 第77页 |
| ·实验仪器 | 第77页 |
| ·实验方法 | 第77-78页 |
| ·同功WGA序列及晶体结构的检索 | 第77页 |
| ·FT-IR光谱测定 | 第77页 |
| ·Raman光谱测定 | 第77-78页 |
| ·CD光谱测定 | 第78页 |
| ·结果与讨论 | 第78-92页 |
| ·同功WGA的序列及晶体结构 | 第78页 |
| ·WGA固态二级结构的测定结果 | 第78-84页 |
| ·FT-IR光谱法测定结果 | 第79-80页 |
| ·Raman光谱法测定结果 | 第80-84页 |
| ·WGA在高浓度溶液中的结构 | 第84-91页 |
| ·WGA在酸性高浓度溶液中的结构 | 第84-89页 |
| ·WGA在中性高浓度溶液中的结构 | 第89-91页 |
| ·WGA在低浓度溶液中的二级结构 | 第91-92页 |
| ·本章小结 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-95页 |
| 第六章 麦胚凝集素与特异性配体的相互作用研究 | 第95-117页 |
| ·绪言 | 第95-96页 |
| ·实验材料与方法 | 第96-98页 |
| ·实验材料 | 第96页 |
| ·实验仪器 | 第96页 |
| ·实验方法 | 第96-98页 |
| ·稳态荧光发射光谱测定 | 第96页 |
| ·稳态荧光差谱测定 | 第96页 |
| ·荧光淬灭试验 | 第96-97页 |
| ·Trp残基的化学修饰 | 第97页 |
| ·二阶导数紫外光谱测定 | 第97页 |
| ·紫外差谱测定 | 第97-98页 |
| ·CD谱的测定 | 第98页 |
| ·结果与讨论 | 第98-115页 |
| ·WGAII与(NAcGlc)n亲合常数 | 第98-101页 |
| ·WGAII在低浓度溶液中与(NAcGlc)n亲合常数──荧光差谱法 | 第98-100页 |
| ·WGAII在高浓度溶液中与(NAcGlc)n亲合常数──紫外差谱法 | 第100-101页 |
| ·芳香族氨基酸残基在WGAII与(NAcGlc)n相互作用中的作用 | 第101-108页 |
| ·Trp残基在配体结合活性中的作用──荧光发射光谱法 | 第101-103页 |
| ·Trp残基在配体结合活性中的作用──NBS修饰法 | 第103-106页 |
| ·Tyr残基在配体结合活性中的作用──荧光发射光谱法 | 第106-107页 |
| ·Tyr残基在配体结合活性中的作用──二阶导数紫外光谱法 | 第107-108页 |
| ·WGAII与(NAcGlc)n相互作用中微区环境的变化──荧光淬灭法 | 第108-112页 |
| ·配体结合对于WGAII二级结构的影响 | 第112-115页 |
| ·本章小结 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-119页 |
| 论文主要结论及主要创新点 | 第119-121页 |
| 附录 | 第121-124页 |
| 致谢 | 第124-126页 |
| 攻读博士学位期间发表论文清单 | 第126页 |
