| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 干扰素的研究进展 | 第12页 |
| 1.2 ChIFN-γ的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.3 烟草腺毛的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.3.1 烟草腺毛的形态学特征 | 第14页 |
| 1.3.2 烟草腺毛的结构与类型 | 第14-15页 |
| 1.3.3 调控烟草腺毛发育相关基因的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 调控拟南芥的表皮毛发育特异性表达的基因 | 第16-17页 |
| 1.5 研究蛋白质与蛋白质的相互作用的研究方法 | 第17-20页 |
| 1.5.1 酵母双杂交系统 | 第18页 |
| 1.5.2 等温滴定量热法 | 第18-19页 |
| 1.5.3 表面等离子共振技术 | 第19页 |
| 1.5.4 免疫共沉淀技术 | 第19-20页 |
| 1.5.5 GST-pull-down技术 | 第20页 |
| 1.6 本研究的目的及意义 | 第20-22页 |
| 第二章 拟南芥的遗传与转化 | 第22-36页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 材料 | 第22-24页 |
| 2.2.1 菌种和植物材料 | 第22页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第23页 |
| 2.2.4 染色液和培养基的配制 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.3.1 拟南芥的培养 | 第24页 |
| 2.3.2 拟南芥的遗传转化 | 第24-25页 |
| 2.3.3 拟南芥T1代转基因种子的筛选 | 第25页 |
| 2.3.4 拟南芥基因组的提取 | 第25-26页 |
| 2.3.5 抗性植株PCR检测 | 第26-27页 |
| 2.3.6 GUS组织化学染色检测抗性植株 | 第27页 |
| 2.4 结果与分析 | 第27-33页 |
| 2.4.1 抗性植株的筛选与鉴定 | 第27-30页 |
| 2.4.2 转基因拟南芥性状的观察 | 第30-33页 |
| 2.5 讨论 | 第33-36页 |
| 第三章 ChIFN-γ与IspH、CyP71和LBM1的蛋白互作 | 第36-80页 |
| 3.1 引言 | 第36-37页 |
| 3.2 材料 | 第37-43页 |
| 3.2.1 细菌与质粒 | 第37页 |
| 3.2.2 主要实验仪器 | 第37-38页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第38-40页 |
| 3.2.4 试剂盒 | 第40页 |
| 3.2.5 酶切引物的设计 | 第40页 |
| 3.2.6 试剂的配置 | 第40-43页 |
| 3.3 实验方法 | 第43-59页 |
| 3.3.1 目的DNA片段的扩增 | 第43-44页 |
| 3.3.2 PCR产物的检测与胶回收 | 第44-45页 |
| 3.3.3 目的基因质粒的提取 | 第45-46页 |
| 3.3.4 质粒PCR检测目的基因及胶回收 | 第46页 |
| 3.3.5 pET28a、pET30a质粒的提取 | 第46页 |
| 3.3.6 pET28a、pET30a质粒的双酶切及回收 | 第46-47页 |
| 3.3.7 ChIFN-γ、IspH、CyP71和LBM1的双酶切及其产物回收 | 第47-48页 |
| 3.3.8 目的基因Ch IFN-γ、IspH、Cy P71、LBM1和表达载体的连接 | 第48-49页 |
| 3.3.9 感受态大肠杆菌（E.coli BL(21)）的制备 | 第49-50页 |
| 3.3.10 连接产物的转化 | 第50页 |
| 3.3.11 重组质粒的鉴定 | 第50-52页 |
| 3.3.12 重组质粒的测序 | 第52页 |
| 3.3.13 重组蛋白的小量诱导表达 | 第52-53页 |
| 3.3.14 SDS-PAGE电泳检测目的蛋白的表达 | 第53页 |
| 3.3.15 重组蛋白的大量诱导表达 | 第53-54页 |
| 3.3.16 重组蛋白的纯化 | 第54-56页 |
| 3.3.17 目的蛋白的复性透析 | 第56-57页 |
| 3.3.18 考马斯亮蓝法测定蛋白浓度 | 第57页 |
| 3.3.19 Western Blot检测ChIFN-γ、IspH、CyP71、LBM1蛋白 | 第57-58页 |
| 3.3.20 等温滴定量热法检测蛋白间的相互作用 | 第58-59页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第59-77页 |
| 3.4.1 ChIFN-γ、Isp H、CyP71和LBM1基因PCR扩增 | 第59-60页 |
| 3.4.2 菌落PCR检测重组表达载体 | 第60-61页 |
| 3.4.3 质粒PCR检测重组质粒 | 第61-62页 |
| 3.4.4 双酶切鉴定重组质粒 | 第62-63页 |
| 3.4.5 重组蛋白小量诱导表达 | 第63-64页 |
| 3.4.6 重组蛋白的大量诱导表达 | 第64-67页 |
| 3.4.7 离子交换层析纯化ChIFN-γ和IspH蛋白 | 第67-69页 |
| 3.4.8 亲和层析纯化CyP71和LBM1蛋白 | 第69-70页 |
| 3.4.9 纯化蛋白的浓度测定 | 第70-73页 |
| 3.4.10 Western Blot检测ChIFN-γ、IspH、CyP71和LBM1蛋白 | 第73-74页 |
| 3.4.11 等温滴定量热仪检测蛋白互作 | 第74-77页 |
| 3.5 讨论 | 第77-80页 |
| 第四章 总结与展望 | 第80-82页 |
| 4.1 总结 | 第80-81页 |
| 4.2 展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 附录 | 第88-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
| 在读期间参与科研项目 | 第92页 |
| 在读期间发表文章 | 第92-93页 |
