| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-19页 |
| 1 干扰素的概况 | 第11-15页 |
| 2 猪Α-干扰素的研究进展 | 第15-16页 |
| 参考文献 | 第16-19页 |
| 第二章 猪Α-干扰素基因的克隆与序列分析 | 第19-28页 |
| 1 实验材料 | 第19页 |
| ·质粒与菌株 | 第19页 |
| ·工具酶和试剂盒 | 第19页 |
| ·试剂与培养基 | 第19页 |
| 2 实验方法 | 第19-24页 |
| ·引物的设计 | 第19-21页 |
| ·重叠引物PCR 法扩增猪α-干扰素全基因 | 第21-22页 |
| ·目的基因的克隆 | 第22-24页 |
| ·目的基因的序列分析 | 第24页 |
| 3 实验结果 | 第24-26页 |
| ·SOE PCR 扩增结果 | 第24-25页 |
| ·酶切鉴定及测序结果 | 第25页 |
| ·目的基因的序列分析 | 第25-26页 |
| 4 讨论 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-28页 |
| 第三章 猪Α-干扰素在大肠杆菌中的表达 | 第28-45页 |
| 1 实验材料 | 第28-30页 |
| ·质粒与菌株 | 第28页 |
| ·工具酶与试剂盒 | 第28页 |
| ·试剂与培养基 | 第28-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-36页 |
| ·引物的设计与目的基因的扩增 | 第30-31页 |
| ·原核表达载体pET28-poIFN-α的构建 | 第31-32页 |
| ·表达载体pET28-poIFN-α的双酶切鉴定 | 第32页 |
| ·工程菌的诱导表达 | 第32页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第32-33页 |
| ·表达产物的定位 | 第33页 |
| ·表达产物的Western Blot 鉴定 | 第33-34页 |
| ·表达条件的优化 | 第34-35页 |
| ·包涵体的制备与粗纯 | 第35页 |
| ·重组猪α-干扰素的亲和层析纯化 | 第35页 |
| ·重组猪α-干扰素的复性 | 第35-36页 |
| ·蛋白浓度的测定（BCA 法） | 第36页 |
| 3 实验结果 | 第36-41页 |
| ·目的基因的扩增 | 第36-37页 |
| ·pET28-poIFN-α的双酶切鉴定 | 第37页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第37-38页 |
| ·表达产物的定位 | 第38页 |
| ·表达产物的Western Blot 鉴定 | 第38页 |
| ·表达条件的优化 | 第38-40页 |
| ·重组猪α-干扰素的亲和层析纯化 | 第40-41页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 第四章 重组猪Α-干扰素的抗病毒活性研究 | 第45-50页 |
| 1 实验材料 | 第45页 |
| ·细胞、毒株 | 第45页 |
| ·试剂与培养基 | 第45页 |
| 2 实验方法 | 第45-46页 |
| ·MDBK 和PK15 的培养与鸡胚的孵育 | 第45页 |
| ·VSV 在鸡胚中的扩增 | 第45-46页 |
| ·K(a|¨)rber 法测定VSV 的TCID_(50) | 第46页 |
| ·微量细胞病变抑制法测定重组猪α-干扰素的活性 | 第46页 |
| 3 实验结果 | 第46-48页 |
| ·K(a|¨)rber 法测定VSV 的TCID_(50) | 第46-47页 |
| ·重组猪α-干扰素的活性测定 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| 总结与展望 | 第50-51页 |
| 附录 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第57页 |