提要 | 第1-9页 |
前言 | 第9-23页 |
1. 蛋白质磷酸化作用概述 | 第9-10页 |
2. 蛋白质酪氨酸磷酸酶简介 | 第10-12页 |
3. RPTPα的概述 | 第12-14页 |
4. RPTPα的研究进展 | 第14-15页 |
5. 蛋白的复性 | 第15-21页 |
6. 本研究的设想 | 第21-23页 |
实验方案 | 第23-48页 |
第一部分 RPTPα-D1 的克隆与表达 | 第24-33页 |
1 实验材料 | 第24-26页 |
2 实验方法 | 第26-29页 |
·RPTPα-D1 基因的获得 | 第26页 |
·克隆载体的构建和测定 | 第26-28页 |
·表达载体的构建 | 第28-29页 |
·RPTPα-D1 的表达 | 第29页 |
3 结果与讨论 | 第29-32页 |
·目的片段的扩增 | 第29-30页 |
·重组质粒pBluescript II KS -RPTPα-D1 的酶切验证 | 第30页 |
·表达载体的验证 | 第30-31页 |
·RPTPα-D1 的表达 | 第31-32页 |
4 本章小结 | 第32-33页 |
第二部分 RPTPα-2D的纯化及多克隆抗体的制备 | 第33-38页 |
1 实验材料 | 第33-34页 |
2 实验方法 | 第34-35页 |
·RPTPα-2D的表达 | 第34页 |
·RPTPα-2D的纯化 | 第34页 |
·RPTPα-2D免疫家兔 | 第34-35页 |
·ECL法检测抗体滴度 | 第35页 |
3 结果与讨论 | 第35-37页 |
·RPTPα-2D的验证 | 第35页 |
·RPTPα-2D的表达 | 第35-36页 |
·RPTPα-2D的纯化 | 第36页 |
·ECL法检测血清滴度及灵敏度 | 第36-37页 |
4 本章小结 | 第37-38页 |
第三部分 RPTPα-D1 及RPTPα-2D的复性研究 | 第38-48页 |
1 实验材料 | 第38-39页 |
2 试验方法 | 第39-41页 |
·包涵体的洗涤与溶解 | 第39-40页 |
·稀释复性 | 第40页 |
·透析复性 | 第40页 |
·柱上复性 | 第40页 |
·复性检测 | 第40-41页 |
3 结果与讨论 | 第41-47页 |
·复性机制的讨论 | 第41-42页 |
·稀释复性 | 第42-43页 |
·透析复性 | 第43-44页 |
·柱上复性 | 第44-47页 |
4 本章小结 | 第47-48页 |
结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
附录 | 第54-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
中文摘要 | 第58-60页 |
ABSTRACT | 第60-62页 |