提要 | 第1-6页 |
英文缩写表 | 第6-9页 |
第一章 前言 | 第9-22页 |
·MAPK 级联信号传递途径 | 第9-12页 |
·定量PCR | 第12-14页 |
·植物在低温胁迫下的分子反应机制 | 第14-20页 |
·编码功能蛋白的基因 | 第15-17页 |
·植物脱水素 | 第17-18页 |
·调控基因 | 第18-20页 |
·本研究的立题依据和展望 | 第20-22页 |
第二章 荧光定量PCR 检测MAPK4 在冷胁迫条件下基因表达变化 | 第22-33页 |
·实验材料 | 第22-23页 |
·植物材料 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·引物设计 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-28页 |
·总RNA 的提取及检验 | 第23-24页 |
·总RNA 的反转录 | 第24-25页 |
·荧光定量PCR | 第25-28页 |
·实验结果 | 第28-33页 |
·总RNA 提取的鉴定 | 第28-29页 |
·荧光定量PCR | 第29-30页 |
·Real-Time PCR 结果及数据分析 | 第30-33页 |
第三章 多克隆抗体制备及western-blot法检测拟南芥冷胁迫条件下MAPK4蛋白表达变化 | 第33-59页 |
·实验材料 | 第33-39页 |
·植物材料 | 第33页 |
·实验仪器 | 第33-34页 |
·实验试剂与溶液的配制 | 第34-39页 |
·实验方法 | 第39-52页 |
·目的片段的获得 | 第40-43页 |
·表达载体的构建 | 第43-46页 |
·蛋白的表达和纯化 | 第46-47页 |
·免疫动物 | 第47-48页 |
·抗体的纯化 | 第48-49页 |
·全细胞蛋白质样品制备 | 第49-51页 |
·western-blot | 第51-52页 |
·实验结果 | 第52-59页 |
·植物总RNA 样品的纯度和完整性 | 第52-53页 |
·获取目的基因ATMPK4 | 第53-55页 |
·目的蛋白表达和纯化 | 第55页 |
·抗体效价的检验及纯化 | 第55-56页 |
·用western-blot 法检测目的蛋白在冷胁迫条件下表达变化 | 第56-59页 |
第四章 讨论 | 第59-61页 |
第五章 结论 | 第61-62页 |
·多克隆抗体的制备 | 第61页 |
·拟南芥MAPK4 蛋白水平表达变化 | 第61页 |
·拟南芥MAPK4 转录水平表达变化 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
摘要 | 第68-70页 |
Abstract | 第70-71页 |