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重组牛碱性成纤维细胞生长因子在大肠杆菌中的表达、纯化及其生物活性检测

内容提要第1-8页
第一章 绪论第8-15页
   ·bFGF的一般性质第8-9页
   ·bFGF的分布第9页
   ·bFGF的作用机制第9-10页
   ·bFGF的生物学效应第10-12页
     ·作为血管生长因子第10-11页
     ·促进创伤愈合与组织修复第11页
     ·促进组织再生第11-12页
     ·参与神经再生第12页
   ·存在的问题及应用前景第12-15页
第二章 大肠杆菌生产重组碱性成纤维细胞生长因子传统发酵条件的优化第15-24页
   ·材料与方法第15-18页
     ·仪器与设备第15页
     ·主要试剂第15页
     ·菌种第15-17页
       ·质粒 JM-bFGF的构建第16页
       ·菌种的检定第16页
       ·培养基第16-17页
       ·种子液制备第17页
       ·培养方法第17页
     ·监控检测方法第17-18页
       ·培养液光密度的测定第18页
       ·质粒稳定性检测第18页
       ·bFGF菌体表达量的测定第18页
   ·结果与讨论第18-22页
     ·诱导剂 IPTG对基因工程菌 E.coli的影响第18-19页
     ·加入诱导剂 IPTG的最佳时间的选择第19-20页
     ·加入诱导剂 IPTG的最佳浓度的选择第20-21页
     ·高密度发酵表达bFGF第21-22页
   ·本章小结第22-24页
第三章 重组牛碱性成纤维细胞生长因子的发酵工艺的改进第24-32页
   ·材料与方法第24-25页
     ·菌种第24页
     ·仪器第24-25页
     ·主要试剂第25页
     ·测定方法第25页
   ·结果与讨论第25-30页
     ·摇床培养第25-27页
       ·乳糖加入时间的选择对产量和蛋白表达的影响第25-26页
       ·诱导剂乳糖浓度的选择对菌体蛋白表达的影响第26-27页
     ·高密度发酵培养过程中的诱导表达第27-30页
   ·本章小结第30-32页
第四章 重组牛碱性成纤维细胞生长因子的纯化与检定第32-42页
   ·材料与方法第32-35页
     ·分离纯化工作液第32页
     ·仪器与设备第32-33页
     ·bFGF的分离纯化及检测方法第33-35页
       ·初步纯化第33页
       ·重组bFGF的 CM-Sephadex Fast Flow纯化第33页
       ·重组bFGF的 Heparin-Sepharose CL-68纯化第33页
       ·蛋白含量测定第33页
       ·纯度检定第33-34页
       ·外源性 DNA残留量检测第34页
       ·肽图测定第34页
       ·等电点测定第34页
       ·紫外光谱扫描第34页
       ·生物活性检测第34-35页
   ·结果与讨论第35-40页
     ·重组碱性成纤维细胞生长因子的纯化第35-36页
     ·bFGF纯品检测第36-40页
       ·纯化所获得的纯化蛋白Ⅲ(bFGFⅢ)检测第36-37页
       ·采用乳糖和 IPTG诱导所获得的bFGF蛋白检测第37-40页
   ·本章小结第40-42页
结论第42-46页
参考文献第46-50页
致谢第50-51页
中文摘要第51-54页
英文摘要第54-57页

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