内容提要 | 第1-8页 |
第一章 绪论 | 第8-15页 |
·bFGF的一般性质 | 第8-9页 |
·bFGF的分布 | 第9页 |
·bFGF的作用机制 | 第9-10页 |
·bFGF的生物学效应 | 第10-12页 |
·作为血管生长因子 | 第10-11页 |
·促进创伤愈合与组织修复 | 第11页 |
·促进组织再生 | 第11-12页 |
·参与神经再生 | 第12页 |
·存在的问题及应用前景 | 第12-15页 |
第二章 大肠杆菌生产重组碱性成纤维细胞生长因子传统发酵条件的优化 | 第15-24页 |
·材料与方法 | 第15-18页 |
·仪器与设备 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15页 |
·菌种 | 第15-17页 |
·质粒 JM-bFGF的构建 | 第16页 |
·菌种的检定 | 第16页 |
·培养基 | 第16-17页 |
·种子液制备 | 第17页 |
·培养方法 | 第17页 |
·监控检测方法 | 第17-18页 |
·培养液光密度的测定 | 第18页 |
·质粒稳定性检测 | 第18页 |
·bFGF菌体表达量的测定 | 第18页 |
·结果与讨论 | 第18-22页 |
·诱导剂 IPTG对基因工程菌 E.coli的影响 | 第18-19页 |
·加入诱导剂 IPTG的最佳时间的选择 | 第19-20页 |
·加入诱导剂 IPTG的最佳浓度的选择 | 第20-21页 |
·高密度发酵表达bFGF | 第21-22页 |
·本章小结 | 第22-24页 |
第三章 重组牛碱性成纤维细胞生长因子的发酵工艺的改进 | 第24-32页 |
·材料与方法 | 第24-25页 |
·菌种 | 第24页 |
·仪器 | 第24-25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·测定方法 | 第25页 |
·结果与讨论 | 第25-30页 |
·摇床培养 | 第25-27页 |
·乳糖加入时间的选择对产量和蛋白表达的影响 | 第25-26页 |
·诱导剂乳糖浓度的选择对菌体蛋白表达的影响 | 第26-27页 |
·高密度发酵培养过程中的诱导表达 | 第27-30页 |
·本章小结 | 第30-32页 |
第四章 重组牛碱性成纤维细胞生长因子的纯化与检定 | 第32-42页 |
·材料与方法 | 第32-35页 |
·分离纯化工作液 | 第32页 |
·仪器与设备 | 第32-33页 |
·bFGF的分离纯化及检测方法 | 第33-35页 |
·初步纯化 | 第33页 |
·重组bFGF的 CM-Sephadex Fast Flow纯化 | 第33页 |
·重组bFGF的 Heparin-Sepharose CL-68纯化 | 第33页 |
·蛋白含量测定 | 第33页 |
·纯度检定 | 第33-34页 |
·外源性 DNA残留量检测 | 第34页 |
·肽图测定 | 第34页 |
·等电点测定 | 第34页 |
·紫外光谱扫描 | 第34页 |
·生物活性检测 | 第34-35页 |
·结果与讨论 | 第35-40页 |
·重组碱性成纤维细胞生长因子的纯化 | 第35-36页 |
·bFGF纯品检测 | 第36-40页 |
·纯化所获得的纯化蛋白Ⅲ(bFGFⅢ)检测 | 第36-37页 |
·采用乳糖和 IPTG诱导所获得的bFGF蛋白检测 | 第37-40页 |
·本章小结 | 第40-42页 |
结论 | 第42-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
中文摘要 | 第51-54页 |
英文摘要 | 第54-57页 |