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水稻CDPKs基因的表达谱分析和黑藻Hvppc2转基因水稻的培育和功能分析

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
缩略词表第12-13页
第一章 水稻CDPKs在全生育期和激素处理的表达谱分析第13-49页
 1 文献综述第13-27页
   ·植物钙依赖的蛋白激酶第13-26页
     ·植物中的CDPK/SnRK蛋白激酶家族第14-16页
     ·CDPKs活性的调节第16-18页
       ·Ca~(2+)调节第16-17页
       ·磷酸化调节第17-18页
       ·磷脂调节第18页
       ·14-3-3蛋白调节第18页
     ·CDPKs的亚细胞定位第18-19页
     ·CDPKs基因表达分析第19-20页
     ·CDPKs在钙信号转导的作用第20-24页
       ·CDPKs在植物生长发育过程中的作用第20-21页
       ·CDPKs在非生物胁迫信号传导中的作用第21-22页
       ·CDPKs在植物防御反应中的作用第22-23页
       ·CDPKs在离子运输中的调节作用第23页
       ·CDPKs在激素应答中的作用第23-24页
       ·CDPKs在细胞骨架组构重排中的作用第24页
     ·CDPKs信号途径的特异性和交叉性第24-25页
     ·植物CDPKs的全基因组分析及表达谱研究第25-26页
   ·基因芯片技术在水稻基因表达上的应用第26-27页
 2 研究目的和意义第27-28页
 3 材料与方法第28-31页
   ·数据库搜索第28页
   ·基因和蛋白结构分析第28页
   ·进化树分析第28页
   ·芯片表达谱分析第28-29页
   ·RNA提取和Real-time PCR第29-31页
 4 结果与分析第31-44页
   ·水稻CDPKs基因的基本信息第31-35页
   ·进化树分析第35-36页
   ·OsCPKs外显子-内含子和模体分析第36-37页
   ·OsCPKs基因芯片表达谱分析第37-42页
   ·OsCPKs基因在激素(GA3、NAA和KT)处理后的表达分析第42-44页
 5 讨论第44-49页
   ·水稻CDPKs基因分析第44-45页
   ·水稻OsCPKs的进化第45-46页
   ·OsCPKs在种子发育中的作用第46-47页
   ·OsCPKs在花粉发育中的作用第47页
   ·OsCPKs与激素调节第47-49页
第二章 黑藻C_4型PEPC基因的克隆及转基因水稻培育和研究第49-89页
 1 文献综述第49-62页
   ·C_3植物、C_4植物和CAM植物的光合原理第49-50页
   ·C_4光合作用的进化第50-58页
     ·C_4光合作用的概况第50-52页
     ·C_4光合途径进化的原因及基础第52-53页
     ·C_4光合作用的进化过程第53-54页
     ·C_4光合作用的分子进化第54-58页
       ·CA(Carbonic anhydrase)第54页
       ·PEPC第54-56页
       ·NADP-ME第56页
       ·PPDK第56-57页
       ·Rubisco第57-58页
   ·C_4基因对C_3植物的转化及其生理影响第58-61页
     ·PEPC第58-60页
       ·PEPC对C_3植物的转化及表达第58-59页
       ·超表达PEPC植物的生理特性第59-60页
     ·NADP-ME的转基因应用第60页
     ·PPDK的转基因应用第60-61页
     ·双基因转化和多转基因第61页
   ·高光效基因转化存在的问题第61-62页
 2 本研究的目的和意义第62-63页
 3 材料与方法第63-70页
   ·实验材料第63页
   ·目的基因第63页
   ·实验所用到的菌株和载体第63页
   ·Hvppc2基因的克隆第63-64页
   ·超表达载体构建第64-65页
   ·水稻愈伤诱导和遗传转化第65页
   ·转基因植株PCR检测第65-66页
   ·转基因植株拷贝数分析及表达量检测第66-67页
   ·转基因水稻叶片PEPC、NADP-ME、PPDK酶活性的测定第67页
   ·光合生理测定第67-68页
     ·气体交换测定第67-68页
     ·叶绿素荧光测定第68页
     ·叶绿素含量测定第68页
   ·模拟干旱条件下转基因植株的生理测定第68-70页
     ·SOD活性的测定第68页
     ·MDA含量的测定第68-69页
     ·脯氨酸含量的测定第69页
     ·可溶性糖含量的测定第69-70页
   ·主要农艺性状的考察第70页
 4.结果与分析第70-84页
   ·Hvppc2基因的克隆分析第70-73页
     ·Hvppc2蛋白质功能位点和结构域分析第70-72页
     ·Hvppc2蛋白氨基酸序列的进化分析第72-73页
   ·Hvppc2超表达植株的获得及分子检测第73-75页
   ·pR1300-hvppc2转基因植株的酶活测定第75-77页
   ·pR1300-hvppc2转基因植株的气体交换参数测定第77-79页
   ·叶绿素荧光特性的初步测定第79页
   ·叶绿素含量比较第79-80页
   ·模拟干旱条件下转基因植株的生理测定第80-83页
     ·转Hvppc2基因水稻的SOD含量分析第80页
     ·转Hvppc2基因水稻的MDA含量分析第80-81页
     ·转Hvppc2基因水稻的脯氨酸含量和可溶性糖含量分析第81-83页
   ·转Hvppe2基因水稻农艺性状考察第83-84页
 5 讨论第84-89页
   ·高表达Hvppc2基因水稻有更好的光合能力第84-85页
   ·高表达Hvppc2基因水稻有潜在的耐旱能力第85页
   ·转Hvppc2基因水稻农艺性状考察第85-86页
   ·后续工作探讨第86-87页
   ·小结与展望第87-89页
参考文献第89-103页
致谢第103-104页
附录1 Protocols第104-118页
附录2第118页

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