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水稻组蛋白末端修饰酶基因的功能研究

缩略词表第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-40页
   ·染色质是真核生物基因表达与调控的物质基础第12-13页
   ·表观遗传学(Epigenetics)第13-14页
   ·组蛋白末端的动力学修饰变化及与之相关的修饰酶第14-33页
     ·组蛋白尾部修饰的类型第14-15页
     ·组蛋白尾部的修饰与转录调控第15-17页
     ·组蛋白乙酰化与去乙酰化第17-20页
     ·组蛋白甲基化与去甲基化第20-28页
     ·组蛋白去甲基化及与之相关的酶第28-32页
     ·其它的组蛋白末端修饰第32-33页
   ·DNA甲基化与去甲基化第33-35页
     ·"第5种碱基"第33页
     ·DNA甲基转移酶第33-34页
     ·DNA去甲基化酶第34-35页
   ·基因的命名法第35-36页
   ·植物表观基因组学研究进展第36-37页
   ·几种研究表观遗传的技术和方法第37-39页
     ·DNA甲基化分析方法第37-38页
     ·染色质免疫沉淀第38页
     ·免疫染色第38-39页
     ·PICh(Proteomics of Isolated Chromatin segments)第39页
   ·本研究的目的和意义:第39-40页
2 材料与方法第40-55页
   ·水稻材料与来源第40页
   ·菌株第40页
   ·基因序列分析第40页
   ·载体的构建第40-41页
   ·农杆菌介导的遗传转化第41-42页
   ·基因枪介导的瞬时表达与GFP观察第42页
   ·核酸操作方法第42-44页
     ·DNA抽提与Southern杂交第42-43页
     ·RNA抽提和Northern杂交分析第43页
     ·RT-PCR和实时定量RT-PCR分析第43页
     ·Small RNA文库的构建第43-44页
   ·蛋白质操作方法第44-47页
     ·蛋白原核表达,纯化及体外去甲基化酶活实验第44-45页
     ·水稻叶片组蛋白的抽提第45页
     ·水稻总蛋白的抽提方法第45页
     ·细胞质蛋白与细胞核蛋白的分离方法第45-46页
     ·Western杂交及所用抗体第46页
     ·OsSRT1和JMJ706抗体的获得第46-47页
   ·水稻染色质操作相关实验第47-55页
     ·DNA甲基化分析第47页
     ·染色质免疫沉淀第47-48页
     ·原位免疫染色第48-55页
3 结果与分析第55-102页
   ·OsSRT1基因功能的研究第55-58页
     ·OsSRT1可去除组蛋白H3K9位点的乙酰化修饰第55-56页
     ·OsSRT1抗原表达、纯化、抗体制备、检测与纯化第56-58页
     ·使用纯化抗体构建ChIP-Seq文库第58页
   ·水稻组蛋白去甲基化酶基因家族第58-65页
     ·水稻组蛋白去甲基化酶家族基因序列分析第58-65页
     ·RT-PCR分析部分jmjC家族基因的表达谱第65页
   ·水稻JMJ706基因功能缺失后导致花发育异常第65-70页
     ·JMJ706基因功能缺失突变体材料的获得第65-66页
     ·JMJ706突变体导致花发育异常第66-70页
   ·JMJ706是一个组蛋白H3K9去甲基化酶第70-74页
     ·JMJ706体外的去甲基化酶活性分析第70-71页
     ·JMJ706突变体的组蛋白修饰情况第71-73页
     ·超量表达JMJ706植株的H3K9甲基化修饰情况第73-74页
   ·JMJ706基因全长cDNA互补以及amiRNA转化验证第74-80页
     ·用于全长cDNA互补载体的改造第74-76页
     ·互补载体的构建及转化第76-78页
     ·互补材料的获得及检测第78-79页
     ·利用人工小RNA(amiRNA)技术对JMJ706进行抑制第79-80页
   ·JMJ706蛋白在细胞内的精确定位第80-81页
     ·JMJ706洋葱表皮的亚细胞定位分析第80页
     ·JMJ706在细胞核内的精细定位第80-81页
   ·JMJ706突变后引起花发育突变的原因分析第81-85页
     ·JMJ706突变引起部分花发育相关基因的表达发生改变第81-83页
     ·JMJ706表观调控OsMADS47和DH1基因第83-85页
   ·JMJ706与基因表达第85-95页
     ·DNA甲基化分析异染色质相关区域第85-86页
     ·野生型和突变体两个时期的全基因组芯片分析第86-89页
     ·Os03g02470基因表达和DNA甲基化修饰情况第89-94页
     ·野生型和突变体两个时期的small RNA cDNA文库的构建第94-95页
   ·JMJ706与SUVH家族基因之间的关系分析第95-99页
     ·SUVH基因在jmj6中的表达情况第95-96页
     ·构建水稻SUVH亚家族基因amiRNA载体并转化jmj6第96-98页
     ·amiSDG转基因植株表达量分析第98-99页
   ·JMJ706抗体制备第99-102页
4 讨论第102-112页
   ·水稻去乙酰化酶OsSRT1功能的探讨第102页
   ·植物组蛋白去甲基化酶与其他物种的不同第102-105页
   ·JMJ706去甲基化酶活性及可能行使的染色质调节功能第105页
   ·JMJ706可影响水稻的多种发育过程第105-109页
     ·JMJ706突变引起不同的花形态突变第105-106页
     ·JMJ706突变后影响种子的胚乳发育第106-108页
     ·JMJ706突变后影响水稻开花期第108-109页
   ·针对JMJ706深入的功能探讨第109-110页
     ·JMJ706控制基因的表达第109-110页
     ·JMJ706与水稻SUVH基因之间的功能关系第110页
   ·其它jmjC基因可能的功能第110-111页
   ·组蛋白末端的表观动力学修饰与植物的生长发育第111-112页
参考文献第112-129页
附录第129-145页
 附录A第129-144页
 附录B第144-145页
致谢第145页

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