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兔子体外成熟卵母细胞用于体细胞核移植的研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-14页
1 前言第14-35页
   ·哺乳动物细胞核移植的研究进展第14-22页
     ·胚胎细胞核移植的研究进展第14-16页
     ·体细胞核移植的研究进展第16页
     ·兔子细胞核移植的研究进展第16-22页
   ·哺乳动物核移植的研究方法第22-25页
     ·不依赖显微操作仪的方法第22页
     ·依赖显微操作仪的方法第22-24页
     ·连续核移植第24-25页
   ·影响哺乳动物核移植成功的因素第25-35页
     ·供核细胞的因素第25-28页
     ·受核胞质的因素第28-29页
     ·核质互作的因素第29-31页
     ·胚胎激活方法的因素第31-33页
     ·胚胎移植的因素第33-35页
2 材料与方法第35-45页
   ·试剂的配制及用品的制备第35-38页
     ·试剂的配制及保存第35-37页
     ·用品的制备第37-38页
   ·供核细胞的制备第38-41页
     ·卵丘细胞的制备第38-39页
     ·胎儿成纤维细胞的制备第39页
     ·耳朵皮肤成纤维细胞的制备第39-40页
     ·细胞周期的调控与检测第40-41页
     ·细胞的冷冻保存与复苏第41页
   ·受核胞质的制备第41-42页
     ·成熟卵母细胞的获得第41-42页
     ·诱导胞质突起第42页
     ·去除极体及细胞核第42页
   ·供核细胞的引入第42-43页
     ·供核细胞的准备第42-43页
     ·供核细胞注入卵周隙第43页
     ·电融合第43页
   ·重构胚的孤雌激活及体外培养第43-45页
     ·重构胚的孤雌激活第43-44页
     ·重构胚的体外培养及结果观察第44-45页
3 结果与分析第45-57页
   ·不同直径卵泡内卵母细胞直径的差异第45页
   ·不同直径卵泡内卵母细胞染色质构型的变化规律第45-46页
   ·不同直径卵泡内卵母细胞的核进程第46-50页
   ·兔子卵母细胞孤雌激活条件的优化第50-53页
     ·卵母细胞体外培养时间与孤雌激活后胚胎发育能力的关系第50-51页
     ·不同方法抑制MPF第51页
     ·不同激活剂浓度对兔子卵母细胞孤雌激活后胚胎发育的影响第51-52页
     ·不同直径卵泡内卵母细胞孤雌激活后胚胎发育能力的差异第52-53页
   ·兔子体细胞核移植条件的优化第53-57页
     ·Demecolcine 在去核过程中的应用第53页
     ·供核细胞的种类及细胞周期调节第53-55页
     ·电融合条件的摸索第55页
     ·体外培养时间对核移植效率的影响第55-56页
     ·MG132 对重构胚发育的影响第56页
     ·胚胎移植的结果第56-57页
4 讨论第57-64页
   ·受核胞质因素对克隆效率的影响第57-60页
     ·卵泡直径、卵母细胞直径与卵母细胞成熟能力之间的关系第57-58页
     ·卵泡生长过程中卵母细胞染色质构型的变化第58-59页
     ·卵泡直径与卵母细胞发育能力之间的关系第59页
     ·体外培养时间对卵母细胞发育能力的影响第59-60页
     ·去核方法对重构胚发育的影响第60页
   ·供核细胞因素对克隆效率的影响第60-61页
     ·供核细胞种类对重构胚发育的影响第60-61页
     ·供核细胞所处细胞周期对重构胚发育的影响第61页
   ·激活方案对克隆效率的影响第61-62页
   ·受体处理与移植方案对克隆效率的影响第62-64页
5 结论第64-65页
6 参考文献第65-79页
7 图版说明第79-82页
8 致谢第82-83页
9 攻读学位期间发表论文情况第83-85页
附表第85页

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