| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-28页 |
| 1. 异尖线虫及异尖线虫病概述 | 第12页 |
| 2. 异尖线虫生活史及流行情况 | 第12-15页 |
| 3. 异尖线虫分类鉴定方法概述 | 第15-27页 |
| ·形态学分类方法 | 第15-16页 |
| ·分子生物学分类鉴定方法 | 第16-27页 |
| ·PCR-限制片段长度多态性分析（PCR-RFLP） | 第16-17页 |
| ·PCR-单链构象多态性（PCR-SSCP） | 第17-19页 |
| ·环介导等温扩增(LAMP)技术 | 第19-26页 |
| ·荧光定量PCR 技术 | 第26页 |
| ·其他分子生物学分类鉴定方法 | 第26-27页 |
| 4. 本课题研究的目的、意义和主要内容 | 第27-28页 |
| 第一章 应用PCR-RFLP 方法鉴别异尖线虫 | 第28-44页 |
| 1 材料与方法 | 第28-36页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·虫体样本 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·试剂配制 | 第28-29页 |
| ·主要设备 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-36页 |
| ·形态学初步分类 | 第29-30页 |
| ·虫体总DNA 提取 | 第30-31页 |
| ·ITS 基因片段的PCR 扩增 | 第31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第31页 |
| ·胶回收、克隆和测序 | 第31-34页 |
| ·阳性重组质粒提取 | 第34-35页 |
| ·PCR-RFLP 分析 | 第35页 |
| ·特异性引物PCR 扩增 | 第35-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-42页 |
| ·异尖线虫幼虫的感染情况 | 第36页 |
| ·镜检结果 | 第36页 |
| ·ITS-PCR 扩增结果 | 第36-38页 |
| ·序列分析 | 第38-40页 |
| ·PCR-RFLP 分析 | 第40-41页 |
| ·特异性引物PCR 扩增结果 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 第二章 简单异尖线虫环介导等温扩增（LAMP）鉴定方法的建立和应用 | 第44-54页 |
| 1 材料和方法 | 第44-46页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·虫体来源 | 第44页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第44页 |
| ·引物设计和合成 | 第44-45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·虫体总DNA 的提取 | 第45页 |
| ·LAMP 反应及条件的优化 | 第45-46页 |
| ·特异性试验 | 第46页 |
| ·灵敏性试验 | 第46页 |
| ·样品试验 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-52页 |
| ·LAMP 检测结果 | 第46-47页 |
| ·反应条件优化结果 | 第47-50页 |
| ·dNTPs 浓度优化结果 | 第47-48页 |
| ·Mg~(2+) 浓度优化结果 | 第48页 |
| ·Betaine 浓度优化结果 | 第48-49页 |
| ·内外引物浓度比优化结果 | 第49页 |
| ·反应温度 | 第49-50页 |
| ·反应时间的影响 | 第50页 |
| ·特异性试验结果 | 第50-51页 |
| ·灵敏性试验结果 | 第51页 |
| ·样品试验结果 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 第三章 简单异尖线虫和典型异尖线虫SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR 鉴定方法的建立 | 第54-64页 |
| 1 材料和方法 | 第54-56页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·虫体来源 | 第54页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第54页 |
| ·引物设计和合成 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-56页 |
| ·虫体总DNA 的提取 | 第54-55页 |
| ·普通PCR | 第55页 |
| ·实时荧光定量PCR 体系和程序 | 第55页 |
| ·引物浓度的优化 | 第55页 |
| ·灵敏性试验 | 第55-56页 |
| ·标准曲线的建立 | 第56页 |
| ·重复性与稳定性检测 | 第56页 |
| ·特异性试验 | 第56页 |
| ·样品试验 | 第56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-62页 |
| ·普通PCR 结果 | 第56页 |
| ·引物浓度优化结果 | 第56-57页 |
| ·灵敏性试验结果 | 第57-58页 |
| ·标准曲线的建立 | 第58-59页 |
| ·熔解曲线分析 | 第59-60页 |
| ·重复性与稳定性试验 | 第60-61页 |
| ·特异性试验结果 | 第61-62页 |
| ·样品试验结果 | 第62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| 全文总结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 缩略词 | 第71-72页 |
| 在学期间发表的论文 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
