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嗜水气单胞菌主要粘附素基因序列及其重组基因表达产物功能分析

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
前言第13-14页
第一部分 文献综述第14-23页
 1 分类第14-15页
 2 血清型第15页
 3 形态特征及培养特性第15-16页
 4 流行及分布范围第16页
 5 毒力因子第16-21页
   ·外毒素第16-17页
   ·胞外蛋白酶第17-18页
   ·粘附因子第18-21页
 6 免疫防制第21页
 7 本研究意义第21-23页
第二部分 嗜水气单包菌主要粘附素基因分析第23-31页
 1 材料第23-24页
   ·试验菌株第23页
   ·质粒第23页
   ·试验试剂第23页
   ·主要仪器第23-24页
 2 方法第24-27页
   ·引物的合成第24页
   ·基因组DNA 模板的提取第24页
   ·Mah 的扩增第24页
   ·PCR 产物的回收第24-25页
   ·PCR 产物的克隆第25-26页
   ·Mah 基因的测序及分析比较第26页
   ·粘附素氨基酸序列分析第26-27页
 3 结果与分析第27-29页
   ·Mah 基因的克隆第27-28页
   ·Mah 基因同源性分析第28页
   ·Mah 基因对应氨基酸序列比对分析第28-29页
 4 讨论第29-31页
第三部分 重组菌ZAPB 表达条件的优化及其产物的纯化第31-38页
 1 材料第31页
   ·试验菌株第31页
   ·主要仪器第31页
   ·主要试剂第31页
 2 方法第31-34页
   ·试验菌株的复苏第31-32页
   ·表达条件的优化第32-33页
   ·可溶性表达的探索第33页
   ·表达产物的纯化及复性第33-34页
 3 结果与分析第34-36页
   ·ZAPB 表达条件的优化第34页
   ·可溶性表达的分析第34页
   ·目的蛋白的纯化及复性第34-36页
 4 讨论第36-38页
第四部分 MAH-TRXA 融合蛋白的生物学功能分析第38-48页
 1 材料第38-39页
   ·试验菌株第38页
   ·试验细胞第38页
   ·试验动物第38页
   ·主要试剂第38页
   ·主要仪器第38-39页
 2 方法第39-41页
   ·提取ZN1 外膜蛋白第39页
   ·兔抗血清的制备第39页
   ·Mah-TrxA 融合蛋白生物学特性分析第39-40页
   ·Mah-TrxA 粘附功能分析第40-41页
 3 结果与分析第41-46页
   ·ELISA 分析Mah-TrxA 抗原性第41页
   ·ELISA 分析Mah-TrxA 免疫原性第41页
   ·各菌与EPC 的粘附结果第41-42页
   ·Mah-TrxA 对Ah 菌粘附EPC 的影响第42页
   ·抗血清对Ah 菌粘附EPC 的影响第42-46页
 4 讨论第46-48页
   ·抗原性及免疫原性分析第46页
   ·粘附功能分析第46-48页
结论第48-49页
参考文献第49-54页
附录第54-60页
致谢第60页

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