中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
引言 | 第12-15页 |
第一部分 文献综述 | 第15-63页 |
第一章 荧光报告基因综述 | 第15-26页 |
1 荧光素酶 | 第15-16页 |
·荧光素酶的来源与性质 | 第15页 |
·荧光素酶的应用 | 第15-16页 |
2 绿色荧光蛋白 | 第16-20页 |
·绿色荧光蛋白的发现 | 第16页 |
·绿色荧光蛋白的结构及发光机制 | 第16页 |
·绿色荧光蛋白的优点 | 第16-17页 |
·绿色荧光蛋白的应用 | 第17-19页 |
·绿色荧光蛋白突变体 | 第19-20页 |
·绿色荧光蛋白存在的问题 | 第20页 |
3 红色荧光蛋白 | 第20-22页 |
·DsRed 理化性质 | 第20-21页 |
·DsRed 的突变体 | 第21页 |
·DsRed 的应用 | 第21页 |
·荧光蛋白的综合利用 | 第21-22页 |
参考文献 | 第22-26页 |
第二章 转基因鱼综述 | 第26-44页 |
1 转基因鱼载体 | 第26-32页 |
·转基因鱼构件 | 第26-29页 |
·转基因鱼中使用的转座子 | 第29-32页 |
2 转基因鱼外源基因导入方法 | 第32-36页 |
·显微注射法 | 第32-33页 |
·电脉冲法 | 第33-34页 |
·基因枪法 | 第34页 |
·精子介导基因转移法 | 第34-36页 |
3 转基因鱼的筛选和鉴定 | 第36-37页 |
·斑点杂交法 | 第36页 |
·PCR 法 | 第36-37页 |
·Southern 杂交法 | 第37页 |
4 转基因鱼体系的应用及存在问题 | 第37-39页 |
·转基因鱼的应用 | 第37-38页 |
·转基因鱼中存在的问题 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-44页 |
第三章 piggyBac(PB)转座子研究进展 | 第44-54页 |
1 PB 转座子的发现 | 第44-45页 |
2 PB 转座子的结构和转座机制 | 第45-46页 |
·PB 转座子的结构 | 第45页 |
·PB 转座子的转座机制 | 第45-46页 |
3 PB 转座系统的应用 | 第46-51页 |
·PB 转座系统在昆虫中的应用 | 第46-48页 |
·PB 转座子在家蚕研究中应用 | 第48-49页 |
·PB 转座子在哺乳动物中的应用 | 第49-51页 |
·PB 转座子在转基因鱼研究中应用 | 第51页 |
参考文献 | 第51-54页 |
第四章 BmNPV 多角体包装特性及应用 | 第54-63页 |
1 杆状病毒分类与生活史 | 第54-55页 |
2 杆状病毒基因表达调控的级联模型 | 第55-56页 |
3 杆状病毒结构蛋白 | 第56-61页 |
·CRV 与PDV 共有的蛋白 | 第56-57页 |
·包涵型病毒独有的结构蛋白 | 第57页 |
·多角体有关结构蛋白 | 第57-59页 |
·家蚕核型多角体病毒(BmNPV)多角体 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-63页 |
第二部分 研究报告 | 第63-118页 |
第五章 研究目的与内容 | 第63-66页 |
第六章 材料和方法 | 第66-79页 |
1 一般材料 | 第66-71页 |
·生物材料 | 第66页 |
·工具酶 | 第66页 |
·培养基 | 第66-67页 |
·常用溶液及缓冲液 | 第67-69页 |
·Southern 杂交常用缓冲液 | 第69页 |
·SDS-PAGE 试剂 | 第69-70页 |
·western blot 试剂 | 第70-71页 |
2 常用仪器 | 第71-72页 |
3 实验方法 | 第72-79页 |
·碱裂解法少量制备质粒DNA | 第72页 |
·限制性内切酶反应 | 第72-73页 |
·连接反应 | 第73页 |
·CaCl2 法制备E.coli 感受态细胞 | 第73页 |
·重组DNA 的转化 | 第73页 |
·家蚕BmN 细胞培养与传代 | 第73-74页 |
·CIK 细胞的培养与传代 | 第74页 |
·细胞的冻存 | 第74页 |
·细胞的复苏 | 第74页 |
·细胞转染 | 第74-75页 |
·细胞基因组 DNA 的提取 | 第75页 |
·鱼体基因组DNA 的提取 | 第75页 |
·Southern 杂交法 | 第75-76页 |
·Western blot | 第76-77页 |
·转基因鱼的制作 | 第77-78页 |
·转基因家蚕的制作 | 第78-79页 |
第七章 团头鲂β-actin 启动子在家蚕中的活性检测 | 第79-87页 |
摘要 | 第79页 |
1 引言 | 第79-80页 |
2 材料与方法 | 第80-82页 |
·实验材料和试剂 | 第80-81页 |
·实验方法 | 第81-82页 |
3 结果与分析 | 第82-84页 |
·pigA3GFPAβdsRed 转染Bm N 细胞的观察及鉴定 | 第82-83页 |
·pigA3GFPAβdsRed 导入家蚕体内后的观察 | 第83-84页 |
4 讨论 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-87页 |
第八章 piggyBac 转座子在鲤科鱼类中的转基因探索 | 第87-107页 |
摘要 | 第87页 |
1 引言 | 第87-90页 |
2 材料和方法 | 第90-93页 |
·材料与试剂 | 第90页 |
·实验方法 | 第90-93页 |
3 结果与分析 | 第93-99页 |
·重组质粒pigA3GFP-CMVDsRed-IEneo 鉴定 | 第93-94页 |
·CIK 细胞的转染 | 第94-96页 |
·转基因金鱼的筛选及鉴定 | 第96-99页 |
5 讨论 | 第99-102页 |
参考文献 | 第102-107页 |
第九章 BmNPV 多角体蛋白对稳定转化细胞表达荧光蛋白的包埋现象初探 | 第107-118页 |
摘要 | 第107页 |
1 引言 | 第107-108页 |
2 材料和方法 | 第108-110页 |
·材料与主要试剂 | 第108-109页 |
·方法 | 第109-110页 |
3 结果与分析 | 第110-113页 |
·表达载体pIZT-DsRed 的鉴定 | 第110页 |
·pIZT-DsRed 介导的转化细胞的筛选 | 第110页 |
·多角体颗粒的荧光检测 | 第110-112页 |
·多角体中包埋外源蛋白的SDS-PAGE 和Western blot 检测 | 第112-113页 |
4 讨论 | 第113-116页 |
参考文献 | 第116-118页 |
结论 | 第118-119页 |
1. 研究结论 | 第118页 |
2. 有待进一步研究的问题 | 第118-119页 |
致谢 | 第119-120页 |