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含双荧光报告基因的转基因载体的应用

中文摘要第1-6页
Abstract第6-12页
引言第12-15页
第一部分 文献综述第15-63页
 第一章 荧光报告基因综述第15-26页
  1 荧光素酶第15-16页
   ·荧光素酶的来源与性质第15页
   ·荧光素酶的应用第15-16页
  2 绿色荧光蛋白第16-20页
   ·绿色荧光蛋白的发现第16页
   ·绿色荧光蛋白的结构及发光机制第16页
   ·绿色荧光蛋白的优点第16-17页
   ·绿色荧光蛋白的应用第17-19页
   ·绿色荧光蛋白突变体第19-20页
   ·绿色荧光蛋白存在的问题第20页
  3 红色荧光蛋白第20-22页
   ·DsRed 理化性质第20-21页
   ·DsRed 的突变体第21页
   ·DsRed 的应用第21页
   ·荧光蛋白的综合利用第21-22页
  参考文献第22-26页
 第二章 转基因鱼综述第26-44页
  1 转基因鱼载体第26-32页
   ·转基因鱼构件第26-29页
   ·转基因鱼中使用的转座子第29-32页
  2 转基因鱼外源基因导入方法第32-36页
   ·显微注射法第32-33页
   ·电脉冲法第33-34页
   ·基因枪法第34页
   ·精子介导基因转移法第34-36页
  3 转基因鱼的筛选和鉴定第36-37页
   ·斑点杂交法第36页
   ·PCR 法第36-37页
   ·Southern 杂交法第37页
  4 转基因鱼体系的应用及存在问题第37-39页
   ·转基因鱼的应用第37-38页
   ·转基因鱼中存在的问题第38-39页
  参考文献第39-44页
 第三章 piggyBac(PB)转座子研究进展第44-54页
  1 PB 转座子的发现第44-45页
  2 PB 转座子的结构和转座机制第45-46页
   ·PB 转座子的结构第45页
   ·PB 转座子的转座机制第45-46页
  3 PB 转座系统的应用第46-51页
   ·PB 转座系统在昆虫中的应用第46-48页
   ·PB 转座子在家蚕研究中应用第48-49页
   ·PB 转座子在哺乳动物中的应用第49-51页
   ·PB 转座子在转基因鱼研究中应用第51页
  参考文献第51-54页
 第四章 BmNPV 多角体包装特性及应用第54-63页
  1 杆状病毒分类与生活史第54-55页
  2 杆状病毒基因表达调控的级联模型第55-56页
  3 杆状病毒结构蛋白第56-61页
   ·CRV 与PDV 共有的蛋白第56-57页
   ·包涵型病毒独有的结构蛋白第57页
   ·多角体有关结构蛋白第57-59页
   ·家蚕核型多角体病毒(BmNPV)多角体第59-61页
  参考文献第61-63页
第二部分 研究报告第63-118页
 第五章 研究目的与内容第63-66页
 第六章 材料和方法第66-79页
  1 一般材料第66-71页
   ·生物材料第66页
   ·工具酶第66页
   ·培养基第66-67页
   ·常用溶液及缓冲液第67-69页
   ·Southern 杂交常用缓冲液第69页
   ·SDS-PAGE 试剂第69-70页
   ·western blot 试剂第70-71页
  2 常用仪器第71-72页
  3 实验方法第72-79页
   ·碱裂解法少量制备质粒DNA第72页
   ·限制性内切酶反应第72-73页
   ·连接反应第73页
   ·CaCl2 法制备E.coli 感受态细胞第73页
   ·重组DNA 的转化第73页
   ·家蚕BmN 细胞培养与传代第73-74页
   ·CIK 细胞的培养与传代第74页
   ·细胞的冻存第74页
   ·细胞的复苏第74页
   ·细胞转染第74-75页
   ·细胞基因组 DNA 的提取第75页
   ·鱼体基因组DNA 的提取第75页
   ·Southern 杂交法第75-76页
   ·Western blot第76-77页
   ·转基因鱼的制作第77-78页
   ·转基因家蚕的制作第78-79页
 第七章 团头鲂β-actin 启动子在家蚕中的活性检测第79-87页
  摘要第79页
  1 引言第79-80页
  2 材料与方法第80-82页
   ·实验材料和试剂第80-81页
   ·实验方法第81-82页
  3 结果与分析第82-84页
   ·pigA3GFPAβdsRed 转染Bm N 细胞的观察及鉴定第82-83页
   ·pigA3GFPAβdsRed 导入家蚕体内后的观察第83-84页
  4 讨论第84-85页
  参考文献第85-87页
 第八章 piggyBac 转座子在鲤科鱼类中的转基因探索第87-107页
  摘要第87页
  1 引言第87-90页
  2 材料和方法第90-93页
   ·材料与试剂第90页
   ·实验方法第90-93页
  3 结果与分析第93-99页
   ·重组质粒pigA3GFP-CMVDsRed-IEneo 鉴定第93-94页
   ·CIK 细胞的转染第94-96页
   ·转基因金鱼的筛选及鉴定第96-99页
  5 讨论第99-102页
  参考文献第102-107页
 第九章 BmNPV 多角体蛋白对稳定转化细胞表达荧光蛋白的包埋现象初探第107-118页
  摘要第107页
  1 引言第107-108页
  2 材料和方法第108-110页
   ·材料与主要试剂第108-109页
   ·方法第109-110页
  3 结果与分析第110-113页
   ·表达载体pIZT-DsRed 的鉴定第110页
   ·pIZT-DsRed 介导的转化细胞的筛选第110页
   ·多角体颗粒的荧光检测第110-112页
   ·多角体中包埋外源蛋白的SDS-PAGE 和Western blot 检测第112-113页
  4 讨论第113-116页
  参考文献第116-118页
结论第118-119页
 1. 研究结论第118页
 2. 有待进一步研究的问题第118-119页
致谢第119-120页

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