中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
引言 | 第14-15页 |
第一部分 文献综述 | 第15-49页 |
第一章 昆虫的变态发育研究进展 | 第15-27页 |
1 引言 | 第15-16页 |
2 保幼激素的研究进展 | 第16-18页 |
·保幼激素的种类、功能 | 第16页 |
·保幼激素的合成及生物调节 | 第16页 |
·保幼激素的分泌运作及代谢调节 | 第16-17页 |
·保幼激素的分子作用机制 | 第17-18页 |
3 昆虫蜕皮行为的激素调控网络 | 第18-21页 |
·促前胸腺素促进蜕皮激素的合成 | 第19页 |
·蜕皮激素双重调控蜕壳启动激素 | 第19-20页 |
·羽化激素促进蜕壳启动激素的分泌 | 第20页 |
·蜕壳启动激素启动昆虫蜕皮 | 第20-21页 |
4 家蚕蜕皮与变态的研究进展 | 第21-22页 |
·家蚕发育的机制 | 第21页 |
·调控家蚕蜕皮与变态的内分泌研 | 第21-22页 |
参考文献 | 第22-27页 |
第二章 转基因家蚕的研究进展 | 第27-42页 |
1 引言 | 第27页 |
2 外源基因导入蚕体 | 第27-30页 |
·显微注射法 | 第28页 |
·精子介导法 | 第28页 |
·基因枪导入法 | 第28页 |
·压力渗透法 | 第28-29页 |
·电穿孔法 | 第29页 |
·扎卵法 | 第29页 |
·重组病毒介导法 | 第29-30页 |
·脉冲场电泳法 | 第30页 |
3 转基因家蚕常用载体 | 第30-35页 |
·基于病毒的载体 | 第30-31页 |
·基于转座子的家蚕转基因载体 | 第31-35页 |
4 转基因家蚕常用的报告基因 | 第35页 |
5 启动子的选择 | 第35-36页 |
6 外源基因在家蚕基因组中的整合与表达 | 第36页 |
7 家蚕转基因技术的应用 | 第36-37页 |
·基础研究 | 第36-37页 |
·增强抗病性 | 第37页 |
·家蚕丝腺反应器 | 第37页 |
参考文献 | 第37-42页 |
第三章 害虫防治研究进展 | 第42-49页 |
1 物理防治 | 第42页 |
2 化学防治 | 第42-43页 |
3 生物防治 | 第43-46页 |
·天敌昆虫防治害虫 | 第43页 |
·昆虫信息素防治害虫 | 第43-44页 |
·昆虫辐射不育技术 | 第44页 |
·生物农药防治害虫 | 第44-45页 |
·昆虫生长调节剂 | 第45页 |
·植物杀虫剂 | 第45-46页 |
4 综合治理 | 第46-47页 |
·农业防治 | 第46页 |
·抗虫转基因作物 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-49页 |
第二部分 研究报告 | 第49-108页 |
第四章 研究目的与研究内容 | 第49-51页 |
1 研究目的及意义 | 第49页 |
2 研究内容 | 第49-51页 |
·主要研究内容 | 第49-50页 |
·主要研究技术路线 | 第50-51页 |
第五章 实验材料与实验方法 | 第51-65页 |
1 实验材料 | 第51-56页 |
·主要试剂 | 第51-55页 |
·菌种与载体 | 第55页 |
·细胞 | 第55页 |
·家蚕 | 第55页 |
·工具酶与试剂盒 | 第55-56页 |
2 常用仪器 | 第56-57页 |
3 实验方法 | 第57-64页 |
·碱裂解法少量制备质粒DNA | 第57页 |
·限制性内切酶反应 | 第57页 |
·连接反应 | 第57页 |
·CaCl_2 法制备 E.coli 感受态细胞 | 第57-58页 |
·重组DNA 的转化 | 第58页 |
·BmN 细胞的传代 | 第58页 |
·BmN 细胞的转染 | 第58-59页 |
·RNA 反转录成cDNA | 第59页 |
·Dot blotting | 第59页 |
·SDS-PAGE 蛋白质电泳 | 第59-61页 |
·Western blot | 第61-63页 |
·多克隆抗体的制备 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-65页 |
第六章 家蚕热休克蛋白基因hsp19.9 启动子活性分析 | 第65-78页 |
摘要 | 第65页 |
1 引言 | 第65-67页 |
2 材料和方法 | 第67-69页 |
·材料 | 第67页 |
·家蚕丝腺总DNA 的提取 | 第67页 |
·PCR 扩增 | 第67页 |
·启动子序列的克隆 | 第67-68页 |
·序列分析 | 第68页 |
·瞬时表达载体的构建 | 第68页 |
·家蚕BmN 细胞的培养和转染 | 第68-69页 |
·重组质粒在家蚕丝腺中以及其他组织中的瞬时表达 | 第69页 |
3 结果与分析 | 第69-73页 |
·启动子的序列分析 | 第69-70页 |
·启动子的序列的二级结构分析 | 第70-71页 |
·瞬时表达载体的构建 | 第71-72页 |
·启动子活性检测 | 第72-73页 |
4 讨论 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-78页 |
第七章 原核表达的BmKIT3~R对家蚕发育的影响 | 第78-84页 |
摘要 | 第78页 |
1 引言 | 第78页 |
2 材料与方法 | 第78-80页 |
·试剂材料 | 第78-79页 |
·BmKIT3~R 基因的化学合成 | 第79页 |
·原核表达载体pET28-IT3~R 的构建 | 第79页 |
·BmKIT3~R 的原核表达及检测 | 第79-80页 |
·原核表达的BmKIT3~R 注射家蚕 | 第80页 |
3 结果 | 第80-82页 |
·原核表达载体pET28-IT3~R 的鉴定 | 第80-81页 |
·重组BmKIT3~R 蛋白的检测 | 第81页 |
·重组BmKIT3~R 对家蚕的影响 | 第81-82页 |
4 讨论 | 第82页 |
参考文献 | 第82-84页 |
第八章 瞬时表达BmKIT3~R对家蚕发育的影响 | 第84-89页 |
摘要 | 第84页 |
1 引言 | 第84页 |
2 材料与方法 | 第84-85页 |
·试剂材料 | 第84页 |
·瞬时表达载体pSK-hsp20.4-IT3~R-PolyA 的构建 | 第84-85页 |
·注射瞬时表达质粒pSK-hsp20.4-IT3~R-polyA 对蚕蛹发育的影响 | 第85页 |
3 结果 | 第85-87页 |
·瞬时表达载体pSK-hsp20.4-IT3~R-polyA 的鉴定 | 第85-86页 |
·注射pSK-hsp20.4-IT3~R-polyA 质粒对蚕蛹发育的影响 | 第86-87页 |
4 讨论 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-89页 |
第九章 转BmKIT3~R基因对家蚕生存率的影响 | 第89-104页 |
摘要 | 第89页 |
1 引言 | 第89-91页 |
2 材料和方法 | 第91-94页 |
·试剂材料 | 第91页 |
·主要仪器 | 第91页 |
·转基因载体的构建 | 第91-92页 |
·转基因载体piggyGFP-neo-IT3~R 导入蚕卵 | 第92页 |
·转基因蚕的筛选 | 第92页 |
·转基因家蚕的分子鉴定 | 第92-93页 |
·转基因家蚕的继代 | 第93页 |
·BmKIT3~R 在转基因家蚕中的表达 | 第93-94页 |
3 结果 | 第94-99页 |
·转基因载体piggyGFP-neo-IT3~R 的鉴定 | 第94页 |
·转基因家蚕的筛选 | 第94-95页 |
·转基因家蚕的鉴定 | 第95-96页 |
·转基因家蚕的继代及生存率调查 | 第96-98页 |
·BmKIT3~R 基因在转基因蚕中的表达 | 第98-99页 |
4 讨论 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-104页 |
第十章 转BmKIT3~R基因对野蚕发育的影响初探 | 第104-108页 |
摘要 | 第104-105页 |
1 材料与方法 | 第105页 |
·材料 | 第105页 |
·杂交 | 第105页 |
2 结果 | 第105-106页 |
·转基因家蚕与野蚕杂交后代的产卵、孵化情况调查 | 第105页 |
·转基因家蚕与野蚕杂交F1 代的生存能力调查 | 第105-106页 |
3 讨论 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-108页 |
结论 | 第108-109页 |
附录一:英文简写对照表 | 第109-111页 |
附录二:载体图谱 | 第111-113页 |
附录三:在校期间发表的论文及科研成果 | 第113-114页 |
致谢 | 第114-115页 |