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转BmKIT3~R基因对家蚕发育与生存率的影响

中文摘要第1-6页
Abstract第6-14页
引言第14-15页
第一部分 文献综述第15-49页
 第一章 昆虫的变态发育研究进展第15-27页
  1 引言第15-16页
  2 保幼激素的研究进展第16-18页
   ·保幼激素的种类、功能第16页
   ·保幼激素的合成及生物调节第16页
   ·保幼激素的分泌运作及代谢调节第16-17页
   ·保幼激素的分子作用机制第17-18页
  3 昆虫蜕皮行为的激素调控网络第18-21页
   ·促前胸腺素促进蜕皮激素的合成第19页
   ·蜕皮激素双重调控蜕壳启动激素第19-20页
   ·羽化激素促进蜕壳启动激素的分泌第20页
   ·蜕壳启动激素启动昆虫蜕皮第20-21页
  4 家蚕蜕皮与变态的研究进展第21-22页
   ·家蚕发育的机制第21页
   ·调控家蚕蜕皮与变态的内分泌研第21-22页
  参考文献第22-27页
 第二章 转基因家蚕的研究进展第27-42页
  1 引言第27页
  2 外源基因导入蚕体第27-30页
   ·显微注射法第28页
   ·精子介导法第28页
   ·基因枪导入法第28页
   ·压力渗透法第28-29页
   ·电穿孔法第29页
   ·扎卵法第29页
   ·重组病毒介导法第29-30页
   ·脉冲场电泳法第30页
  3 转基因家蚕常用载体第30-35页
   ·基于病毒的载体第30-31页
   ·基于转座子的家蚕转基因载体第31-35页
  4 转基因家蚕常用的报告基因第35页
  5 启动子的选择第35-36页
  6 外源基因在家蚕基因组中的整合与表达第36页
  7 家蚕转基因技术的应用第36-37页
   ·基础研究第36-37页
   ·增强抗病性第37页
   ·家蚕丝腺反应器第37页
  参考文献第37-42页
 第三章 害虫防治研究进展第42-49页
  1 物理防治第42页
  2 化学防治第42-43页
  3 生物防治第43-46页
   ·天敌昆虫防治害虫第43页
   ·昆虫信息素防治害虫第43-44页
   ·昆虫辐射不育技术第44页
   ·生物农药防治害虫第44-45页
   ·昆虫生长调节剂第45页
   ·植物杀虫剂第45-46页
  4 综合治理第46-47页
   ·农业防治第46页
   ·抗虫转基因作物第46-47页
  参考文献第47-49页
第二部分 研究报告第49-108页
 第四章 研究目的与研究内容第49-51页
  1 研究目的及意义第49页
  2 研究内容第49-51页
   ·主要研究内容第49-50页
   ·主要研究技术路线第50-51页
 第五章 实验材料与实验方法第51-65页
  1 实验材料第51-56页
   ·主要试剂第51-55页
   ·菌种与载体第55页
   ·细胞第55页
   ·家蚕第55页
   ·工具酶与试剂盒第55-56页
  2 常用仪器第56-57页
  3 实验方法第57-64页
   ·碱裂解法少量制备质粒DNA第57页
   ·限制性内切酶反应第57页
   ·连接反应第57页
   ·CaCl_2 法制备 E.coli 感受态细胞第57-58页
   ·重组DNA 的转化第58页
   ·BmN 细胞的传代第58页
   ·BmN 细胞的转染第58-59页
   ·RNA 反转录成cDNA第59页
   ·Dot blotting第59页
   ·SDS-PAGE 蛋白质电泳第59-61页
   ·Western blot第61-63页
   ·多克隆抗体的制备第63-64页
  参考文献第64-65页
 第六章 家蚕热休克蛋白基因hsp19.9 启动子活性分析第65-78页
  摘要第65页
  1 引言第65-67页
  2 材料和方法第67-69页
   ·材料第67页
   ·家蚕丝腺总DNA 的提取第67页
   ·PCR 扩增第67页
   ·启动子序列的克隆第67-68页
   ·序列分析第68页
   ·瞬时表达载体的构建第68页
   ·家蚕BmN 细胞的培养和转染第68-69页
   ·重组质粒在家蚕丝腺中以及其他组织中的瞬时表达第69页
  3 结果与分析第69-73页
   ·启动子的序列分析第69-70页
   ·启动子的序列的二级结构分析第70-71页
   ·瞬时表达载体的构建第71-72页
   ·启动子活性检测第72-73页
  4 讨论第73-75页
  参考文献第75-78页
 第七章 原核表达的BmKIT3~R对家蚕发育的影响第78-84页
  摘要第78页
  1 引言第78页
  2 材料与方法第78-80页
   ·试剂材料第78-79页
   ·BmKIT3~R 基因的化学合成第79页
   ·原核表达载体pET28-IT3~R 的构建第79页
   ·BmKIT3~R 的原核表达及检测第79-80页
   ·原核表达的BmKIT3~R 注射家蚕第80页
  3 结果第80-82页
   ·原核表达载体pET28-IT3~R 的鉴定第80-81页
   ·重组BmKIT3~R 蛋白的检测第81页
   ·重组BmKIT3~R 对家蚕的影响第81-82页
  4 讨论第82页
  参考文献第82-84页
 第八章 瞬时表达BmKIT3~R对家蚕发育的影响第84-89页
  摘要第84页
  1 引言第84页
  2 材料与方法第84-85页
   ·试剂材料第84页
   ·瞬时表达载体pSK-hsp20.4-IT3~R-PolyA 的构建第84-85页
   ·注射瞬时表达质粒pSK-hsp20.4-IT3~R-polyA 对蚕蛹发育的影响第85页
  3 结果第85-87页
   ·瞬时表达载体pSK-hsp20.4-IT3~R-polyA 的鉴定第85-86页
   ·注射pSK-hsp20.4-IT3~R-polyA 质粒对蚕蛹发育的影响第86-87页
  4 讨论第87-88页
  参考文献第88-89页
 第九章 转BmKIT3~R基因对家蚕生存率的影响第89-104页
  摘要第89页
  1 引言第89-91页
  2 材料和方法第91-94页
   ·试剂材料第91页
   ·主要仪器第91页
   ·转基因载体的构建第91-92页
   ·转基因载体piggyGFP-neo-IT3~R 导入蚕卵第92页
   ·转基因蚕的筛选第92页
   ·转基因家蚕的分子鉴定第92-93页
   ·转基因家蚕的继代第93页
   ·BmKIT3~R 在转基因家蚕中的表达第93-94页
  3 结果第94-99页
   ·转基因载体piggyGFP-neo-IT3~R 的鉴定第94页
   ·转基因家蚕的筛选第94-95页
   ·转基因家蚕的鉴定第95-96页
   ·转基因家蚕的继代及生存率调查第96-98页
   ·BmKIT3~R 基因在转基因蚕中的表达第98-99页
  4 讨论第99-101页
  参考文献第101-104页
 第十章 转BmKIT3~R基因对野蚕发育的影响初探第104-108页
  摘要第104-105页
  1 材料与方法第105页
   ·材料第105页
   ·杂交第105页
  2 结果第105-106页
   ·转基因家蚕与野蚕杂交后代的产卵、孵化情况调查第105页
   ·转基因家蚕与野蚕杂交F1 代的生存能力调查第105-106页
  3 讨论第106-107页
  参考文献第107-108页
结论第108-109页
附录一:英文简写对照表第109-111页
附录二:载体图谱第111-113页
附录三:在校期间发表的论文及科研成果第113-114页
致谢第114-115页

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