致谢 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
文献综述 | 第14-19页 |
引言 | 第19-20页 |
1 材料与方法 | 第20-28页 |
1.1 材料 | 第20页 |
1.1.1 毒株与细胞系 | 第20页 |
1.1.2 相关试剂 | 第20页 |
1.1.3 主要器材 | 第20页 |
1.2 方法 | 第20-28页 |
1.2.1 微载体浓度优化 | 第20-21页 |
1.2.2 细胞接种量优化 | 第21页 |
1.2.3 细胞接种初始搅拌参数优化 | 第21-22页 |
1.2.4 细胞生长搅拌速度优化 | 第22页 |
1.2.5 培养基补给方式优化 | 第22页 |
1.2.6 工艺的验证 | 第22页 |
1.2.7 悬浮培养用细胞种子批的建立 | 第22-23页 |
1.2.8 悬浮培养用细胞种子批的鉴定 | 第23页 |
1.2.9 细胞罐内消化工艺优化 | 第23-24页 |
1.2.10 PCV_2增殖接毒剂量优化 | 第24页 |
1.2.11 PCV_2增殖维持液血清浓度优化 | 第24-25页 |
1.2.12 PCV_2增殖最佳溶氧量优化 | 第25页 |
1.2.13 PCV_2增殖温度优化 | 第25页 |
1.2.14 PCV_2增殖工艺的验证 | 第25-26页 |
1.2.15 PCV_2种毒批的建立 | 第26页 |
1.2.16 PCV_2种毒批的鉴定 | 第26-27页 |
1.2.17 PCV_2在500L(BR13)反应器上的增殖工艺验证 | 第27-28页 |
2 结果 | 第28-40页 |
2.1 微载体使用浓度优化结果 | 第28页 |
2.2 细胞接种量优化结果 | 第28-29页 |
2.3 细胞初始搅拌参数优化结果 | 第29页 |
2.4 细胞生长阶段搅拌速度优化结果 | 第29-30页 |
2.5 培养基补给方式优化结果 | 第30-31页 |
2.6 工艺的重复验证结果 | 第31页 |
2.7 PK-15A悬浮培养细胞种子库的建立结果 | 第31-32页 |
2.7.1 细胞培养形态观察 | 第31-32页 |
2.7.2 细胞种子库信息 | 第32页 |
2.8 PK-15A悬浮培养细胞种子库的鉴定结果 | 第32-33页 |
2.8.1 细胞纯净性检验结果 | 第32页 |
2.8.2 病毒培养适应性检验结果 | 第32-33页 |
2.9 PK-15A细胞罐内消化工艺确定结果 | 第33页 |
2.9.1 BC-7L反应器中消化工艺确定结果 | 第33页 |
2.9.2 PK-15A细胞在BR11/BR12/BR13反应器中连续3级放大工艺 | 第33页 |
2.10 PCV2增殖接毒剂量优化结果 | 第33-34页 |
2.11 PCV_2增殖维持液血清浓度优化结果 | 第34-35页 |
2.12 PCV_2增殖最佳溶氧参数确定结果 | 第35页 |
2.13 PCV_2增殖温度优化结果 | 第35-36页 |
2.14 PCV2增殖最优参数重复验证结果 | 第36-37页 |
2.15 PCV2种毒批建立 | 第37-38页 |
2.15.1 PCV_2基础毒种的繁殖及TCID_(50)测定 | 第37页 |
2.15.2 PCV_2不同代次毒种冻存信息 | 第37-38页 |
2.16 PCV_2种毒批鉴定结果 | 第38页 |
2.16.1 病毒基因鉴定 | 第38页 |
2.16.2 纯净性检验 | 第38页 |
2.17 PCV_2在500L(BR13)反应器上的增殖工艺验证 | 第38-40页 |
3 讨论 | 第40-43页 |
结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
附录 | 第48-50页 |
作者简介 | 第50页 |