| 中文摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 文缩略词表（Abbreviation） | 第18-20页 |
| 前言 | 第20-23页 |
| 第一部分 三七SFE对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用研究 | 第23-43页 |
| 1.实验材料 | 第23-27页 |
| 1.1 实验动物 | 第23页 |
| 1.2 实验试剂 | 第23-25页 |
| 1.3 实验仪器 | 第25-26页 |
| 1.4 药物与试剂的配制 | 第26-27页 |
| 2.实验方法 | 第27-34页 |
| 2.1 实验动物分组与给药方法 | 第27页 |
| 2.2 大鼠大脑中动脉栓塞模型的建立 | 第27-28页 |
| 2.3 神经行为学评分 | 第28页 |
| 2.4 干湿重法检测脑组织含水量 | 第28页 |
| 2.5 TTC法检测脑梗塞体积 | 第28页 |
| 2.6 Fluo-3/AM荧光染料法检测大鼠海马细胞内钙离子浓度 | 第28-29页 |
| 2.7 RT-PCR法检测PICK1 mRNA、GluR2 mRNA表达 | 第29-31页 |
| 2.7.1 组织总RNA的提取 | 第29页 |
| 2.7.2 RNA含量测定 | 第29页 |
| 2.7.3 逆转录合成c DNA | 第29-30页 |
| 2.7.4 实时荧光定量PCR反应 | 第30-31页 |
| 2.8 Western blot法检测PICK1蛋白、GluR2蛋白表达 | 第31-33页 |
| 2.8.1 组织总蛋白的提取 | 第31页 |
| 2.8.2 BCA蛋白定量 | 第31页 |
| 2.8.3 SDS-PAGE电泳 | 第31-33页 |
| 2.9 免疫共沉淀法检测PICK1/GluR2融合蛋白表达 | 第33-34页 |
| 2.9.1 组织总蛋白的提取 | 第33页 |
| 2.9.2 BCA蛋白定量 | 第33页 |
| 2.9.3 免疫共沉淀实验 | 第33-34页 |
| 3.统计学分析 | 第34页 |
| 4.实验结果 | 第34-41页 |
| 4.1 三七SFE对MCAO大鼠神经行为学评分的影响 | 第34页 |
| 4.2 三七SFE对MCAO大鼠脑组织含水量的影响 | 第34-35页 |
| 4.3 三七SFE对MCAO大鼠脑梗塞体积的影响 | 第35-36页 |
| 4.4 三七SFE对MCAO大鼠海马细胞内钙离子浓度的影响 | 第36-37页 |
| 4.5 三七SFE对MCAO大鼠海马组织PICK1 mRNA、GluR2 mRNA表达的影响 | 第37-39页 |
| 4.6 三七SFE对MCAO大鼠海马组织PICK1、GluR2蛋白表达的影响 | 第39-40页 |
| 4.7 三七SFE对MCAO大鼠海马组织PICK1/GluR2融合蛋白表达的影响 | 第40-41页 |
| 5.讨论 | 第41-42页 |
| 6.小结 | 第42-43页 |
| 第二部分 三七SFE对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用研究 | 第43-60页 |
| 1. 实验材料 | 第43-45页 |
| 1.1 实验药物与试剂 | 第43-44页 |
| 1.2 实验仪器 | 第44页 |
| 1.3 细胞株 | 第44页 |
| 1.4 药物与试剂的配制 | 第44-45页 |
| 2.实验方法 | 第45-48页 |
| 2.1 细胞培养 | 第45页 |
| 2.2 谷氨酸损伤PC12细胞模型的建立 | 第45页 |
| 2.3 实验分组与给药方法 | 第45-46页 |
| 2.4 PC12细胞形态的观察 | 第46页 |
| 2.5 MTT法检测细胞存活率 | 第46页 |
| 2.6 LDH法检测乳酸脱氢酶活性 | 第46-47页 |
| 2.7 Hoechst 33342 染色法检测细胞凋亡 | 第47页 |
| 2.8 Fluo-3/AM荧光染色法检测细胞内钙离子浓度 | 第47页 |
| 2.9 RT-PCR法检测PICK1 mRNA、GluR2 mRNA表达 | 第47页 |
| 2.9.1 细胞总RNA的提取 | 第47页 |
| 2.9.2 RNA含量测定 | 第47页 |
| 2.9.3 逆转录合成c DNA | 第47页 |
| 2.9.4 实时荧光定量PCR反应 | 第47页 |
| 2.10 Western blot法检测PICK1蛋白、GluR2蛋白表达 | 第47-48页 |
| 2.10.1 细胞总蛋白的提取 | 第47-48页 |
| 2.10.2 BCA蛋白定量 | 第48页 |
| 2.10.3 SDS-PAGE电泳 | 第48页 |
| 2.11 免疫共沉淀法PICK1/GluR2融合蛋白表达 | 第48页 |
| 2.11.1 细胞总蛋白的提取 | 第48页 |
| 2.11.2 BCA蛋白定量 | 第48页 |
| 2.11.3 免疫共沉淀实验 | 第48页 |
| 3.统计学分析 | 第48-49页 |
| 4.实验结果 | 第49-57页 |
| 4.1 谷氨酸损伤PC12细胞模型的建立 | 第49页 |
| 4.2 PC12细胞形态的观察 | 第49-50页 |
| 4.3 三七SFE对谷氨酸损伤PC12细胞存活率的影响 | 第50-51页 |
| 4.4 三七SFE对谷氨酸损伤PC12细胞LDH活性的影响 | 第51页 |
| 4.5 三七SFE对谷氨酸损伤PC12细胞凋亡的影响 | 第51-52页 |
| 4.6 三七SFE对谷氨酸损伤PC12细胞内钙离子浓度的影响 | 第52-53页 |
| 4.7 三七SFE对谷氨酸损伤PC12细胞PICK1 mRNA、GluR2 mRNA表达的影响 | 第53-54页 |
| 4.8 三七SFE对谷氨酸损伤PC12细胞PICK1蛋白、GluR2蛋白表达的影响 | 第54-56页 |
| 4.9 三七SFE对谷氨酸损伤PC12细胞PICK1/GluR2融合蛋白表达的影响 | 第56-57页 |
| 5. 讨论 | 第57-59页 |
| 6.小结 | 第59-60页 |
| 第三部分 GC-MS结合分子对接技术虚拟筛选三七SFE抗PICK1蛋白活性成分 | 第60-69页 |
| 1.实验材料 | 第60-61页 |
| 1.1 实验试剂 | 第60页 |
| 1.2 实验仪器 | 第60-61页 |
| 1.3 样品处理方法 | 第61页 |
| 2.实验方法 | 第61-62页 |
| 2.1 GC-MS色谱条件 | 第61页 |
| 2.2 质谱条件 | 第61页 |
| 2.3 小分子配体优化 | 第61页 |
| 2.4 PICK1蛋白受体优化 | 第61-62页 |
| 2.5 分子对接 | 第62页 |
| 3.实验结果 | 第62-68页 |
| 3.1 GC-MS技术鉴定分析三七SFE | 第62-66页 |
| 3.2 三七SFE中化学成分与PICK1蛋白对接结果 | 第66-67页 |
| 3.3 小分子化学成分与PICK1蛋白作用模式分析 | 第67-68页 |
| 4.小结 | 第68-69页 |
| 全文总结 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 综述 | 第76-89页 |
| 参考文献 | 第83-89页 |
| 个人简历 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
