| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-19页 |
| 1.1 耐受抑制剂酿酒酵母研究现状 | 第9-12页 |
| 1.1.1 抑制剂的毒性机制 | 第9-10页 |
| 1.1.2 耐受性菌株的构建 | 第10-12页 |
| 1.2 番茄红素概述 | 第12-16页 |
| 1.2.1 番茄红素的功能及用途 | 第13-14页 |
| 1.2.2 番茄红素的生物合成 | 第14-16页 |
| 1.3 突变基因文库的定向进化概述 | 第16-18页 |
| 1.3.1 易错PCR | 第16-17页 |
| 1.3.2 利用“调控衔接元件”构建启动子文库 | 第17-18页 |
| 1.4 本课题的研究意义和主要内容 | 第18-19页 |
| 1.4.1 研究意义 | 第18页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第18-19页 |
| 第2章 材料与方法 | 第19-35页 |
| 2.1 菌株与质粒 | 第19-21页 |
| 2.1.1 菌株 | 第19-20页 |
| 2.1.2 质粒 | 第20-21页 |
| 2.2 仪器 | 第21-22页 |
| 2.3 试剂和培养基 | 第22-26页 |
| 2.3.1 实验试剂 | 第22-24页 |
| 2.3.2 常用试剂配制 | 第24-25页 |
| 2.3.3 培养基配置 | 第25-26页 |
| 2.4 DNA操作方法 | 第26-31页 |
| 2.4.1 目的片段的扩增 | 第26-28页 |
| 2.4.2 酶切反应 | 第28页 |
| 2.4.3 普通DNA产物回收 | 第28-29页 |
| 2.4.4 DNA片段的连接 | 第29页 |
| 2.4.5 大肠杆菌质粒转化 | 第29页 |
| 2.4.6 大肠转化验证 | 第29-30页 |
| 2.4.7 酿酒酵母转化 | 第30-31页 |
| 2.4.8 酿酒酵母质粒及基因组提取 | 第31页 |
| 2.5 胞内活性氧含量检测 | 第31-32页 |
| 2.6 点板法验证细胞活性 | 第32页 |
| 2.7 发酵培养与产物检测 | 第32-33页 |
| 2.7.1 有氧发酵 | 第32页 |
| 2.7.2 厌氧发酵 | 第32页 |
| 2.7.3 番茄红素的提取与检测 | 第32-33页 |
| 2.7.4 细胞外代谢产物的检测 | 第33页 |
| 2.8 实时定量PCR(qPCR) | 第33-35页 |
| 2.8.1 酵母RNA的提取及反转录 | 第33页 |
| 2.8.2 荧光定量PCR | 第33-35页 |
| 第3章 胞内表达番茄红素对酿酒酵母抗氧化能力的影响 | 第35-45页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 乙酸对酿酒酵母的影响 | 第35-38页 |
| 3.2.1 乙酸对酵母细胞生长的影响 | 第35-36页 |
| 3.2.2 乙酸对酿酒酵母胞内活性氧水平的影响 | 第36-38页 |
| 3.3 胞内表达番茄红素对酵母抗氧化能力的影响 | 第38-44页 |
| 3.3.1 异源表达番茄红素酵母菌株的构建 | 第38-39页 |
| 3.3.2 表达番茄红素对酵母细胞对抑制剂耐受性的影响 | 第39-41页 |
| 3.3.3 表达番茄红素对酵母细胞内活性氧水平的影响 | 第41-43页 |
| 3.3.4 番茄红素对酵母细胞氧化应激相关基因表达水平的影响 | 第43-44页 |
| 3.4 小结 | 第44-45页 |
| 第4章 胞内表达番茄红素对酿酒酵母乙酸耐受性的影响 | 第45-59页 |
| 4.1 引言 | 第45页 |
| 4.2 番茄红素在酿酒酵母乙酸胁迫下提高乙醇产量 | 第45-55页 |
| 4.2.1 番茄红素在乙醇发酵中提高菌株乙酸耐受性的机理推测 | 第45-46页 |
| 4.2.2 番茄红素路径文库的获得 | 第46-51页 |
| 4.2.3 最佳乙酸耐受性菌株的确定 | 第51-53页 |
| 4.2.4 表达番茄红素对菌株乙酸条件下厌氧发酵的影响 | 第53-55页 |
| 4.3 番茄红素提高酵母菌株有氧发酵中乙酸耐受性 | 第55-58页 |
| 4.3.1 番茄红素对酵母细胞乙酸耐受性的影响 | 第55-56页 |
| 4.3.2 发酵接种量对番茄红素表达菌株乙酸耐受性的影响 | 第56-58页 |
| 4.4 小结 | 第58-59页 |
| 第5章 结论与展望 | 第59-61页 |
| 5.1 结论 | 第59页 |
| 5.2 展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 附录 | 第69-71页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
