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胞内表达番茄红素提高酿酒酵母乙酸耐受性的研究

摘要第3-4页
abstract第4页
前言第8-9页
第1章 文献综述第9-19页
    1.1 耐受抑制剂酿酒酵母研究现状第9-12页
        1.1.1 抑制剂的毒性机制第9-10页
        1.1.2 耐受性菌株的构建第10-12页
    1.2 番茄红素概述第12-16页
        1.2.1 番茄红素的功能及用途第13-14页
        1.2.2 番茄红素的生物合成第14-16页
    1.3 突变基因文库的定向进化概述第16-18页
        1.3.1 易错PCR第16-17页
        1.3.2 利用“调控衔接元件”构建启动子文库第17-18页
    1.4 本课题的研究意义和主要内容第18-19页
        1.4.1 研究意义第18页
        1.4.2 研究内容第18-19页
第2章 材料与方法第19-35页
    2.1 菌株与质粒第19-21页
        2.1.1 菌株第19-20页
        2.1.2 质粒第20-21页
    2.2 仪器第21-22页
    2.3 试剂和培养基第22-26页
        2.3.1 实验试剂第22-24页
        2.3.2 常用试剂配制第24-25页
        2.3.3 培养基配置第25-26页
    2.4 DNA操作方法第26-31页
        2.4.1 目的片段的扩增第26-28页
        2.4.2 酶切反应第28页
        2.4.3 普通DNA产物回收第28-29页
        2.4.4 DNA片段的连接第29页
        2.4.5 大肠杆菌质粒转化第29页
        2.4.6 大肠转化验证第29-30页
        2.4.7 酿酒酵母转化第30-31页
        2.4.8 酿酒酵母质粒及基因组提取第31页
    2.5 胞内活性氧含量检测第31-32页
    2.6 点板法验证细胞活性第32页
    2.7 发酵培养与产物检测第32-33页
        2.7.1 有氧发酵第32页
        2.7.2 厌氧发酵第32页
        2.7.3 番茄红素的提取与检测第32-33页
        2.7.4 细胞外代谢产物的检测第33页
    2.8 实时定量PCR(qPCR)第33-35页
        2.8.1 酵母RNA的提取及反转录第33页
        2.8.2 荧光定量PCR第33-35页
第3章 胞内表达番茄红素对酿酒酵母抗氧化能力的影响第35-45页
    3.1 引言第35页
    3.2 乙酸对酿酒酵母的影响第35-38页
        3.2.1 乙酸对酵母细胞生长的影响第35-36页
        3.2.2 乙酸对酿酒酵母胞内活性氧水平的影响第36-38页
    3.3 胞内表达番茄红素对酵母抗氧化能力的影响第38-44页
        3.3.1 异源表达番茄红素酵母菌株的构建第38-39页
        3.3.2 表达番茄红素对酵母细胞对抑制剂耐受性的影响第39-41页
        3.3.3 表达番茄红素对酵母细胞内活性氧水平的影响第41-43页
        3.3.4 番茄红素对酵母细胞氧化应激相关基因表达水平的影响第43-44页
    3.4 小结第44-45页
第4章 胞内表达番茄红素对酿酒酵母乙酸耐受性的影响第45-59页
    4.1 引言第45页
    4.2 番茄红素在酿酒酵母乙酸胁迫下提高乙醇产量第45-55页
        4.2.1 番茄红素在乙醇发酵中提高菌株乙酸耐受性的机理推测第45-46页
        4.2.2 番茄红素路径文库的获得第46-51页
        4.2.3 最佳乙酸耐受性菌株的确定第51-53页
        4.2.4 表达番茄红素对菌株乙酸条件下厌氧发酵的影响第53-55页
    4.3 番茄红素提高酵母菌株有氧发酵中乙酸耐受性第55-58页
        4.3.1 番茄红素对酵母细胞乙酸耐受性的影响第55-56页
        4.3.2 发酵接种量对番茄红素表达菌株乙酸耐受性的影响第56-58页
    4.4 小结第58-59页
第5章 结论与展望第59-61页
    5.1 结论第59页
    5.2 展望第59-61页
参考文献第61-69页
附录第69-71页
发表论文和参加科研情况说明第71-73页
致谢第73页

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