| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 本文所用英文缩写词表 | 第16-17页 |
| 第1章 绪论 | 第17-40页 |
| 1.1 肿瘤及其检测 | 第17-21页 |
| 1.1.1 肿瘤的特点及危害 | 第17-18页 |
| 1.1.2 肿瘤的相关检测方法 | 第18-21页 |
| 1.2 Aptamer及其肿瘤检测应用 | 第21-34页 |
| 1.2.1 Aptamer简介 | 第21-22页 |
| 1.2.2 Aptamer的优势 | 第22-23页 |
| 1.2.3 Aptamer的肿瘤检测应用 | 第23-34页 |
| 1.3 FRET及其肿瘤检测应用 | 第34-38页 |
| 1.3.1 FRET简介 | 第34页 |
| 1.3.2 FRET的肿瘤检测应用 | 第34-38页 |
| 1.4 本文构思 | 第38-40页 |
| 第2章 基于裂开型Aptamer的发夹式荧光探针设计及用于肿瘤细胞检测研究 | 第40-55页 |
| 2.1 前言 | 第40-41页 |
| 2.2 实验部分 | 第41-44页 |
| 2.2.1 试剂与仪器 | 第41-43页 |
| 2.2.2 细胞培养与处理 | 第43页 |
| 2.2.3 探针准备 | 第43页 |
| 2.2.4 流式细胞术分析 | 第43-44页 |
| 2.2.5 共聚焦成像 | 第44页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第44-54页 |
| 2.3.1 实验原理 | 第44-45页 |
| 2.3.2 HSAP探针设计及表征 | 第45-46页 |
| 2.3.3 可行性考察 | 第46-48页 |
| 2.3.4 实验条件优化 | 第48-49页 |
| 2.3.5 靶细胞定量检测 | 第49-50页 |
| 2.3.6 特异性考察 | 第50-51页 |
| 2.3.7 双信号检测 | 第51-54页 |
| 2.4 小结 | 第54-55页 |
| 第3章 基于靶标诱导双链式裂开型Aptamer荧光探针重组装高灵敏检测肿瘤细胞研究 | 第55-71页 |
| 3.1 前言 | 第55-56页 |
| 3.2 实验部分 | 第56-59页 |
| 3.2.1 试剂与仪器 | 第56-58页 |
| 3.2.2 细胞培养和处理 | 第58页 |
| 3.2.3 探针制备和表征 | 第58页 |
| 3.2.4 流式细胞术分析 | 第58-59页 |
| 3.2.5 共聚焦成像 | 第59页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第59-70页 |
| 3.3.1 实验原理 | 第59页 |
| 3.3.2 DSAP探针设计及表征 | 第59-62页 |
| 3.3.3 可行性考察 | 第62-63页 |
| 3.3.4 实验条件优化及DSAP结合速度考察 | 第63-65页 |
| 3.3.5 靶细胞定量检测 | 第65-66页 |
| 3.3.6 特异性考察 | 第66-67页 |
| 3.3.7 双信号检测 | 第67-70页 |
| 3.4 小结 | 第70-71页 |
| 第4章 基于FRET和代谢糖标记技术的Aptamer导向的肿瘤细胞表面特异性糖基化成像研究 | 第71-85页 |
| 4.1 前言 | 第71-72页 |
| 4.2 实验部分 | 第72-76页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第72-73页 |
| 4.2.2 细胞培养与处理 | 第73-74页 |
| 4.2.3 荧光光谱测量 | 第74页 |
| 4.2.4 代谢糖标记 | 第74页 |
| 4.2.5 流式细胞术分析 | 第74-75页 |
| 4.2.6 共聚焦成像 | 第75-76页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第76-83页 |
| 4.3.1 实验原理 | 第76页 |
| 4.3.2 FRET染料对荧光光谱表征 | 第76-78页 |
| 4.3.3 ZYsls靶标初步鉴定 | 第78-79页 |
| 4.3.4 糖代谢标记共定位分析 | 第79页 |
| 4.3.5 实验条件优化 | 第79-80页 |
| 4.3.6 细胞表面特异性GalNAcylation成像 | 第80-82页 |
| 4.3.7 分子内FRET验证 | 第82页 |
| 4.3.8 成像选择性考察 | 第82-83页 |
| 4.4 小结 | 第83-85页 |
| 第5章 基于Aptamer引发的HCR扩增用于肿瘤细胞表面特异性糖基化增强成像研究 | 第85-100页 |
| 5.1 前言 | 第85-86页 |
| 5.2 实验部分 | 第86-90页 |
| 5.2.1 试剂与仪器 | 第86-88页 |
| 5.2.2 细胞培养与处理 | 第88页 |
| 5.2.3 探针制备与表征 | 第88页 |
| 5.2.4 代谢糖标记 | 第88-89页 |
| 5.2.5 流式细胞术分析 | 第89-90页 |
| 5.2.6 共聚焦成像 | 第90页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第90-99页 |
| 5.3.1 实验原理 | 第90-91页 |
| 5.3.2 纳米探针表征 | 第91-93页 |
| 5.3.3 细胞表面特异性GalNAcylation成像 | 第93-94页 |
| 5.3.4 分子内FRET验证 | 第94-95页 |
| 5.3.5 成像增强效应考察 | 第95-96页 |
| 5.3.6 成像选择性考察 | 第96页 |
| 5.3.7 细胞表面特异性Sialylation成像 | 第96-98页 |
| 5.3.8 监测药物处理后细胞表面特异性Sialylation变化 | 第98-99页 |
| 5.4 小结 | 第99-100页 |
| 第6章 转移结肠癌LoVo细胞Aptamer的筛选及用于转移肿瘤细胞和组织特异性成像 | 第100-120页 |
| 6.1 前言 | 第100-101页 |
| 6.2 实验部分 | 第101-109页 |
| 6.2.1 试剂与仪器 | 第101-103页 |
| 6.2.2 细胞培养与处理 | 第103-104页 |
| 6.2.3 起始文库和引物的设计 | 第104页 |
| 6.2.4 筛选过程 | 第104-107页 |
| 6.2.5 克隆测序和序列分析 | 第107页 |
| 6.2.6 Aptamer表征 | 第107-108页 |
| 6.2.7 细胞成像 | 第108页 |
| 6.2.8 组织成像 | 第108-109页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第109-119页 |
| 6.3.1 筛选实验流程 | 第109页 |
| 6.3.2 筛选过程表征 | 第109-111页 |
| 6.3.3 Aptamer序列分析和挑选 | 第111-113页 |
| 6.3.4 Aptamer性能表征 | 第113-116页 |
| 6.3.5 转移肿瘤细胞特异性成像 | 第116-117页 |
| 6.3.6 转移肿瘤组织特异性成像 | 第117-119页 |
| 6.4 小结 | 第119-120页 |
| 结论 | 第120-122页 |
| 参考文献 | 第122-138页 |
| 附录 攻读博士学位期间所发表的学术论文 | 第138-140页 |
| 致谢 | 第140-141页 |
