| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 L-丝氨酸及其应用 | 第9-10页 |
| 1.1.1 L-丝氨酸的生理意义 | 第9页 |
| 1.1.2 L-丝氨酸的应用 | 第9-10页 |
| 1.2 微生物中L-丝氨酸合成和降解途径 | 第10-11页 |
| 1.3 L-丝氨酸生产菌株的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3.1 大肠杆菌产L-丝氨酸 | 第11页 |
| 1.3.2 谷氨酸棒杆菌产L-丝氨酸 | 第11-12页 |
| 1.4 氨基酸转运蛋白研究进展 | 第12-15页 |
| 1.4.1 大肠杆菌中氨基酸转运蛋白的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.4.2 谷氨酸棒杆菌中氨基酸转运蛋白的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.5 本论文立题依据及意义 | 第15页 |
| 1.6 研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-21页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第17-18页 |
| 2.1.2 引物 | 第18-20页 |
| 2.1.3 培养基 | 第20页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.5 实验试剂 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-27页 |
| 2.2.1 菌株活化及培养 | 第21-22页 |
| 2.2.2 菌株感受态制备及转化 | 第22-23页 |
| 2.2.3 基因组DNA与质粒DNA提取 | 第23页 |
| 2.2.4 敲除重组菌株的构建 | 第23-24页 |
| 2.2.5 过表达重组菌株的构建 | 第24页 |
| 2.2.6 分析方法 | 第24-25页 |
| 2.2.7 激光共聚焦显微镜成像 | 第25页 |
| 2.2.8 胞质蛋白和膜蛋白的提取 | 第25页 |
| 2.2.9 荧光强度测定 | 第25页 |
| 2.2.10 L-丝氨酸转运实验 | 第25-27页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第27-49页 |
| 3.1 转运蛋白ThrE对L-丝氨酸转运作用的研究 | 第27-30页 |
| 3.1.1 重组菌?SSAAI-thrE及?SSAAI?thrE的构建 | 第27-28页 |
| 3.1.2 重组菌?SSAAI-thrE及?SSAAI?thrE的发酵特性 | 第28-29页 |
| 3.1.3 分析与讨论 | 第29-30页 |
| 3.2 SYPS-062-33a与SYPS-062四个差异基因对L-丝氨酸转运作用的研究 | 第30-32页 |
| 3.2.1 基因敲除重组菌的构建 | 第30-31页 |
| 3.2.2 基因敲除重组菌的发酵特性 | 第31-32页 |
| 3.2.3 分析与讨论 | 第32页 |
| 3.3 eamA同源基因对L-丝氨酸转运作用的研究 | 第32-36页 |
| 3.3.1 eamA同源基因敲除重组菌的构建 | 第33-34页 |
| 3.3.2 eamA同源基因敲除重组菌的发酵特性 | 第34-35页 |
| 3.3.3 分析与讨论 | 第35-36页 |
| 3.4 基因NCgl0580的功能研究 | 第36-44页 |
| 3.4.1 NCgl0580回补敲除菌株的研究 | 第36-37页 |
| 3.4.2 NCgl0580编码蛋白的定位研究 | 第37-40页 |
| 3.4.3 NCgl0580转运L-丝氨酸的功能验证 | 第40-41页 |
| 3.4.4 NCgl0580过表达对菌株?SSAAI发酵的影响 | 第41-43页 |
| 3.4.5 分析与讨论 | 第43-44页 |
| 3.5 NCgl0580的表达调控研究 | 第44-49页 |
| 3.5.1 敲除NCgl0581重组菌的发酵特性 | 第44-45页 |
| 3.5.2 基因NCgl0581对NCgl0580调控作用的研究 | 第45-47页 |
| 3.5.3 分析与讨论 | 第47-49页 |
| 主要结论与展望 | 第49-51页 |
| 主要结论 | 第49-50页 |
| 展望 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 附录 作者在攻读硕士期间发表的论文 | 第56页 |
