| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 酸性蛋白酶 | 第12-14页 |
| 1.1.1 酸性蛋白酶的分类 | 第12页 |
| 1.1.2 酶学性质 | 第12-13页 |
| 1.1.3 酸性蛋白酶的应用 | 第13-14页 |
| 1.2 酸性蛋白酶的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 黑曲霉酸性蛋白酶的研究 | 第15-16页 |
| 1.2.2 米曲霉酸性蛋白酶的研究 | 第16页 |
| 1.2.3 宇佐美曲霉酸性蛋白酶的研究 | 第16-17页 |
| 1.2.4 白曲霉酸性蛋白酶的研究 | 第17页 |
| 1.3 黑曲霉表达系统 | 第17-18页 |
| 1.4 研究内容和意义 | 第18-20页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第18页 |
| 1.4.2 研究意义 | 第18-20页 |
| 第二章 白曲霉酸性蛋白酶在无孢黒曲SH-2中的表达 | 第20-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-24页 |
| 2.1.1 菌种与载体 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.3 培养基及溶液 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要设备 | 第22-23页 |
| 2.1.5 引物 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-32页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.2.2 无孢黑曲霉SH-2基因组的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.3 大肠杆菌质粒提取 | 第25页 |
| 2.2.4 基因的扩增 | 第25-27页 |
| 2.2.5 表达载体的构建与转化 | 第27-28页 |
| 2.2.6 无孢黑曲霉SH-2的转化 | 第28页 |
| 2.2.7 转化子鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.8 酶活测定 | 第29-30页 |
| 2.2.9 SDS-PAGE蛋白凝胶电泳 | 第30页 |
| 2.2.10 30L发酵罐发酵 | 第30-31页 |
| 2.2.11 酶学性质研究 | 第31-32页 |
| 2.3 结果与分析 | 第32-49页 |
| 2.3.1 生物信息学分析 | 第32-38页 |
| 2.3.2 pepB酶基因及PglaA基因的扩增 | 第38-39页 |
| 2.3.3 pMD18-pepB质粒的验证 | 第39-40页 |
| 2.3.4 转化子PCR鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3.5 表达产物检测 | 第41-43页 |
| 2.3.6 重组菌株上罐发酵试验 | 第43-46页 |
| 2.3.7 酶学性质分析 | 第46-49页 |
| 2.4 本章小结 | 第49-50页 |
| 第三章 白曲霉酸性蛋白酶对大豆分离蛋白水解应用研究 | 第50-60页 |
| 3.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 3.1.1 主要原料 | 第50页 |
| 3.1.2 仪器和设备 | 第50-51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51-52页 |
| 3.2.1 大豆分离蛋白预处理 | 第51页 |
| 3.2.2 水解度测定 | 第51页 |
| 3.2.3 酶解条件优化 | 第51-52页 |
| 3.2.4 单酶水解试验 | 第52页 |
| 3.2.5 双酶水解试验 | 第52页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第52-58页 |
| 3.3.1 大豆分离蛋白水解条件优化 | 第52-55页 |
| 3.3.2 单酶水解大豆分离蛋白试验 | 第55-57页 |
| 3.3.3 双酶水解试验 | 第57-58页 |
| 3.4 本章小结 | 第58-60页 |
| 结论与展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 附件 | 第69页 |