| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第一章 前言 | 第8-25页 |
| 1.1 糖基化概述 | 第8-9页 |
| 1.2 O-GlcNAc 修饰概述 | 第9-15页 |
| 1.2.1 OGT | 第10-11页 |
| 1.2.2 OGA | 第11页 |
| 1.2.3 HBP 途径 | 第11-12页 |
| 1.2.4 O-GlcNAc 修饰的检测方法 | 第12-13页 |
| 1.2.5 O-GlcNAc 修饰与疾病 | 第13-15页 |
| 1.2.6 O-GlcNAc 修饰与其他翻译后修饰之间的联系 | 第15页 |
| 1.3 泛素化修饰概述 | 第15-18页 |
| 1.3.1 泛素化过程 | 第16-17页 |
| 1.3.2 去泛素化 | 第17页 |
| 1.3.3 类泛素化 | 第17页 |
| 1.3.4 泛素化与其他翻译后修饰之间的关系 | 第17-18页 |
| 1.4 O-GlcNAc 修饰对蛋白泛素化的影响 | 第18-22页 |
| 1.4.1 O-GlcNAc 修饰抑制了 26S 蛋白酶体的 ATPase 活性 | 第19页 |
| 1.4.2 O-GlcNAc 修饰会减少某些底物蛋白的泛素化 | 第19-20页 |
| 1.4.3 O-GlcNAc 修饰泛素化相关酶的并调节其功能 | 第20-21页 |
| 1.4.4 某些蛋白受 O-GlcNAc 修饰后间接影响其他蛋白泛素化 | 第21-22页 |
| 1.5 Real-time Profiler PCR Array | 第22-23页 |
| 1.6 研究内容及意义 | 第23-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-29页 |
| 2.1.1 实验用菌株、载体、基因及细胞来源 | 第25页 |
| 2.1.2 主要试剂及耗材 | 第25-27页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.4 引物 | 第28-29页 |
| 2.2 主要溶液 | 第29-31页 |
| 2.2.1 细胞培养相关溶液的配制 | 第29页 |
| 2.2.2 大肠杆菌培养 | 第29页 |
| 2.2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第29-30页 |
| 2.2.4 SDS-PAGE 电泳溶液 | 第30页 |
| 2.2.5 银染溶液 | 第30-31页 |
| 2.2.6 Western Blot 相关溶液的配制 | 第31页 |
| 2.2.7 免疫沉淀相关溶液的配制 | 第31页 |
| 2.3 实验方法 | 第31-43页 |
| 2.3.1 提高总蛋白的 O-GlcNAc 修饰水平 | 第31-38页 |
| 2.3.2 PCR ARRAY 分析 O-GlcNAc 修饰对泛素化相关基因的影响 | 第38-40页 |
| 2.3.3 GlcN 处理下 FBXW10 在转录和表达水平的调控 | 第40-42页 |
| 2.3.4 FBXW10 的 O-GlcNAc 修饰 | 第42-43页 |
| 第三章 实验结果 | 第43-54页 |
| 3.1 提高总蛋白的 O-GlcNAc 修饰水平 | 第43-46页 |
| 3.1.1 HEK293T 细胞过表达 sOGT、ncOGT | 第43-45页 |
| 3.1.2 GlcN、PUGNAc 处理 HEK293T 细胞 | 第45-46页 |
| 3.2 PCR ARRAY 分析 O-GlcNAc 修饰对泛素化相关基因的影响 | 第46-49页 |
| 3.3 GlcN 处理下 FBXW10 在转录和表达水平的调控 | 第49-51页 |
| 3.3.1 GlcN 处理下 FBXW10、FBXO4 在转录水平随时间的变化 | 第49-50页 |
| 3.3.2 GlcN 处理下 FBXW10 在表达水平随时间的变化 | 第50页 |
| 3.3.3 不同来源的 HEK293T 对比验证实验 | 第50-51页 |
| 3.4 FBXW10 的 O-GlcNAc 修饰 | 第51-54页 |
| 第四章 分析与讨论 | 第54-58页 |
| 4.1 提高总蛋白的 O-GlcNAc 修饰水平 | 第54-55页 |
| 4.1.1 HEK293T 细胞过表达 sOGT、ncOGT | 第54页 |
| 4.1.2 GlcN、PUGNAc 处理 HEK293T 细胞 | 第54-55页 |
| 4.2 PCR ARRAY 分析 O-GlcNAc 修饰对泛素化相关基因的影响 | 第55-56页 |
| 4.3 GlcN 处理下 FBXW10 在转录和表达水平的调控 | 第56-57页 |
| 4.4 FBXW10 的 O-GlcNAc 修饰 | 第57-58页 |
| 第五章 结论 | 第58-59页 |
| 第六章 展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第66-67页 |
| 附录 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
