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集胞藻PCC6803多不饱和脂肪酸生物合成关键酶复合体的研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
第一章 绪论第7-17页
    1.1 蛋白质复合体第7-8页
        1.1.1 蛋白质复合体概述第7-8页
    1.2 蛋白质复合体分析技术第8-11页
        1.2.1 蛋白质复合体的纯化分离第8-10页
        1.2.2 蛋白质复合体的鉴定第10-11页
    1.3 脂肪酸合成相关酶复合体研究进展第11-12页
    1.4 集胞藻 PCC 6803 的多不饱和脂肪酸合成第12-15页
        1.4.1 蓝藻概述第12-13页
        1.4.2 集胞藻 PCC 6803 简介第13页
        1.4.3 集胞藻 PCC 6803 的多不饱和脂肪酸合成关键酶第13-15页
    1.5 本文的主要内容第15-17页
第二章 集胞藻 PCC 6803 多不饱和脂肪酸相关基因 C 端 3×FLAG 标签构建第17-30页
    2.1 实验材料与方法第17-23页
        2.1.1 实验材料第17-20页
        2.1.2 实验方法第20-23页
    2.2 实验结果与讨论第23-29页
        2.2.1 获取氯霉素抗性片段第23-25页
        2.2.2 获取上、下游同源臂片段第25-26页
        2.2.3 目的基因 C 端 3×FLAG 标签及氯霉素抗性基因的构建第26-27页
        2.2.4 重组片段转化集胞藻 PCC 6803第27页
        2.2.5 菌落 PCR 验证突变株第27-29页
        2.2.6 测序验证突变株第29页
    2.3 小结第29-30页
第三章 集胞藻 PCC 6803 多不饱和脂肪酸相关蛋白质复合体的表达与纯化第30-47页
    3.1 实验材料与方法第30-38页
        3.1.1 实验材料第30-32页
        3.1.2 实验方法第32-38页
    3.2 实验结果与讨论第38-46页
        3.2.1 突变株培养时间的优化第38-39页
        3.2.2 初步验证突变株中 3×FLAG 标签的表达第39-40页
        3.2.3 蛋白质提取方法的优化第40-42页
        3.2.4 Western blot 检测亲和纯化效率第42-44页
        3.2.5 Native-PAGE 检测蛋白质复合体纯化效果第44-46页
    3.3 小结第46-47页
第四章 集胞藻 PCC 6803 多不饱和脂肪酸相关蛋白质复合体成分的质谱鉴定第47-61页
    4.1 实验材料与方法第47-50页
        4.1.1 实验材料第47-48页
        4.1.2 实验方法第48-50页
    4.2 实验结果与讨论第50-60页
        4.2.1 全细胞中蛋白质复合体分析第50-54页
        4.2.2 细胞质中蛋白质复合体分析第54-60页
    4.3 小结第60-61页
第五章 结论与展望第61-64页
    5.1 本文工作总结第61-62页
    5.2 工作展望第62-64页
参考文献第64-70页
发表论文和参加科研情况说明第70-71页
致谢第71页

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