摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
第一章 绪论 | 第7-17页 |
1.1 蛋白质复合体 | 第7-8页 |
1.1.1 蛋白质复合体概述 | 第7-8页 |
1.2 蛋白质复合体分析技术 | 第8-11页 |
1.2.1 蛋白质复合体的纯化分离 | 第8-10页 |
1.2.2 蛋白质复合体的鉴定 | 第10-11页 |
1.3 脂肪酸合成相关酶复合体研究进展 | 第11-12页 |
1.4 集胞藻 PCC 6803 的多不饱和脂肪酸合成 | 第12-15页 |
1.4.1 蓝藻概述 | 第12-13页 |
1.4.2 集胞藻 PCC 6803 简介 | 第13页 |
1.4.3 集胞藻 PCC 6803 的多不饱和脂肪酸合成关键酶 | 第13-15页 |
1.5 本文的主要内容 | 第15-17页 |
第二章 集胞藻 PCC 6803 多不饱和脂肪酸相关基因 C 端 3×FLAG 标签构建 | 第17-30页 |
2.1 实验材料与方法 | 第17-23页 |
2.1.1 实验材料 | 第17-20页 |
2.1.2 实验方法 | 第20-23页 |
2.2 实验结果与讨论 | 第23-29页 |
2.2.1 获取氯霉素抗性片段 | 第23-25页 |
2.2.2 获取上、下游同源臂片段 | 第25-26页 |
2.2.3 目的基因 C 端 3×FLAG 标签及氯霉素抗性基因的构建 | 第26-27页 |
2.2.4 重组片段转化集胞藻 PCC 6803 | 第27页 |
2.2.5 菌落 PCR 验证突变株 | 第27-29页 |
2.2.6 测序验证突变株 | 第29页 |
2.3 小结 | 第29-30页 |
第三章 集胞藻 PCC 6803 多不饱和脂肪酸相关蛋白质复合体的表达与纯化 | 第30-47页 |
3.1 实验材料与方法 | 第30-38页 |
3.1.1 实验材料 | 第30-32页 |
3.1.2 实验方法 | 第32-38页 |
3.2 实验结果与讨论 | 第38-46页 |
3.2.1 突变株培养时间的优化 | 第38-39页 |
3.2.2 初步验证突变株中 3×FLAG 标签的表达 | 第39-40页 |
3.2.3 蛋白质提取方法的优化 | 第40-42页 |
3.2.4 Western blot 检测亲和纯化效率 | 第42-44页 |
3.2.5 Native-PAGE 检测蛋白质复合体纯化效果 | 第44-46页 |
3.3 小结 | 第46-47页 |
第四章 集胞藻 PCC 6803 多不饱和脂肪酸相关蛋白质复合体成分的质谱鉴定 | 第47-61页 |
4.1 实验材料与方法 | 第47-50页 |
4.1.1 实验材料 | 第47-48页 |
4.1.2 实验方法 | 第48-50页 |
4.2 实验结果与讨论 | 第50-60页 |
4.2.1 全细胞中蛋白质复合体分析 | 第50-54页 |
4.2.2 细胞质中蛋白质复合体分析 | 第54-60页 |
4.3 小结 | 第60-61页 |
第五章 结论与展望 | 第61-64页 |
5.1 本文工作总结 | 第61-62页 |
5.2 工作展望 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |