超分辨成像光转换荧光蛋白探针的筛选及应用
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-31页 |
| 1.1 荧光蛋白的发展历程 | 第11-12页 |
| 1.2 荧光蛋白及在超分辨成像中的应用 | 第12-24页 |
| 1.2.1 荧光标记方法及荧光蛋白的结构 | 第12-14页 |
| 1.2.2 荧光蛋白的性质 | 第14-16页 |
| 1.2.3 荧光蛋白的分类和用途 | 第16-24页 |
| 1.3 超高分辨成像 | 第24-30页 |
| 1.3.1 衍射极限 | 第24页 |
| 1.3.2 超分辨成像的发展 | 第24-30页 |
| 1.4 本研究论文的内容和意义 | 第30-31页 |
| 1.4.1 常见红色荧光蛋白在膜蛋白标记中的应用 | 第30页 |
| 1.4.2 稳定光转换荧光蛋白的筛选 | 第30页 |
| 1.4.3 PALM 成像中荧光蛋白的筛选 | 第30-31页 |
| 第2章 常见红色荧光蛋白在膜蛋白标记中的应用 | 第31-41页 |
| 2.1 前言 | 第31页 |
| 2.2 实验部分 | 第31-34页 |
| 2.2.1 试剂与仪器 | 第31-32页 |
| 2.2.2 LB 培养基与 PBS 缓冲液的配置 | 第32页 |
| 2.2.3 质粒构建 | 第32-33页 |
| 2.2.4 蛋白表达与纯化 | 第33页 |
| 2.2.5 超速离心与沉降平衡 | 第33-34页 |
| 2.2.6 细胞培养 | 第34页 |
| 2.2.7 激光扫描共聚焦显微镜成像 | 第34页 |
| 2.2.8 全内反射荧光显微镜成像（TIRFM） | 第34页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第34-39页 |
| 2.3.1 超速离心实验结果 | 第34-36页 |
| 2.3.2 蛋白点状聚集体的位置 | 第36-37页 |
| 2.3.3 pH 对点状聚集体的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.4 荧光蛋白聚集体与溶酶体的共定位 | 第38-39页 |
| 2.4 小结 | 第39-41页 |
| 第3章 稳定光转换荧光蛋白的筛选 | 第41-50页 |
| 3.1 前言 | 第41-42页 |
| 3.2 实验部分 | 第42-45页 |
| 3.2.1 实验试剂与仪器 | 第42页 |
| 3.2.2 突变库的构建 | 第42-43页 |
| 3.2.3 突变库的筛选 | 第43页 |
| 3.2.4 真核细胞中质粒的构建 | 第43页 |
| 3.2.5 蛋白表达与纯化 | 第43-44页 |
| 3.2.6 光物理学和光化学性质的测定 | 第44页 |
| 3.2.7 成像玻片洗涤 | 第44页 |
| 3.2.8 细胞培养 | 第44-45页 |
| 3.2.9 激光扫描共聚焦显微镜成像 | 第45页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第45-49页 |
| 3.3.1 稳定突变体的产生 | 第45-46页 |
| 3.3.2 mEos3.2-SQ 的光物理学性质 | 第46-47页 |
| 3.3.3 激光扫描共聚焦显微镜实验结果 | 第47-49页 |
| 3.4 小结 | 第49-50页 |
| 第4章 PALM 成像中荧光蛋白的筛选 | 第50-59页 |
| 4.1 前言 | 第50-51页 |
| 4.2 实验部分 | 第51-53页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第51页 |
| 4.2.2 突变库的构建 | 第51-52页 |
| 4.2.3 突变体的筛选 | 第52页 |
| 4.2.4 蛋白表达与纯化 | 第52-53页 |
| 4.2.5 光物理学和光化学性质的测定 | 第53页 |
| 4.2.6 PALM 实验 | 第53页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第53-58页 |
| 4.3.1 筛选方法与结果 | 第53-54页 |
| 4.3.2 分子筛实验结果 | 第54-55页 |
| 4.3.3 荧光蛋白的光物理学性质 | 第55-57页 |
| 4.3.4 PALM 实验结果 | 第57-58页 |
| 4.4 小结 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 附录 A 攻读硕士期间所发表的学术论文 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
