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盐穗木盐胁迫相关基因的克隆与功能鉴定

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
英文缩略语第9-13页
第一部分 文献综述第13-33页
    第一章 水通道蛋白在植物抗逆中的作用第13-27页
        摘要第13页
        1 水通道蛋白的种类、定位及作用底物第13-15页
            1.1 水通道蛋白的种类多样性第13-14页
            1.2 亚细胞定位多样性第14-15页
            1.3 转运底物的多样性第15页
        2 AQPs 的结构特点与功能第15-17页
            2.1 AQPs 的结构特点第15-16页
            2.2 植物 AQPs 的功能第16-17页
        3 AQPs 的表达及转录后调控第17-18页
        4 水通道蛋白在植物抗逆中的作用第18-21页
            4.1 植物激素第18-19页
            4.2 Ca~(2+)和 pH第19页
            4.3 H2O2第19页
            4.4 水通道蛋白和植物非生物胁迫耐受性第19-21页
        参考文献第21-27页
    第二章 未知功能蛋白的研究进展第27-33页
        摘要第27-28页
        1 POFs 的定义方法第28页
        2 植物中的 POFs第28-29页
        3 POFs 与植物抗逆性第29-31页
        参考文献第31-33页
第二部分 实验部分第33-85页
    第一章 盐穗木水通道蛋白基因的克隆与功能鉴定第33-60页
        摘要第33-34页
        1 材料与方法第34-42页
            1.1 实验材料第34-35页
            1.2 实验方法第35-42页
                1.2.1 盐穗木总 RNA 的提取及反转录第35-36页
                1.2.2 盐穗木 Hc2a12 的全长序列的克隆第36-37页
                1.2.3 基因序列的生物信息学分析第37-38页
                1.2.4 qRT-PCR 分析基因的表达模式第38页
                1.2.5 HcPIP1 的亚细胞定位第38-40页
                1.2.6 HcPIP1 在酿酒酵母中的表达分析第40-41页
                1.2.7 过表达 HcPIP1 拟南芥的耐盐性鉴定第41-42页
        2 结果与分析第42-54页
            2.1 盐穗木水通道蛋白基因的克隆第42-44页
            2.2 生物信息学分析第44-46页
            2.3 qRT-PCR 分析盐穗木水通道蛋白的表达模式第46-47页
                2.3.1 HcPIP1 在不同组织中表达模式第46-47页
                2.3.2 盐处理不同时间下 HcPIP1 的表达模式第47页
            2.4 HcPIP1 的亚细胞定位观察第47-49页
            2.5 HcPIP1 在酿酒酵母中的表达第49-50页
                2.5.1 酵母表达载体的构建与转化第49页
                2.5.2 重组酵母的耐盐性分析第49-50页
            2.6 转基因拟南芥耐盐性分析第50-54页
                2.6.1 转基因拟南芥的分子鉴定第50-52页
                2.6.2 转基因拟南芥的表型鉴定第52-54页
        3 讨论第54-56页
        参考文献第56-60页
    第二章 盐穗木未知多肽基因功能的初步分析第60-72页
        摘要第60-61页
        1 材料与方法第61-63页
            1.1 实验材料第61页
            1.2 方法第61-63页
                1.2.1 盐穗木总 RNA 的提取与反转录第61页
                1.2.2 HcUKPP 的亚细胞定位第61-62页
                1.2.3 HcUKPP 在酿酒酵母中的表达分析第62-63页
        2 结果分析第63-67页
            2.1 pCAMBIA1301-HcUKPP-GFP 的构建及转化第63-64页
            2.2 遗传转化拟南芥及阳性植株的筛选第64页
            2.3 HcUKPP 的亚细胞定位观察第64-65页
            2.4 酵母表达载体构建与转化第65-66页
            2.5 重组酵母的耐盐性鉴定第66-67页
        3 讨论第67-70页
        参考文献第70-72页
    第三章 盐穗木过氧化氢酶基因的克隆与功能分析第72-85页
        摘要第72-73页
        1 材料与方法第73-76页
            1.1 实验材料第73页
            1.2 方法第73-76页
                1.2.1 盐穗木总 RNA 的提取和 cDNA 的合成第73-74页
                1.2.2 HcCAT1 的克隆与序列分析第74页
                1.2.3 半定量 RT-PCR 分析基因的表达模式第74页
                1.2.4 原核表达载体构建及蛋白诱导表达第74-75页
                1.2.5 蛋白诱导表达的条件优化第75页
                1.2.6 Western 印迹检测融合蛋白第75页
                1.2.7 融合蛋白的活性检测第75-76页
                1.2.8 重组菌的抗性分析第76页
        2 结果与分析第76-82页
            2.1 盐穗木过氧化氢酶基因的克隆与序列分析第76页
            2.2 盐胁迫下 HcCAT1 的表达分析第76-78页
            2.3 融合蛋白诱导表达及可溶性分析第78-79页
            2.4 融合蛋白表达的条件优化第79-80页
            2.5 融合蛋白的 Western 印迹及酶活活性检测第80页
            2.6 重组菌的抗性分析第80-82页
        3 讨论第82-83页
        参考文献第83-85页
第三部分 结论与展望第85-87页
    一、结论第85页
    二、存在的问题与展望第85-87页
致谢第87-88页
个人简历第88页

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