| 摘要 | 第4-12页 |
| Abstract | 第12-20页 |
| 英文缩略语 | 第21-26页 |
| 第一部分 IL6、IL6R在胶质瘤不同分子分型中的表达及预后意义 | 第26-44页 |
| 1 前言 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-29页 |
| 2.1.1 胶质瘤细胞系和患者来源胶质瘤干细胞提取及培养试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.2 免疫荧光相关试剂和材料 | 第28页 |
| 2.1.3 蛋白免疫印迹相关试剂和材料 | 第28-29页 |
| 2.1.4 RNA提取及荧光定量PCR试剂 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-34页 |
| 2.2.1 生物信息学检测胶质瘤中IL6、IL6R的表达、预后意义 | 第29页 |
| 2.2.2 胶质瘤细胞培养 | 第29页 |
| 2.2.3 患者来源胶质瘤干细胞提取及培养 | 第29-30页 |
| 2.2.4 患者来源胶质瘤干细胞的鉴定 | 第30-33页 |
| 2.2.5 患者来源胶质瘤干细胞中IL6、IL6R的表达 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-41页 |
| 3.1 在TCGA胶质母细胞瘤数据库中,间质型IL6、IL6R的表达最高 | 第34-35页 |
| 3.2 在TCGA胶质瘤数据库中,IDH野生型IL6、IL6R的表达高于突变型 | 第35-36页 |
| 3.3 在TCGA胶质瘤、胶质母细胞瘤、Rembrandt胶质瘤数据库中,IL6、IL6R的表达均具有预后意义 | 第36-37页 |
| 3.4 患者来源胶质瘤干细胞的鉴定和分型 | 第37-39页 |
| 3.4.1 胶质瘤干细胞的鉴定 | 第37-39页 |
| 3.4.2 胶质瘤干细胞的分型 | 第39页 |
| 3.5 IL6、IL6R在间质型患者来源胶质瘤干细胞中表达最高 | 第39-40页 |
| 3.6 胶质瘤细胞系中IL6R的表达 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 第二部分 IL6R对胶质瘤增殖、侵袭、凋亡的调控和介导IL6的促进胶质瘤作用 | 第44-65页 |
| 1 前言 | 第44-45页 |
| 2 材料与方法 | 第45-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第45-46页 |
| 2.1.1 胶质瘤细胞系及培养试剂 | 第45页 |
| 2.1.2 慢病毒及感染试剂 | 第45页 |
| 2.1.3 细胞功能学实验相关试剂和材料 | 第45-46页 |
| 2.1.4 免疫组化相关试剂和材料 | 第46页 |
| 2.1.5 蛋白免疫印迹、qPCR相关试剂和材料同第一部分 | 第46页 |
| 2.1.6 实验动物 | 第46页 |
| 2.2 实验方法 | 第46-50页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第46页 |
| 2.2.2 慢病毒感染 | 第46-47页 |
| 2.2.3 蛋白免疫印迹实验 | 第47页 |
| 2.2.4 qPCR实验 | 第47页 |
| 2.2.5 细胞活性检测 | 第47页 |
| 2.2.6 集落形成实验 | 第47页 |
| 2.2.7 细胞划痕实验 | 第47-48页 |
| 2.2.8 神经球形成实验 | 第48页 |
| 2.2.9 Transwell实验 | 第48页 |
| 2.2.10 Tunel凋亡检测 | 第48-49页 |
| 2.2.11 免疫组化 | 第49页 |
| 2.2.12 HE染色 | 第49页 |
| 2.2.13 裸鼠皮下成瘤实验 | 第49-50页 |
| 2.2.14 裸鼠颅内成瘤实验 | 第50页 |
| 3 结果 | 第50-62页 |
| 3.1 IL6R稳定过表达和沉默胶质瘤细胞的构建 | 第50-51页 |
| 3.2 IL6R对胶质瘤细胞增殖活性的调控 | 第51-54页 |
| 3.3 IL6R对胶质瘤细胞迁移和侵袭的调控 | 第54-55页 |
| 3.4 IL6R对胶质瘤凋亡的调控 | 第55-56页 |
| 3.5 IL6R对肿瘤发生的调控 | 第56-59页 |
| 3.6 IL6R介导IL6体外刺激对胶质瘤细胞增殖的调控 | 第59-61页 |
| 3.7 IL6R介导IL6体外刺激对胶质瘤细胞迁移和侵袭的调控 | 第61页 |
| 3.8 IL6R介导IL6体外刺激对胶质瘤细胞凋亡的调控 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 第三部分 NFAT1调控IL6、IL6R的表达 | 第65-77页 |
| 1 前言 | 第65-66页 |
| 2 材料与方法 | 第66-70页 |
| 2.1 实验材料 | 第66-67页 |
| 2.1.1 胶质瘤细胞培养、蛋白免疫印迹、免疫荧光及qPCR相关试剂和材料 | 第66页 |
| 2.1.2 慢病毒及感染试剂 | 第66页 |
| 2.1.3 酶联免疫吸附试验(Elisa) | 第66页 |
| 2.1.4 双荧光素酶报告基因检测 | 第66页 |
| 2.1.5 染色质免疫共沉淀实验 | 第66-67页 |
| 2.1.6 实验动物 | 第67页 |
| 2.2 实验方法 | 第67-70页 |
| 2.2.1 胶质瘤细胞培养、蛋白免疫印迹、免疫荧光、qPCR等方法均同论文第一部分 | 第67页 |
| 2.2.2 慢病毒感染同论文第二部分 | 第67页 |
| 2.2.3 酶联免疫吸附试验 | 第67-68页 |
| 2.2.4 双荧光素酶报告基因检测 | 第68页 |
| 2.2.5 染色质免疫共沉淀 | 第68-69页 |
| 2.2.6 裸鼠皮下成瘤 | 第69页 |
| 2.2.7 生物信息学分析 | 第69-70页 |
| 3 结果 | 第70-75页 |
| 3.1 TCGA胶质瘤数据库中IL6、IL6R与NFAT1表达的相关性 | 第70页 |
| 3.2 NFAT1调控胶质瘤细胞中IL6、IL6R的表达 | 第70-72页 |
| 3.3 NFAT1直接参与IL6、IL6R的转录调控 | 第72-74页 |
| 3.4 NFAT1调控肿瘤的发生 | 第74-75页 |
| 4 讨论 | 第75-76页 |
| 5 结论 | 第76-77页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 综述 | 第86-99页 |
| 参考文献 | 第92-99页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 个人简历 | 第101页 |
