| 摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 英文缩略语 | 第15-19页 |
| 第一部分 ARL2在胶质瘤中表达下调并抑制胶质瘤增殖和侵袭能力 | 第19-41页 |
| 1 前言 | 第19-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-31页 |
| 2.1 实验材料和仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.1 患者及标本 | 第20页 |
| 2.1.2 细胞系 | 第20页 |
| 2.1.3 ARL2过表达慢病毒载体 | 第20页 |
| 2.1.4 细胞培养及相关试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.5 RNA提取及real-timePCR试剂盒 | 第21页 |
| 2.1.6 蛋白提取试剂盒和Westernblot相关试剂 | 第21页 |
| 2.1.7 免疫组化相关试剂及仪器 | 第21页 |
| 2.1.8 实验动物 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-31页 |
| 2.2.1 肿瘤样本采集 | 第21-22页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第22页 |
| 2.2.3 Real-timePCR检测ARL2在人胶质瘤组织及细胞系中的表达 | 第22-23页 |
| 2.2.4 人胶质瘤组织及细胞系中总蛋白提取及定量 | 第23-24页 |
| 2.2.5 WesternBlot检测ARL2在人胶质瘤组织及细胞系中的表达 | 第24-26页 |
| 2.2.6 免疫组化检测ARL2在人胶质瘤组织中的表达 | 第26-28页 |
| 2.2.7 慢病毒感染及筛选 | 第28页 |
| 2.2.8 CCK-8检测过表达ARL2对U87和U251细胞增殖的影响 | 第28-29页 |
| 2.2.9 克隆形成实验检测过表达ARL2对U87和U251细胞克隆形成能力的影响 | 第29页 |
| 2.2.10 细胞周期检测 | 第29页 |
| 2.2.11 划痕实验检测过表达ARL2对U87和U251细胞迁移能力的影响 | 第29-30页 |
| 2.2.12 Transwell侵袭实验检测过表达ARL2对U87和U251细胞侵袭能力的影响 | 第30页 |
| 2.2.13 裸鼠皮下移植瘤模型 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-39页 |
| 3.1 ARL2在胶质瘤组织及细胞系U87和U251中表达下调 | 第31-33页 |
| 3.1.1 ARL2在胶质瘤组织中低表达 | 第31-33页 |
| 3.1.2 ARL2在胶质瘤细胞系U87和U251中低表达 | 第33页 |
| 3.2 ARL2表达与胶质瘤患者预后相关 | 第33-34页 |
| 3.3 建立ARL2稳定过表达的胶质瘤细胞系 | 第34-35页 |
| 3.4 ARL2过表达抑制胶质瘤细胞增殖能力 | 第35-36页 |
| 3.5 过表达ARL2抑制U251细胞周期进展 | 第36-37页 |
| 3.6 ARL2过表达抑制胶质瘤细胞迁移和侵袭能力 | 第37页 |
| 3.7 ARL2过表达抑制U87细胞体内成瘤能力 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 第二部分 ARL2通过下调AXL影响胶质瘤的增殖和侵袭能力 | 第41-58页 |
| 1 前言 | 第41页 |
| 2 材料和方法 | 第41-49页 |
| 2.1 实验材料和仪器 | 第41-43页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第42页 |
| 2.1.2 AXL过表达慢病毒载体 | 第42页 |
| 2.1.3 细胞培养及相关试剂 | 第42页 |
| 2.1.4 RNA提取及real-timePCR试剂盒 | 第42页 |
| 2.1.5 蛋白提取试剂盒和Westernblot相关试剂 | 第42-43页 |
| 2.1.6 免疫组化相关试剂及仪器 | 第43页 |
| 2.1.7 细胞免疫荧光相关试剂及仪器 | 第43页 |
| 2.2 实验方法 | 第43-49页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第43页 |
| 2.2.2 提取细胞总蛋白及定量 | 第43-44页 |
| 2.2.3 WesternBlot检测目的蛋白的表达 | 第44页 |
| 2.2.4 免疫组化检测ARL2和AXL在移植瘤中的表达 | 第44-45页 |
| 2.2.5 细胞免疫荧光 | 第45-46页 |
| 2.2.6 Real-timePCR检测过表达ARL2的U251细胞中AXLmRNA水平 | 第46-47页 |
| 2.2.7 慢病毒感染 | 第47页 |
| 2.2.8 CCK-8检测细胞增殖 | 第47-48页 |
| 2.2.9 克隆形成实验 | 第48页 |
| 2.2.10 划痕实验检测细胞迁移能力 | 第48-49页 |
| 2.2.11 Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力 | 第49页 |
| 3 结果 | 第49-56页 |
| 3.1 生物信息学分析ARL2的下游分子和信号通路 | 第49-52页 |
| 3.2 过表达ARL2后胶质瘤细胞中AXL和p-ERK表达下调 | 第52-53页 |
| 3.3 过表达AXL能逆转ARL2导致的U251增殖和侵袭能力下降的表型 | 第53-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 综述 | 第65-77页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 个人简历 | 第79页 |
