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通过噬菌体展示技术结合亚细胞定位方法筛选细菌表面保护性抗原

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 文献综述第11-21页
第二章 通过噬菌体随机肽库筛选细菌模拟抗原表位第21-33页
    2.1 材料和方法第21-24页
        2.1.1 材料第21页
        2.1.2 96 孔细胞培养板噬菌体扩增试验第21-22页
        2.1.3 滴度测定第22页
        2.1.4 红斑丹毒丝菌模拟抗原表位的噬菌体筛选第22页
        2.1.5 噬菌体扩增、纯化和滴度测定第22-23页
        2.1.6 A型猪巴氏杆菌模拟抗原表位的噬菌体筛选第23页
        2.1.7 大量噬菌体样品扩增试验第23页
        2.1.8 氧载体和表面活性剂试验第23页
        2.1.9 吐温-80浓度对噬菌体扩增滴度的影响第23页
        2.1.10 阳性噬菌体鉴定第23-24页
        2.1.11 噬菌体测序第24页
    2.2 结果与分析第24-28页
        2.2.1 噬菌体在96孔板中的扩增曲线第24-25页
        2.2.2 噬菌体筛选和测序分析第25-27页
        2.2.3 大量样品的小体积扩增条件优化第27页
        2.2.4 添加氧载体或表面活性剂试验第27-28页
    2.3 讨论第28-31页
    2.4 小结第31-33页
第三章 同源性分析结合亚细胞定位寻找模拟抗原表位所对应的表面蛋白第33-49页
    3.1 材料和方法第33-36页
        3.1.1 材料第33-34页
        3.1.2 模拟抗原表位的序列比对分析第34页
        3.1.3 模拟抗原表位在细菌全基因组中的相似性分析第34-35页
        3.1.4 亚细胞定位寻找目的表面蛋白第35页
        3.1.5 表面可及性分析辅助确定目的表面蛋白第35-36页
    3.2 结果与分析第36-44页
        3.2.1 序列比对分析第36-37页
        3.2.2 序列相似性分析和亚细胞定位第37-44页
    3.3 讨论第44-47页
    3.4 小结第47-49页
第四章 表面蛋白的原核表达及其免疫原性分析第49-65页
    4.1 材料和方法第49-56页
        4.1.1 材料第49页
        4.1.2 表面蛋白的基因原核克隆表达第49-54页
        4.1.3 重组蛋白的纯化第54-55页
        4.1.4 小鼠免疫和攻毒试验第55-56页
    4.2 结果与分析第56-61页
        4.2.1 重组蛋白的基因克隆表达第56-57页
        4.2.2 重组蛋白的表达和纯化第57-59页
        4.2.3 重组蛋白的小鼠免疫试验第59-61页
    4.3 讨论第61-64页
    4.4 小结第64-65页
第五章 红斑丹毒丝菌表面蛋白的验证以及功能预测第65-77页
    5.1 材料和方法第65-67页
        5.1.1 材料第65页
        5.1.2 重组蛋白免疫血清抗体检测第65-66页
        5.1.3 红斑丹毒丝菌重组蛋白免疫血清的全细胞ELISA检测第66页
        5.1.4 红斑丹毒丝菌重组蛋白的免疫印迹分析第66-67页
        5.1.5 红斑丹毒丝菌表面蛋白的功能预测第67页
    5.2 结果与分析第67-71页
        5.2.1 ELISA检测与免疫印迹分析第67-69页
        5.2.2 表面蛋白可能的功能性分析第69-71页
    5.3 讨论第71-74页
    5.4 小结第74-77页
结论第77-78页
创新点第78-79页
参考文献第79-93页
符号表第93-94页
蛋白名称缩写表第94-95页
致谢第95-97页
作者简介第97页

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