摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
第二章 通过噬菌体随机肽库筛选细菌模拟抗原表位 | 第21-33页 |
2.1 材料和方法 | 第21-24页 |
2.1.1 材料 | 第21页 |
2.1.2 96 孔细胞培养板噬菌体扩增试验 | 第21-22页 |
2.1.3 滴度测定 | 第22页 |
2.1.4 红斑丹毒丝菌模拟抗原表位的噬菌体筛选 | 第22页 |
2.1.5 噬菌体扩增、纯化和滴度测定 | 第22-23页 |
2.1.6 A型猪巴氏杆菌模拟抗原表位的噬菌体筛选 | 第23页 |
2.1.7 大量噬菌体样品扩增试验 | 第23页 |
2.1.8 氧载体和表面活性剂试验 | 第23页 |
2.1.9 吐温-80浓度对噬菌体扩增滴度的影响 | 第23页 |
2.1.10 阳性噬菌体鉴定 | 第23-24页 |
2.1.11 噬菌体测序 | 第24页 |
2.2 结果与分析 | 第24-28页 |
2.2.1 噬菌体在96孔板中的扩增曲线 | 第24-25页 |
2.2.2 噬菌体筛选和测序分析 | 第25-27页 |
2.2.3 大量样品的小体积扩增条件优化 | 第27页 |
2.2.4 添加氧载体或表面活性剂试验 | 第27-28页 |
2.3 讨论 | 第28-31页 |
2.4 小结 | 第31-33页 |
第三章 同源性分析结合亚细胞定位寻找模拟抗原表位所对应的表面蛋白 | 第33-49页 |
3.1 材料和方法 | 第33-36页 |
3.1.1 材料 | 第33-34页 |
3.1.2 模拟抗原表位的序列比对分析 | 第34页 |
3.1.3 模拟抗原表位在细菌全基因组中的相似性分析 | 第34-35页 |
3.1.4 亚细胞定位寻找目的表面蛋白 | 第35页 |
3.1.5 表面可及性分析辅助确定目的表面蛋白 | 第35-36页 |
3.2 结果与分析 | 第36-44页 |
3.2.1 序列比对分析 | 第36-37页 |
3.2.2 序列相似性分析和亚细胞定位 | 第37-44页 |
3.3 讨论 | 第44-47页 |
3.4 小结 | 第47-49页 |
第四章 表面蛋白的原核表达及其免疫原性分析 | 第49-65页 |
4.1 材料和方法 | 第49-56页 |
4.1.1 材料 | 第49页 |
4.1.2 表面蛋白的基因原核克隆表达 | 第49-54页 |
4.1.3 重组蛋白的纯化 | 第54-55页 |
4.1.4 小鼠免疫和攻毒试验 | 第55-56页 |
4.2 结果与分析 | 第56-61页 |
4.2.1 重组蛋白的基因克隆表达 | 第56-57页 |
4.2.2 重组蛋白的表达和纯化 | 第57-59页 |
4.2.3 重组蛋白的小鼠免疫试验 | 第59-61页 |
4.3 讨论 | 第61-64页 |
4.4 小结 | 第64-65页 |
第五章 红斑丹毒丝菌表面蛋白的验证以及功能预测 | 第65-77页 |
5.1 材料和方法 | 第65-67页 |
5.1.1 材料 | 第65页 |
5.1.2 重组蛋白免疫血清抗体检测 | 第65-66页 |
5.1.3 红斑丹毒丝菌重组蛋白免疫血清的全细胞ELISA检测 | 第66页 |
5.1.4 红斑丹毒丝菌重组蛋白的免疫印迹分析 | 第66-67页 |
5.1.5 红斑丹毒丝菌表面蛋白的功能预测 | 第67页 |
5.2 结果与分析 | 第67-71页 |
5.2.1 ELISA检测与免疫印迹分析 | 第67-69页 |
5.2.2 表面蛋白可能的功能性分析 | 第69-71页 |
5.3 讨论 | 第71-74页 |
5.4 小结 | 第74-77页 |
结论 | 第77-78页 |
创新点 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-93页 |
符号表 | 第93-94页 |
蛋白名称缩写表 | 第94-95页 |
致谢 | 第95-97页 |
作者简介 | 第97页 |