摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
第一章 文献综述 | 第10-24页 |
1.1 Tylosin、Carbomycin 及其在农业中的应用 | 第10-14页 |
1.1.1 Tylosin 简介及其现状 | 第10-11页 |
1.1.1.1 Tylosin 简介 | 第10-11页 |
1.1.1.2 Tylosin 的现状 | 第11页 |
1.1.2 Carbomycin 简介 | 第11-12页 |
1.1.3 Tylosin 在畜牧业中的应用 | 第12-13页 |
1.1.4 Tylosin 的杀菌原理及其局限性 | 第13-14页 |
1.1.5 研究Tylosin 衍生物的必要性和长期性 | 第14页 |
1.2 Tylosin 及其相关基团的生物合成 | 第14-20页 |
1.2.1 Tylosin 的生物合成及其基因簇 | 第14-16页 |
1.2.2 泰乐内酯的后修饰 | 第16-18页 |
1.2.2.1 泰乐菌素的糖基修饰 | 第17页 |
1.2.2.2 泰乐菌素的甲基化修饰 | 第17-18页 |
1.2.3 异戊酰的生物合成及其代谢 | 第18-20页 |
1.3 Tylosin 衍生物的研究现状 | 第20-23页 |
1.3.1 乙酰异戊酰泰乐菌素 | 第20-21页 |
1.3.2 替米考星(Tilmicosin) | 第21-22页 |
1.3.3 其它Tylosin 的衍生物 | 第22-23页 |
1.4 研究内容与目的 | 第23-24页 |
第二章 耐热链霉菌的发酵条件特性初探及诱变选育 | 第24-48页 |
2.1 实验材料 | 第24-27页 |
2.1.1 菌株 | 第24页 |
2.1.2 生化试剂 | 第24-25页 |
2.1.3 培养基 | 第25页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第25-26页 |
2.1.5 仪器设备 | 第26-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-34页 |
2.2.1 耐热链霉菌的耐受性实验 | 第27-28页 |
2.2.1.1 耐热链霉菌对Tylosin 的耐受性确定 | 第27-28页 |
2.2.1.2 耐热链霉菌对季铵盐的耐受性确定 | 第28页 |
2.2.1.3 耐热链霉菌对葡萄糖的耐受性确定 | 第28页 |
2.2.1.4 耐热链霉菌对红霉素的耐受性确定 | 第28页 |
2.2.2 耐热链霉菌发酵特性研究 | 第28-29页 |
2.2.2.1 耐热链霉菌的生长曲线 | 第29页 |
2.2.2.2 耐热链霉菌种子培养液的制作 | 第29页 |
2.2.2.3 耐热链霉菌发酵生产Carbomycin | 第29页 |
2.2.3 耐热链霉菌的紫外诱变和微波诱变 | 第29-32页 |
2.2.3.1 紫外诱变的原理 | 第29-30页 |
2.2.3.2 耐热链霉菌单孢子悬液的制备 | 第30页 |
2.2.3.3 紫外诱变的致死率曲线的制作 | 第30-31页 |
2.2.3.4 微波诱变原理 | 第31页 |
2.2.3.5 微波诱变的致死率曲线制作 | 第31页 |
2.2.3.6 诱变后耐热链霉菌的初筛 | 第31-32页 |
2.2.3.7 耐热链霉菌的复筛 | 第32页 |
2.2.4 耐热链霉菌抑菌效果的检测 | 第32-34页 |
2.2.4.1 检测平板制备 | 第32-33页 |
2.2.4.2 打孔法测发酵液抑菌效果 | 第33页 |
2.2.4.3 琼脂块法测菌株抑菌效果 | 第33页 |
2.2.4.4 泰乐菌素效价曲线的制作 | 第33-34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-48页 |
2.3.1 耐热链霉菌的耐受性实验 | 第34-37页 |
2.3.1.1 原始耐热链霉菌ATCC11416 对Tylosin 的耐受性分析 | 第34页 |
2.3.1.2 原始耐热链霉菌ATCC11416 对季铵盐的耐受性分析 | 第34-35页 |
2.3.1.3 原始耐热链霉菌ATCC11416 对葡萄糖高渗的耐受性分析 | 第35页 |
2.3.1.4 原始耐热链霉菌ATCC11416 对红霉素的耐受性分析 | 第35页 |
2.3.1.5 不同筛选标记筛出的菌落形态比较 | 第35-36页 |
2.3.1.6 通过不同筛选标记筛出菌落的抑菌效果比较 | 第36-37页 |
2.3.2 原始耐热链霉菌ATCC11416 的发酵曲线 | 第37-39页 |
2.3.2.1 耐热链霉菌发酵培养的pH 值曲线 | 第37-38页 |
2.3.2.2 耐热链霉菌发酵培养的菌体干重曲线 | 第38页 |
2.3.2.3 耐热链霉菌发酵培养液的抑菌活性曲线 | 第38-39页 |
2.3.3 耐热链霉菌ATCC11416 的诱变育种 | 第39-46页 |
2.3.3.1 耐热链霉菌的第一次紫外诱变 | 第39-42页 |
2.3.3.1.1 耐热链霉菌的紫外致死率曲线 | 第39-40页 |
2.3.3.1.2 Tylosin 效价标准曲线 | 第40页 |
2.3.3.1.3 第一次紫外诱变菌株的初筛 | 第40-41页 |
2.3.3.1.4 第一次紫外诱变菌株的复筛和效价测定 | 第41-42页 |
2.3.3.1.5 第一次紫外诱变菌株的耐受性分析 | 第42页 |
2.3.3.2 对耐热链霉菌的第二次紫外诱变 | 第42-44页 |
2.3.3.2.1 第二次紫外诱变的菌株初筛 | 第43页 |
2.3.3.2.2 第二次紫外诱变菌株的复筛和效价测定 | 第43-44页 |
2.3.3.2.3 第二次紫外诱变筛选菌株的耐受性分析 | 第44页 |
2.3.3.3 耐热链霉菌的微波诱变 | 第44-46页 |
2.3.3.3.1 微波诱变的致死率曲线 | 第45页 |
2.3.3.3.2 微波诱变的筛选 | 第45-46页 |
2.3.4 本章小结 | 第46-48页 |
第三章 耐热链霉菌发酵条件的优化及其转化率的测定 | 第48-63页 |
3.1 实验材料 | 第48-50页 |
3.1.1 菌株 | 第48页 |
3.1.2 生化试剂 | 第48页 |
3.1.3 培养基 | 第48-49页 |
3.1.4 主要试剂的配制 | 第49页 |
3.1.5 仪器设备 | 第49-50页 |
3.2 实验方法 | 第50-52页 |
3.2.1 发酵条件的优化 | 第50-51页 |
3.2.1.1 耐热链霉菌产Carbomycin 的最优碳源选择 | 第50页 |
3.2.1.2 耐热链霉菌产Carbomycin 的最优氮源选择 | 第50页 |
3.2.1.3 最优碳源浓度的选择 | 第50-51页 |
3.2.1.4 最优氮源浓度的选择 | 第51页 |
3.2.1.5 CaC0_3 对发酵产Carbomycin 的影响 | 第51页 |
3.2.1.6 Leu 对发酵过程中Carbomycin 产量的影响 | 第51页 |
3.2.1.7 发酵培养基成分配比的响应面分析 | 第51页 |
3.2.2 Tylosin 转化率的测定分析 | 第51-52页 |
3.2.2.1 Tylosin 在发酵液中的添加 | 第51-52页 |
3.2.2.2 发酵液的预处理 | 第52页 |
3.2.2.3 发酵液中Tylosin 及其衍生物的萃取 | 第52页 |
3.2.2.4 萃取液的HPLC-MS 检测 | 第52页 |
3.3 结果与分析 | 第52-61页 |
3.3.1 发酵条件的优化 | 第52-58页 |
3.3.1.1 葡萄糖作为碳源对发酵产Carbomycin 的影响 | 第53页 |
3.3.1.2 不同氮源对发酵产Carbomycin 的影响 | 第53-55页 |
3.3.1.3 蛋白胨最适浓度的选择 | 第55页 |
3.3.1.4 淀粉最适浓度的选择 | 第55-56页 |
3.3.1.5 CaC0_3 对发酵生产Carbomycin 的影响 | 第56页 |
3.3.1.6 Leu 对发酵生产Carbomycin 的影响 | 第56-57页 |
3.3.1.7 发酵培养基的响应面分析 | 第57-58页 |
3.3.2 耐热链霉菌对Tylosin 转化率测定 | 第58-61页 |
3.3.2.1 乙酰异戊酰Tylosin 的HPLC-MS 的确定 | 第58-59页 |
3.3.2.2 Tylosin 转化率的测定 | 第59-61页 |
3.4 本章小结 | 第61-63页 |
第四章 结论与展望 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-70页 |
致谢 | 第70页 |