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碳霉素生产菌株的选育及发酵条件的研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
第一章 文献综述第10-24页
    1.1 Tylosin、Carbomycin 及其在农业中的应用第10-14页
        1.1.1 Tylosin 简介及其现状第10-11页
            1.1.1.1 Tylosin 简介第10-11页
            1.1.1.2 Tylosin 的现状第11页
        1.1.2 Carbomycin 简介第11-12页
        1.1.3 Tylosin 在畜牧业中的应用第12-13页
        1.1.4 Tylosin 的杀菌原理及其局限性第13-14页
        1.1.5 研究Tylosin 衍生物的必要性和长期性第14页
    1.2 Tylosin 及其相关基团的生物合成第14-20页
        1.2.1 Tylosin 的生物合成及其基因簇第14-16页
        1.2.2 泰乐内酯的后修饰第16-18页
            1.2.2.1 泰乐菌素的糖基修饰第17页
            1.2.2.2 泰乐菌素的甲基化修饰第17-18页
        1.2.3 异戊酰的生物合成及其代谢第18-20页
    1.3 Tylosin 衍生物的研究现状第20-23页
        1.3.1 乙酰异戊酰泰乐菌素第20-21页
        1.3.2 替米考星(Tilmicosin)第21-22页
        1.3.3 其它Tylosin 的衍生物第22-23页
    1.4 研究内容与目的第23-24页
第二章 耐热链霉菌的发酵条件特性初探及诱变选育第24-48页
    2.1 实验材料第24-27页
        2.1.1 菌株第24页
        2.1.2 生化试剂第24-25页
        2.1.3 培养基第25页
        2.1.4 主要试剂的配制第25-26页
        2.1.5 仪器设备第26-27页
    2.2 实验方法第27-34页
        2.2.1 耐热链霉菌的耐受性实验第27-28页
            2.2.1.1 耐热链霉菌对Tylosin 的耐受性确定第27-28页
            2.2.1.2 耐热链霉菌对季铵盐的耐受性确定第28页
            2.2.1.3 耐热链霉菌对葡萄糖的耐受性确定第28页
            2.2.1.4 耐热链霉菌对红霉素的耐受性确定第28页
        2.2.2 耐热链霉菌发酵特性研究第28-29页
            2.2.2.1 耐热链霉菌的生长曲线第29页
            2.2.2.2 耐热链霉菌种子培养液的制作第29页
            2.2.2.3 耐热链霉菌发酵生产Carbomycin第29页
        2.2.3 耐热链霉菌的紫外诱变和微波诱变第29-32页
            2.2.3.1 紫外诱变的原理第29-30页
            2.2.3.2 耐热链霉菌单孢子悬液的制备第30页
            2.2.3.3 紫外诱变的致死率曲线的制作第30-31页
            2.2.3.4 微波诱变原理第31页
            2.2.3.5 微波诱变的致死率曲线制作第31页
            2.2.3.6 诱变后耐热链霉菌的初筛第31-32页
            2.2.3.7 耐热链霉菌的复筛第32页
        2.2.4 耐热链霉菌抑菌效果的检测第32-34页
            2.2.4.1 检测平板制备第32-33页
            2.2.4.2 打孔法测发酵液抑菌效果第33页
            2.2.4.3 琼脂块法测菌株抑菌效果第33页
            2.2.4.4 泰乐菌素效价曲线的制作第33-34页
    2.3 结果与分析第34-48页
        2.3.1 耐热链霉菌的耐受性实验第34-37页
            2.3.1.1 原始耐热链霉菌ATCC11416 对Tylosin 的耐受性分析第34页
            2.3.1.2 原始耐热链霉菌ATCC11416 对季铵盐的耐受性分析第34-35页
            2.3.1.3 原始耐热链霉菌ATCC11416 对葡萄糖高渗的耐受性分析第35页
            2.3.1.4 原始耐热链霉菌ATCC11416 对红霉素的耐受性分析第35页
            2.3.1.5 不同筛选标记筛出的菌落形态比较第35-36页
            2.3.1.6 通过不同筛选标记筛出菌落的抑菌效果比较第36-37页
        2.3.2 原始耐热链霉菌ATCC11416 的发酵曲线第37-39页
            2.3.2.1 耐热链霉菌发酵培养的pH 值曲线第37-38页
            2.3.2.2 耐热链霉菌发酵培养的菌体干重曲线第38页
            2.3.2.3 耐热链霉菌发酵培养液的抑菌活性曲线第38-39页
        2.3.3 耐热链霉菌ATCC11416 的诱变育种第39-46页
            2.3.3.1 耐热链霉菌的第一次紫外诱变第39-42页
                2.3.3.1.1 耐热链霉菌的紫外致死率曲线第39-40页
                2.3.3.1.2 Tylosin 效价标准曲线第40页
                2.3.3.1.3 第一次紫外诱变菌株的初筛第40-41页
                2.3.3.1.4 第一次紫外诱变菌株的复筛和效价测定第41-42页
                2.3.3.1.5 第一次紫外诱变菌株的耐受性分析第42页
            2.3.3.2 对耐热链霉菌的第二次紫外诱变第42-44页
                2.3.3.2.1 第二次紫外诱变的菌株初筛第43页
                2.3.3.2.2 第二次紫外诱变菌株的复筛和效价测定第43-44页
                2.3.3.2.3 第二次紫外诱变筛选菌株的耐受性分析第44页
            2.3.3.3 耐热链霉菌的微波诱变第44-46页
                2.3.3.3.1 微波诱变的致死率曲线第45页
                2.3.3.3.2 微波诱变的筛选第45-46页
        2.3.4 本章小结第46-48页
第三章 耐热链霉菌发酵条件的优化及其转化率的测定第48-63页
    3.1 实验材料第48-50页
        3.1.1 菌株第48页
        3.1.2 生化试剂第48页
        3.1.3 培养基第48-49页
        3.1.4 主要试剂的配制第49页
        3.1.5 仪器设备第49-50页
    3.2 实验方法第50-52页
        3.2.1 发酵条件的优化第50-51页
            3.2.1.1 耐热链霉菌产Carbomycin 的最优碳源选择第50页
            3.2.1.2 耐热链霉菌产Carbomycin 的最优氮源选择第50页
            3.2.1.3 最优碳源浓度的选择第50-51页
            3.2.1.4 最优氮源浓度的选择第51页
            3.2.1.5 CaC0_3 对发酵产Carbomycin 的影响第51页
            3.2.1.6 Leu 对发酵过程中Carbomycin 产量的影响第51页
            3.2.1.7 发酵培养基成分配比的响应面分析第51页
        3.2.2 Tylosin 转化率的测定分析第51-52页
            3.2.2.1 Tylosin 在发酵液中的添加第51-52页
            3.2.2.2 发酵液的预处理第52页
            3.2.2.3 发酵液中Tylosin 及其衍生物的萃取第52页
            3.2.2.4 萃取液的HPLC-MS 检测第52页
    3.3 结果与分析第52-61页
        3.3.1 发酵条件的优化第52-58页
            3.3.1.1 葡萄糖作为碳源对发酵产Carbomycin 的影响第53页
            3.3.1.2 不同氮源对发酵产Carbomycin 的影响第53-55页
            3.3.1.3 蛋白胨最适浓度的选择第55页
            3.3.1.4 淀粉最适浓度的选择第55-56页
            3.3.1.5 CaC0_3 对发酵生产Carbomycin 的影响第56页
            3.3.1.6 Leu 对发酵生产Carbomycin 的影响第56-57页
            3.3.1.7 发酵培养基的响应面分析第57-58页
        3.3.2 耐热链霉菌对Tylosin 转化率测定第58-61页
            3.3.2.1 乙酰异戊酰Tylosin 的HPLC-MS 的确定第58-59页
            3.3.2.2 Tylosin 转化率的测定第59-61页
    3.4 本章小结第61-63页
第四章 结论与展望第63-65页
参考文献第65-70页
致谢第70页

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