| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一篇 文献综述 | 第13-21页 |
| 1 盐对植物的伤害及植物耐盐机理 | 第13-14页 |
| 1.1 盐对植物的伤害 | 第13页 |
| 1.2 植物耐盐机理 | 第13-14页 |
| 2 小麦的遗传转化 | 第14-15页 |
| 2.1 基因工程与小麦遗传改良概述 | 第14-15页 |
| 2.2 农杆菌介导小麦遗传转化的概述 | 第15页 |
| 3 转基因植物的安全性 | 第15-18页 |
| 3.1 转基因植物的安全因素及应对策略的概述 | 第15-16页 |
| 3.2 去除选择标记基因策略概述 | 第16-18页 |
| 4 小麦耐盐基因TASTRG功能研究 | 第18页 |
| 5 小麦耐盐基因NA~+/H~+逆向转运蛋白基因功能研究 | 第18-19页 |
| 6 本研究的目的意义 | 第19-20页 |
| 7 本研究的技术路线 | 第20-21页 |
| 第二篇 研究论文 | 第21-51页 |
| 第一章 安全选择标记载体的构建与优化 | 第21-36页 |
| 1 实验材料 | 第21页 |
| 1.1 菌种、质粒 | 第21页 |
| 1.2 主要化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-31页 |
| 2.1 pBZ1024-TaSTRG载体的构建 | 第21-27页 |
| 2.2 pBZ1024-Na~+/H~+逆向转运蛋白基因载体的构建 | 第27-31页 |
| 3 结果分析 | 第31-34页 |
| 3.1 TaSTRG基因的PCR扩增 | 第31-32页 |
| 3.2 pBZ1024-TaSTRG载体的构建 | 第32页 |
| 3.3 pBZ1024-TaSTRG表达载体的农杆菌转化与鉴定 | 第32-33页 |
| 3.4 Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的PCR扩增 | 第33页 |
| 3.5 pBZ1024-Na~+/H~+逆向转运蛋白载体的构建 | 第33-34页 |
| 3.6 pBZ1024-Na~+/H~+表达载体的农杆菌转化与鉴定 | 第34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 第二章 农杆菌介导的小麦成熟胚遗传转化体系的建立 | 第36-42页 |
| 1 实验材料 | 第36页 |
| 1.1 植物材料 | 第36页 |
| 1.2 质粒与菌株 | 第36页 |
| 1.3 主要试剂与仪器 | 第36页 |
| 2 试验方法 | 第36-39页 |
| 2.1 培养基 | 第36-37页 |
| 2.2 小麦师栾02-1成熟胚愈伤组织的遗传转化过程 | 第37-38页 |
| 2.3 农杆菌介导的小麦师栾02-1的遗传转化体系的确立 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-40页 |
| 3.1 小麦师栾02-1成熟胚愈伤组织的诱导 | 第39页 |
| 3.2 农杆菌转化时侵染浓度及时间的确立 | 第39-40页 |
| 3.3 分化培养基激素及谷氨酰胺的选择 | 第40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 4.1 小麦成熟胚的诱导体系的建立 | 第40页 |
| 4.2 农杆菌介导的转化体系的建立 | 第40-41页 |
| 4.3 愈伤组织分化培养的优化 | 第41-42页 |
| 第三章 安全选择标记筛选体系建立 | 第42-51页 |
| 1 实验材料 | 第42页 |
| 2 实验过程 | 第42-44页 |
| 2.1 农杆菌介导的愈伤组织转化后进行无盐及有盐筛选 | 第42页 |
| 2.2 转化安全标记基因的愈伤组织盐筛选浓度的体系的建立 | 第42页 |
| 2.3 转基因植株的PCR鉴定 | 第42-44页 |
| 3 实验结果 | 第44-48页 |
| 3.1 转化安全标记基因的愈伤组织盐筛选浓度的体系的建立 | 第44-45页 |
| 3.2 农杆菌介导的愈伤组织转化后进行无盐及有盐筛选 | 第45-46页 |
| 3.3 安全选择标记的表达载体转化结果统计 | 第46-47页 |
| 3.4 转基因植株的PCR鉴定 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 4.1 盐筛选的时间及筛选压的探讨 | 第48-49页 |
| 4.2 构建的pBZ1024-TaSTRG和pBZ1024-Na~+/H~+逆向转运蛋白基因表达载体的应用 | 第49页 |
| 4.3 转基因植株的鉴定及安全标记载体的应用 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 附录 | 第56-60页 |
| 缩略词 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
