| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-22页 |
| 1.1 分蘖的控制 | 第15-18页 |
| 1.2 穗分枝的控制 | 第18-19页 |
| 1.3 分蘖和穗分枝的协同调节 | 第19-20页 |
| 1.4 结论 | 第20-22页 |
| 2 研究内容 | 第22-87页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-30页 |
| 2.1.1 水稻品种、菌株、载体及引物 | 第22-24页 |
| 2.1.2 工具酶 | 第24-25页 |
| 2.1.3 其他试剂及试剂盒 | 第25页 |
| 2.1.4 试剂配制 | 第25-29页 |
| 2.1.4.1 培养基 | 第25-26页 |
| 2.1.4.2 抗生素贮存液 | 第26-27页 |
| 2.1.4.3 化学贮存液 | 第27页 |
| 2.1.4.4 质粒提取试剂 | 第27页 |
| 2.1.4.5 植物基因组DNA提取试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.4.6 电泳缓冲液及试剂 | 第28页 |
| 2.1.4.7 Western Blot缓冲液 | 第28页 |
| 2.1.4.8 GUS染色试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.4.9 MBP融合蛋白纯化 | 第29页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-51页 |
| 2.2.1 构建植物表达载体的步骤 | 第30-37页 |
| 2.2.1.1 植物总RNA的提取 | 第30页 |
| 2.2.1.2 植物基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.1.3 目的基因的扩增 | 第31-33页 |
| 2.2.1.4 目的基因的回收 | 第33页 |
| 2.2.1.5 目的基因之间的连接 | 第33-34页 |
| 2.2.1.6 连接产物与克隆载体的连接 | 第34页 |
| 2.2.1.7 目的片段和表达载体的连接 | 第34页 |
| 2.2.1.8 转化大肠杆菌感受态细胞并提质粒 | 第34-35页 |
| 2.2.1.9 酶切鉴定重组质粒 | 第35页 |
| 2.2.1.10 测序 | 第35页 |
| 2.2.1.11 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第35-36页 |
| 2.2.1.12 农杆菌质粒的提取 | 第36-37页 |
| 2.2.2 Co-IP植物表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 2.2.3 TAPa植物表达载体的构建 | 第38-39页 |
| 2.2.4 水稻的遗传转化 | 第39页 |
| 2.2.5 转基因水稻的鉴定 | 第39页 |
| 2.2.6 GUS染色 | 第39-40页 |
| 2.2.7 酵母双杂交 | 第40-47页 |
| 2.2.7.1 构建诱饵融合蛋白表达载体 | 第40页 |
| 2.2.7.2 酵母感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| 2.2.7.3 转化酵母感受态细胞 | 第41页 |
| 2.2.7.4 提取酵母质粒 | 第41-42页 |
| 2.2.7.5 诱饵酵母菌株的检测 | 第42-46页 |
| 2.2.7.6 诱饵菌株筛选水稻分蘖芽cDNA文库 | 第46-47页 |
| 2.2.7.7 获得重要的阳性克隆 | 第47页 |
| 2.2.8 验证酵母双杂交筛选出的重要阳性克隆 | 第47-48页 |
| 2.2.8.1 重要阳性克隆质粒转入AH109感受态细胞 | 第47-48页 |
| 2.2.8.2 小规模酵母双杂交 | 第48页 |
| 2.2.8.3 QDO/X-α-Gal+GR24验证 | 第48页 |
| 2.2.9 MBP-D3融合蛋白的原核表达及纯化 | 第48-51页 |
| 2.2.9.1 MBP-D3融合蛋白表达载体的构建 | 第48页 |
| 2.2.9.2 MBP-D3融合蛋白的原核表达 | 第48-49页 |
| 2.2.9.3 MBP-D3融合蛋白的透析及定量 | 第49-50页 |
| 2.2.9.4 MBP-D3融合蛋白与beads结合 | 第50-51页 |
| 2.3 结果及分析 | 第51-84页 |
| 2.3.1 植物总RNA和DNA的提取 | 第51页 |
| 2.3.2 Co-IP植物表达载体的构建 | 第51-53页 |
| 2.3.2.1 目的基因的扩增和测序 | 第51页 |
| 2.3.2.2 目的片段和表达载体的酶切回收 | 第51-52页 |
| 2.3.2.3 目的片段连入表达载体的酶切鉴定 | 第52-53页 |
| 2.3.2.4 载体转化农杆菌 | 第53页 |
| 2.3.3 TAPa植物表达载体的构建 | 第53-59页 |
| 2.3.3.1 目的基因的扩增和测序 | 第53-55页 |
| 2.3.3.2 目的片段和表达载体的酶切回收 | 第55页 |
| 2.3.3.3 目的片段连入表达载体的酶切鉴定 | 第55-56页 |
| 2.3.3.4 载体转化农杆菌 | 第56-59页 |
| 2.3.4 水稻的遗传转化 | 第59-60页 |
| 2.3.5 转基因水稻的鉴定 | 第60-63页 |
| 2.3.6 GUS染色 | 第63-66页 |
| 2.3.7 酵母双杂交 | 第66-77页 |
| 2.3.7.1 构建诱饵融合蛋白表达载体 | 第68-71页 |
| 2.3.7.2 诱饵菌株的检测 | 第71-73页 |
| 2.3.7.3 诱饵菌株筛选水稻分蘖芽cDNA文库 | 第73-77页 |
| 2.3.8 酵母回交验证重要阳性克隆 | 第77-80页 |
| 2.3.9 MBP-D3融合蛋白的原核表达及纯化 | 第80-84页 |
| 2.3.9.1 MBP-D3融合蛋白表达载体的构建 | 第80-81页 |
| 2.3.9.2 MBP-D3融合蛋白的原核表达及纯化 | 第81-84页 |
| 2.4 讨论 | 第84-87页 |
| 结论 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-95页 |
| 附录 | 第95-97页 |
| 后记 | 第97-99页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果清单 | 第99页 |
