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噬菌体抗体库构建及西维因单链抗体的筛选

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
1 前言第10-17页
   ·西维因残留检测研究进展第10-11页
     ·西维因简介第10页
     ·西维因残留检测方法的研究进展第10-11页
   ·基因工程抗体第11-12页
     ·抗体简介第11页
     ·基因工程简介第11-12页
     ·基因工程抗体的种类第12页
     ·基因工程抗体的表达系统第12页
   ·噬菌体抗体库技术及其应用的研究进展第12-16页
     ·噬菌体抗体库技术的优点第12-13页
     ·噬菌体抗体的分类第13-14页
     ·目标抗体的筛选与表达第14-15页
     ·噬菌体抗体库技术应用的研究进展第15-16页
   ·本研究的目的和意义第16页
   ·研究内容第16-17页
2 材料与方法第17-39页
   ·实验材料第17-24页
     ·实验动物第17页
     ·实验所用的本实验室保存的实验材料第17页
     ·实验所用的工具酶、抗生素和载体第17页
     ·实验所需试剂及试剂盒第17-21页
     ·主要溶液和培养基的配置方法第21-23页
     ·主要实验仪器第23-24页
   ·实验方法第24-39页
     ·鼠源天然噬菌体抗体库的构建第24-32页
     ·非免疫库中西维因特异性重组单链抗体的淘选第32-34页
     ·鼠源西维因免疫噬菌体抗体库的构建第34-35页
     ·西维因免疫噬菌体抗体库中特异性重组单链抗体的筛选第35页
     ·特异性重组单链抗体抗体的表达与活性的鉴定第35-39页
3 实验结果与分析第39-53页
   ·鼠源天然噬菌体抗体库的构建及西维因重组单链抗体的筛选第39-44页
     ·非免疫小鼠脾脏总RNA的提取结果第39页
     ·非免疫小鼠mRNA的纯化第39页
     ·非免疫小鼠抗体VL和VH的PCR扩增第39页
     ·非免疫小鼠scFv的扩增第39-41页
     ·非免疫小鼠scFv的双酶切第41页
     ·非免疫鼠源噬菌体单链抗体库的构建第41-42页
     ·抗体库质量的检测第42页
     ·西维因特异性重组抗体的淘选第42-44页
   ·鼠源西维因免疫噬菌体抗体库的构建及重组单链抗体的筛选第44-48页
     ·西维因5H-KLH免疫小鼠第44页
     ·西维因免疫小鼠脾脏总RNA的提取及mRNA的纯化第44页
     ·西维因免疫小鼠抗体VL和VH的PCR扩增第44-46页
     ·西维因免疫小鼠scFv的扩增第46页
     ·西维因免疫小鼠噬菌体单链抗体库的构建第46页
     ·西维因特异性重组抗体的淘选第46-48页
   ·西维因单链抗体的重组表达与活性鉴定第48-53页
     ·淘选的西维因特异性克隆的测序第48页
     ·西维因特异性单链抗体的表达第48-49页
     ·西维因可溶性特异性单链抗体的表达与鉴定第49-51页
     ·纯化的西维因可溶性特异性单链抗体浓度的测定第51-52页
     ·单链抗体活性的初步测定第52-53页
4 讨论第53-55页
5 结论第55-56页
6 展望第56-57页
7 参考文献第57-63页
8 攻读硕士学位期间发表论文情况第63-64页
9 致谢第64页

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