| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第16-31页 |
| 1.1 课题背景及研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 1.2 国内外在木霉菌生物防治方面的研究现状 | 第17-29页 |
| 1.2.1 植物病害生物防治的发展概况 | 第17-19页 |
| 1.2.2 木霉菌的生物防治机制 | 第19-20页 |
| 1.2.3 木霉菌重寄生过程分子机制研究进展 | 第20-23页 |
| 1.2.4 木霉菌抗生作用的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.2.5 棘孢木霉（T.asperellum）生物防治研究进展 | 第24-25页 |
| 1.2.6 丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）途径概述 | 第25-27页 |
| 1.2.7 丝状真菌转化方法研究进展 | 第27-29页 |
| 1.3 生物防治菌棘孢木霉应用中存在的问题 | 第29-30页 |
| 1.4 本课题的来源及主要研究内容 | 第30-31页 |
| 1.4.1 课题来源 | 第30页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第30-31页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第31-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-35页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第31-32页 |
| 2.1.2 培养基 | 第32-33页 |
| 2.1.3 酶和试剂 | 第33-34页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第34-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-52页 |
| 2.2.1 棘孢木霉task1基因和taskkk基因的克隆及序列分析 | 第35-37页 |
| 2.2.2 棘孢木霉task1基因和taskkk基因侧翼序列的克隆 | 第37-38页 |
| 2.2.3 棘孢木霉task1基因和taskkk基因敲除双元载体的构建 | 第38-43页 |
| 2.2.4 根癌农杆菌介导的棘孢木霉task1基因和taskkk基因的敲除 | 第43-45页 |
| 2.2.5 突变体Δtask1和Δtaskkk的潮霉素抗性水平和遗传稳定性检测 | 第45页 |
| 2.2.6 突变体Δtask1和Δtaskkk菌体形态和生长变化 | 第45-46页 |
| 2.2.7 棘孢木霉task1基因和taskkk基因生物防治相关功能研究 | 第46-52页 |
| 第3章 根癌农杆菌介导的棘孢木霉task1和taskkk基因的敲除 | 第52-71页 |
| 3.1 引言 | 第52页 |
| 3.2 棘孢木霉task1基因的克隆及序列分析 | 第52-54页 |
| 3.2.1 棘孢木霉task1基因的克隆 | 第52-53页 |
| 3.2.2 棘孢木霉task1基因序列的同源性比较 | 第53-54页 |
| 3.2.3 棘孢木霉task1基因氨基酸序列的结构分析 | 第54页 |
| 3.3 棘孢木霉taskkk基因的克隆及序列分析 | 第54-55页 |
| 3.3.1 棘孢木霉taskkk基因的克隆 | 第54-55页 |
| 3.3.2 序列的同源性比较 | 第55页 |
| 3.3.3 氨基酸序列的结构分析 | 第55页 |
| 3.4 棘孢木霉task1和taskkk基因侧翼序列的克隆 | 第55-57页 |
| 3.4.1 棘孢木霉task1基因侧翼序列的克隆 | 第55-56页 |
| 3.4.2 棘孢木霉taskkk基因侧翼序列的克隆 | 第56-57页 |
| 3.5 棘孢木霉task1基因敲除双元载体的构建 | 第57-61页 |
| 3.5.1 中间载体ppzp-ut1的构建 | 第57-58页 |
| 3.5.2 中间载体ppzp-ut1-hph的构建 | 第58-59页 |
| 3.5.3 Task1基因敲除双元载体ppzp-ut1-hph-dt1的构建 | 第59-61页 |
| 3.6 棘孢木霉taskkk基因敲除双元载体的构建 | 第61-64页 |
| 3.6.1 中间载体ppzp-utkk的构建 | 第61-62页 |
| 3.6.2 中间载体ppzp-utkk-hph的构建 | 第62-63页 |
| 3.6.3 Taskkk基因敲除双元载体ppzp-utkk-hph-dtkk的构建 | 第63-64页 |
| 3.7 根癌农杆菌介导的棘孢木霉task1和taskkk基因的敲除 | 第64-68页 |
| 3.7.1 棘孢木霉对潮霉素敏感性测定 | 第64页 |
| 3.7.2 棘孢木霉task1基因敲除突变体Δtask1的鉴定 | 第64-66页 |
| 3.7.3 棘孢木霉taskkk基因敲除突变体Δtaskkk的鉴定 | 第66-68页 |
| 3.8 突变体Δtask1的潮霉素抗性水平和遗传稳定性的检测 | 第68-69页 |
| 3.8.1 突变体Δtask1的潮霉素抗性水平的检测 | 第68页 |
| 3.8.2 突变体Δtask1的遗传稳定性研究 | 第68-69页 |
| 3.9 突变体Δtaskkk的潮霉素抗性水平和遗传稳定性检测 | 第69-70页 |
| 3.9.1 突变体Δtaskkk的潮霉素抗性水平检测 | 第69页 |
| 3.9.2 突变体Δtaskkk的遗传稳定性研究 | 第69-70页 |
| 3.10 本章小结 | 第70-71页 |
| 第4章 Task1和taskkk基因对棘孢木霉生长的影响 | 第71-76页 |
| 4.1 引言 | 第71页 |
| 4.2 基因task1和taskkk对棘孢木霉菌体形态的影响 | 第71-74页 |
| 4.2.1 平板培养观察task1和taskkk基因对棘孢木霉生长的影响 | 第71-72页 |
| 4.2.2 光学显微镜观察task1和taskkk基因对棘孢木霉生长的影响 | 第72-73页 |
| 4.2.3 原子力显微镜观察task1和taskkk基因对棘孢木霉生长的影响 | 第73-74页 |
| 4.3 基因task1和taskkk对棘孢木霉生长的影响 | 第74-75页 |
| 4.3.1 基因task1和taskkk对棘孢木霉生长速度的影响 | 第74-75页 |
| 4.3.2 基因task1和taskkk对棘孢木霉生长量的影响 | 第75页 |
| 4.4 本章小结 | 第75-76页 |
| 第5章 Task1和taskkk基因对棘孢木霉重寄生的影响 | 第76-98页 |
| 5.1 引言 | 第76页 |
| 5.2 基因task1和taskkk对棘孢木霉重寄生能力的影响 | 第76-82页 |
| 5.2.1 平板对峙观察task1和taskkk基因对棘孢木霉重寄生的影响 | 第76-78页 |
| 5.2.2 光学显微镜观察task1和taskkk基因对棘孢木霉重寄生的影响 | 第78-80页 |
| 5.2.3 原子力显微镜观察task1和taskkk基因对重寄生的影响 | 第80-82页 |
| 5.3 基因task1和taskkk对棘孢木霉水解酶基因表达的调控 | 第82-89页 |
| 5.3.1 Task1和taskkk基因对几丁质酶基因(ech42)表达的影响 | 第82-83页 |
| 5.3.2 Task1和taskkk基因对纤维二糖水解酶（cbh1）表达的影响 | 第83-84页 |
| 5.3.3 Task1和taskkk基因对β-1,3葡聚糖酶基因(bgn13.1)表达的影响 | 第84-85页 |
| 5.3.4 Task1和taskkk基因对β-1,6葡聚糖酶基因(bgn16.1)表达的影响 | 第85-86页 |
| 5.3.5 Task1和taskkk基因对N-乙酰氨基葡萄糖苷酶1基因(nag1)表达的影响 | 第86-87页 |
| 5.3.6 Task1和taskkk基因对N-乙酰氨基葡萄糖苷酶2基因(nag2)表达的影响 | 第87-88页 |
| 5.3.7 Task1和taskkk基因对β-1,4葡聚糖酶基因(egl1)表达的影响 | 第88-89页 |
| 5.4 基因task1和taskkk对棘孢木霉细胞壁水解酶酶活的影响 | 第89-96页 |
| 5.4.1 标准曲线的测定 | 第89-90页 |
| 5.4.2 Task1和taskkk基因对棘孢木霉几丁质酶酶活的影响 | 第90-91页 |
| 5.4.3 Task1和taskkk基因对棘孢木霉N-乙酰氨基葡萄糖苷酶酶活的影响 | 第91-93页 |
| 5.4.4 Task1和taskkk基因对棘孢木霉β-1,3葡聚糖酶酶活的影响 | 第93-94页 |
| 5.4.5 Task1和taskkk基因对棘孢木霉纤维素酶酶活的影响 | 第94-95页 |
| 5.4.6 Task1和taskkk基因对棘孢木霉β-葡萄糖苷酶酶活的影响 | 第95-96页 |
| 5.5 本章小结 | 第96-98页 |
| 第6章 Task1和taskkk基因对棘孢木霉抗生作用的影响 | 第98-103页 |
| 6.1 引言 | 第98页 |
| 6.2 Task1和taskkk基因对聚酮合酶基因（pksT1）表达的影响 | 第98-99页 |
| 6.3 Task1和taskkk基因对棘孢木霉抗真菌代谢物的影响 | 第99-101页 |
| 6.4 Task1和taskkk基因对抗生素6-戊基-α-吡喃酮产量的影响 | 第101页 |
| 6.5 本章小结 | 第101-103页 |
| 结论 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-119页 |
| 附录 | 第119-130页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第130-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
| 个人简历 | 第133页 |
