| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-28页 |
| 1 引言 | 第11页 |
| 2 黄曲霉及花生黄曲霉污染 | 第11-12页 |
| 2.1 黄曲霉和黄曲霉毒素 | 第11-12页 |
| 2.2 花生黄曲霉污染 | 第12页 |
| 3 解决花生黄曲霉污染问题的措施 | 第12-14页 |
| 3.1 田问农艺预防 | 第12-13页 |
| 3.2 生物防治 | 第13页 |
| 3.3 传统育种 | 第13-14页 |
| 3.4 基因工程 | 第14页 |
| 4 转基因技术发展和应用的障碍 | 第14-15页 |
| 4.1 选择性标记基因的潜在危害 | 第14-15页 |
| 4.2 外源基因的组成型表达 | 第15页 |
| 4.3 外源基因的潜在危害 | 第15页 |
| 5 植物安全性转基因的研究进展 | 第15-18页 |
| 5.1 内源基因的使用 | 第15-16页 |
| 5.2 标记基因删除技术 | 第16-17页 |
| 5.2.1 共转化法 | 第16页 |
| 5.2.2 位点特异性重组法 | 第16页 |
| 5.2.3 转座子法 | 第16-17页 |
| 5.2.4 染色体内同源重组法 | 第17页 |
| 5.2.5 无选择标记基因的转基因技术 | 第17页 |
| 5.3 特异启动子 | 第17-18页 |
| 6 安全抗黄曲霉的转基因花生最新研究进展 | 第18-21页 |
| 6.1 花生果种皮特异表达启动子及黄曲霉诱导表达启动子的克隆 | 第18页 |
| 6.2 黄曲霉抗性相关基因的克隆 | 第18-21页 |
| 6.2.1 改变花生果种皮成分或结构的转录因子 | 第19页 |
| 6.2.2 抗性功能蛋白与抑菌蛋白基因 | 第19-20页 |
| 6.2.3 胁迫抗性基因 | 第20-21页 |
| 6.3 无选择标记基因的转基因技术 | 第21页 |
| 7 讨论 | 第21-23页 |
| 参考文献 | 第23-28页 |
| 第二章 花生黄曲霉诱导表达基因AhOMT1启动子的克隆与鉴定 | 第28-40页 |
| 1 引言 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-30页 |
| 2.1 植物材料 | 第29页 |
| 2.2 花生基因组DNA提取与文库构建 | 第29页 |
| 2.3 引物设计与侧翼PCR | 第29-30页 |
| 2.4 生物信息学分析 | 第30页 |
| 3 结果 | 第30-35页 |
| 3.1 DNA提取与文库构建 | 第30-31页 |
| 3.2 AhOMT1启动子克隆 | 第31页 |
| 3.3 AhOMT1启动子序列分析 | 第31-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 第三章 花生抗黄曲霉组织特异表达载体构建与农杆菌介导的花生遗传转化 | 第40-64页 |
| 1 引言 | 第40-41页 |
| 2 材料与方法 | 第41-46页 |
| 2.1 材料 | 第41页 |
| 2.2 基因克隆 | 第41-43页 |
| 2.2.1 花生基因组DNA提取与启动子克隆 | 第41页 |
| 2.2.2 抗性相关基因的克隆 | 第41-43页 |
| 2.3 表达载体构建 | 第43-44页 |
| 2.4 农杆菌介导的花生遗传转化 | 第44-46页 |
| 2.4.1 工程菌液的制备 | 第44页 |
| 2.4.2 外植体的制备 | 第44-45页 |
| 2.4.3 花生遗传转化过程 | 第45页 |
| 2.4.4 伸成不定芽的嫁接 | 第45页 |
| 2.4.5 PCR鉴定转基因植株 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-59页 |
| 3.1 中间载体pBI121A的构建 | 第46页 |
| 3.2 启动子克隆与载体构建 | 第46-48页 |
| 3.3 基因克隆与载体构建 | 第48-53页 |
| 3.3.1 CHI基因克隆与pBI121A-B1-CHI载体构建 | 第48页 |
| 3.3.2 WRKY基因克隆与pBI121A-B1-WRKY载体构建 | 第48-49页 |
| 3.3.3 RIP基因克隆与pBI121A-B1-RIP载体构建 | 第49-50页 |
| 3.3.4 GLU基因克隆与pBI121A-B1-GLU载体构建 | 第50-51页 |
| 3.3.5 RESS基因克隆与pBI121A-B1-RESS载体构建 | 第51页 |
| 3.3.6 TTG2基因克隆与pBI121A-B1-TTG2载体构建 | 第51-52页 |
| 3.3.7 CBF2基因克隆与pBI121A-B1-CBF2载体构建 | 第52-53页 |
| 3.4 果皮特异表达抗黄曲霉载体构建 | 第53-57页 |
| 3.5 花生遗传转化 | 第57-59页 |
| 3.5.1 遗传转化 | 第57-58页 |
| 3.5.2 PCR验证转基因植株 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-64页 |
| 附录 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
