| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-18页 |
| 1 前言 | 第18-29页 |
| 1.1 柑橘果实有机酸种类 | 第18-19页 |
| 1.2 柑橘果实有机酸变化规律 | 第19页 |
| 1.3 柑橘果实柠檬酸合成与降解 | 第19-21页 |
| 1.4 柑橘果实柠檬酸转运 | 第21-26页 |
| 1.4.1 转运蛋白 | 第21页 |
| 1.4.2 质子泵 | 第21-26页 |
| 1.4.2.1 质子泵简介 | 第21-25页 |
| 1.4.2.2 质子泵与果实有机酸 | 第25-26页 |
| 1.5 转录因子与果实品质 | 第26-27页 |
| 1.6 转录因子与果实风味 | 第27-28页 |
| 1.7 研究目标和内容 | 第28-29页 |
| 2 V-ATPase与柑橘果实柠檬酸代谢 | 第29-39页 |
| 2.1 材料和方法 | 第29-31页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.1.2 主要品质指标测定 | 第29-30页 |
| 2.1.2.1 可滴定酸(TA)测定 | 第29页 |
| 2.1.2.2 有机酸测定 | 第29-30页 |
| 2.1.3 基因表达分析 | 第30页 |
| 2.1.3.1 RNA提取和cDNA合成 | 第30页 |
| 2.1.3.2 实时定量PCR(qRT-PCR)分析 | 第30页 |
| 2.1.4 统计分析 | 第30-31页 |
| 2.2 结果与分析 | 第31-37页 |
| 2.2.1 椪柑果实发育阶段过程有机酸和可滴定酸(TA)含量变化 | 第31-32页 |
| 2.2.2 椪柑果实发育阶段过程V-ATPase编码基因表达研究 | 第32-34页 |
| 2.2.3 利用不同酸度柑橘验证柠檬酸积累相关的CitVHA基因 | 第34-36页 |
| 2.2.4 利用热处理降酸椪柑验证柠檬酸降解相关的CitVHA基因 | 第36-37页 |
| 2.3 讨论 | 第37-39页 |
| 3 参与柠檬酸代谢的CitERF13鉴别及其功能研究 | 第39-50页 |
| 3.1 材料和方法 | 第39-42页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.1.2 基因表达分析 | 第39-40页 |
| 3.1.2.1 基因获得 | 第39页 |
| 3.1.2.2 RNA提取和逆转录 | 第39页 |
| 3.1.2.3 实时定量PCR(qRT-PCR)分析 | 第39-40页 |
| 3.1.3 酵母双杂交(蛋白互作) | 第40页 |
| 3.1.4 亚细胞定位 | 第40-42页 |
| 3.1.5 双分子荧光互补(蛋白互作) | 第42页 |
| 3.1.6 统计分析 | 第42页 |
| 3.2 结果与分析 | 第42-48页 |
| 3.2.1 酵母双杂结果显示CitVHA-c4与CitERF13存在蛋白-蛋白互作 | 第42-43页 |
| 3.2.2 明确CitERF13和CitVHA-c4的同源基因也具有互作效应 | 第43-45页 |
| 3.2.3 CitVHA-c4与CitERF13亚细胞定位分析 | 第45页 |
| 3.2.4 BiFC验证CitVHA-c4与CitERF13蛋白互作 | 第45-46页 |
| 3.2.5 CitVHA-c4与CitERF13协同表达模式研究 | 第46-48页 |
| 3.3 讨论 | 第48-50页 |
| 4 CitERF13与CitVHA-c4协同调控柠檬酸代谢的生物学机制 | 第50-57页 |
| 4.1 材料和方法 | 第50-53页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第50页 |
| 4.1.2 烟草瞬时过量表达 | 第50-51页 |
| 4.1.3 拟南芥瞬时过量表达 | 第51-52页 |
| 4.1.4 烟草转基因 | 第52页 |
| 4.1.5 柠檬酸测定 | 第52页 |
| 4.1.6 统计分析 | 第52-53页 |
| 4.2 结果与分析 | 第53-55页 |
| 4.2.1 利用CitERF13过量表达的转基因烟草研究基因功能 | 第53页 |
| 4.2.2 CitERF13和CitVHA-c4与柠檬酸积累功能研究 | 第53-54页 |
| 4.2.3 利用拟南芥突变体研究CitERF13和CitVHA-c4的协同关系 | 第54-55页 |
| 4.3 讨论 | 第55-57页 |
| 5 小结与展望 | 第57-59页 |
| 5.1 小结 | 第57-58页 |
| 5.2 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-73页 |
| 作者学习经历及在学期间所取得的科研成果 | 第73-74页 |
