中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
ABREVIATIONS | 第12-14页 |
1. REVIEW OF LITERATURE | 第14-36页 |
1.1. Avian coccidiosis | 第14-15页 |
1.2. Eimeria species | 第15-16页 |
1.3. Life cycle | 第16-18页 |
1.4 Coccidial oocysts | 第18-20页 |
1.5. The chicken immune system | 第20-22页 |
1.6. Why E.mitis is underestimated? | 第22-26页 |
1.7. Immune response against coccidiosis | 第26-32页 |
1.8. Control of coccidiosis | 第32-33页 |
1.9. Vaccination control | 第33-36页 |
2. INTRODUCTION | 第36-43页 |
2.1 Transgenic parasites | 第36-43页 |
3. MATERIALS AND METHODS | 第43-55页 |
3.1. Parasite and animal experiments | 第43-45页 |
3.2. Monitoring of oocyst per gram of feces | 第45页 |
3.3. Experimental chickens | 第45-46页 |
3.4. Construction of double cassette vector plasmid | 第46-49页 |
3.5. Transfection of E.mitis | 第49页 |
3.6. In-vivo transfection efficiency and in-vitro cell culture assay | 第49-51页 |
3.7 Microscopic observation of YFP-expressing parasites | 第51页 |
3.8 Pyrimethimine selection and fluorescence activated cell sorting | 第51页 |
3.9. Genomic DNA analysis of transgenic E.mitis | 第51-52页 |
3.10. Reproductive test of wild type and transgenic E.mitis | 第52-53页 |
3.11. Immunogenicity | 第53-54页 |
3.12. Hematological analysis | 第54页 |
3.13. Statistical analysis | 第54-55页 |
4. RESULTS | 第55-72页 |
4.1. Transfection efficiency of E. mitis | 第55-57页 |
4.2. In vitro Expression of EYFP in sporozoites | 第57页 |
4.3. Validation of the stable transfection of E.mitis by PCR | 第57-58页 |
4.4. Analysis of plasmid insertion by plasmid rescuing technique | 第58-59页 |
4.5. Linear and circular plasmid optimal transfection efficiency and fluorescenceintensity | 第59-61页 |
4.6. Comparative reproduction efficiency of wE.mitis and tE.mitis | 第61-63页 |
4.7. Immunogenicity | 第63-67页 |
4.8. Weight gain changes | 第67-68页 |
4.9. Hematological changes | 第68-72页 |
5. DISCUSSION | 第72-85页 |
5.1 Transfection efficiency | 第73-74页 |
5.2 Plasmid insertion analysis | 第74-75页 |
5.3 Linear and circular plasmid transfection efficiency | 第75页 |
5.4 The Reproduction efficiency | 第75-77页 |
5.5 Role of IL-4 and significance of humoral immunity against coccidiosis | 第77-82页 |
5.6 Hematology | 第82-85页 |
6. CONCLUSIONS | 第85-86页 |
7. LITERATURE CITED | 第86-98页 |
ACKNOWLEDGEMENTS | 第98-100页 |
Resume | 第100-102页 |