| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-29页 |
| 第一章 猪链球菌血清型分型及毒力因子筛选研究进展 | 第11-29页 |
| 1 猪链球菌的概况 | 第11-12页 |
| 1.1 分类 | 第11页 |
| 1.2 形态及染色特征 | 第11页 |
| 1.3 抵抗力 | 第11页 |
| 1.4 致病性 | 第11页 |
| 1.5 诊断方法 | 第11-12页 |
| 1.6 免疫与治疗 | 第12页 |
| 2 猪链球菌血清型分型 | 第12-16页 |
| 2.1 猪链球菌血清型分型概况 | 第12页 |
| 2.2 根据细菌的溶血能力进行分型 | 第12-13页 |
| 2.3 多为点序列分型 | 第13页 |
| 2.4 利用脉冲场凝胶电泳分析 | 第13-14页 |
| 2.5 聚合酶链式反应 | 第14页 |
| 2.6 限制性片段长度多态性分析 | 第14页 |
| 2.7 随机扩增多态性DNA分析 | 第14-15页 |
| 2.8 核糖体分型 | 第15页 |
| 2.9 利用分子伴侣(Cpn60)基因对SS的基因分群 | 第15页 |
| 2.10 基因测序 | 第15-16页 |
| 3 猪链球菌常见毒力因子介绍 | 第16-20页 |
| 3.1 荚膜多糖 | 第16页 |
| 3.2 菌毛 | 第16页 |
| 3.3 溶解酶释放蛋白和胞外因子 | 第16-17页 |
| 3.4 溶血素 | 第17页 |
| 3.5 纤连蛋白结合蛋白 | 第17-18页 |
| 3.6 谷氨酸脱氢酶 | 第18页 |
| 3.7 甘油醛-3-磷酸甘油醛脱氢酶 | 第18页 |
| 3.8 毒力相关基因 | 第18-19页 |
| 3.9 细菌素抑制素 | 第19页 |
| 3.10 唾液酸 | 第19页 |
| 3.11 血清透明因子 | 第19页 |
| 3.12 LgG蛋白 | 第19-20页 |
| 3.13 38-KD蛋白 | 第20页 |
| 3.14 SsnA | 第20页 |
| 4 现有猪链球菌毒力因子筛选方法 | 第20-21页 |
| 4.1 多重PCR检测 | 第20-21页 |
| 4.2 毒力基因SLY的研究 | 第21页 |
| 5 相芯片技术的研究进展 | 第21-22页 |
| 5.1 液相芯片技术背景 | 第21-22页 |
| 5.2 xTAG液相芯片的技术路线 | 第22页 |
| 6 液相芯片的应用展望 | 第22-23页 |
| 参考文献 | 第23-29页 |
| 第二篇 研究内容 | 第29-81页 |
| 第一章 猪链球菌优势血清型分型液相芯片的研制 | 第29-49页 |
| 1 材料 | 第29-31页 |
| 1.1 标准菌株来源 | 第29-30页 |
| 1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 1.3 主要仪器 | 第30-31页 |
| 2 方法 | 第31-35页 |
| 2.1 菌株培养 | 第31页 |
| 2.2 核酸提取和浓度测定 | 第31页 |
| 2.3 引物设计 | 第31-32页 |
| 2.4 单重与多重PCR扩增 | 第32页 |
| 2.5 微球耦联杂交 | 第32页 |
| 2.6 杂交温度的优化 | 第32页 |
| 2.7 液相芯片仪读取 | 第32页 |
| 2.8 敏感性实验 | 第32-33页 |
| 2.9 特异性试验 | 第33页 |
| 2.10 重复性试验 | 第33页 |
| 2.11 标准血清凝集试验 | 第33-35页 |
| 3 结果 | 第35-46页 |
| 3.1 单重与多重PCR扩增结果 | 第35-37页 |
| 3.2 杂交温度优化结果 | 第37-38页 |
| 3.3 液相芯片仪读取结果 | 第38-40页 |
| 3.4 液相芯片建立结果 | 第40页 |
| 3.5 敏感性试验结果 | 第40-43页 |
| 3.6 特异性试验结果 | 第43-44页 |
| 3.7 重复性试验结果 | 第44-45页 |
| 3.8 标准血清凝集试验结果 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-49页 |
| 第二章 猪链球菌主要毒力因子筛选液相芯片的研制 | 第49-63页 |
| 1 材料 | 第49-50页 |
| 1.1 菌株来源 | 第49-50页 |
| 1.2 主要试剂 | 第50页 |
| 1.3 主要仪器 | 第50页 |
| 2 方法 | 第50-53页 |
| 2.1 菌株培养 | 第50页 |
| 2.2 核酸提取和浓度测定 | 第50页 |
| 2.3 引物设计 | 第50-51页 |
| 2.4 单重与多重PCR扩增 | 第51页 |
| 2.5 微球耦联杂交 | 第51页 |
| 2.6 杂交温度的优化 | 第51页 |
| 2.7 液相芯片仪读取结果 | 第51-52页 |
| 2.8 敏感性实验 | 第52页 |
| 2.9 特异性试验 | 第52页 |
| 2.10 重复性试验 | 第52页 |
| 2.11 毒力因子的序列测定 | 第52-53页 |
| 3 结果 | 第53-60页 |
| 3.1 单重与多重PCR扩增结果 | 第53-55页 |
| 3.2 杂交温度优化结果 | 第55-56页 |
| 3.3 液相芯片仪读取结果与分析 | 第56-57页 |
| 3.4 敏感性实验结果 | 第57-58页 |
| 3.5 特异性试验结果 | 第58-59页 |
| 3.6 重复性试验结果 | 第59-60页 |
| 3.7 毒力因子测序结果 | 第60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-63页 |
| 第三章 猪链球菌优势血清型分型及主要毒力因子筛选液相芯片的应用 | 第63-81页 |
| 1 材料 | 第63-64页 |
| 1.1 临床菌株 | 第63页 |
| 1.2 主要试剂 | 第63-64页 |
| 1.3 主要仪器 | 第64页 |
| 2 方法 | 第64-66页 |
| 2.1 细菌DNA提取 | 第64页 |
| 2.2 猪链球菌优势血清型分型液相芯片的应用 | 第64-65页 |
| 2.3 猪链球菌主要毒力因子筛选液相芯片的应用 | 第65-66页 |
| 3 结果 | 第66-77页 |
| 3.1 临床分离鉴定 | 第66-68页 |
| 3.2 液相芯片检测结果 | 第68-74页 |
| 3.3 标准血清凝集结果 | 第74-77页 |
| 3.4 基因测序结果 | 第77页 |
| 4 讨论 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-81页 |
| 全文总结 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 攻读硕士学位期间发表的主要专利及论文 | 第85页 |