| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| 1.1 拟南芥响应非生物胁迫的分子机理 | 第12-22页 |
| 1.1.1 植物抗逆概论 | 第12-15页 |
| 1.1.1.1 渗透调节与抗逆性 | 第12-13页 |
| 1.1.1.2 植物激素与抗逆性 | 第13页 |
| 1.1.1.3 生物膜、活性氧与抗逆性 | 第13-14页 |
| 1.1.1.4 逆境蛋白与抗逆性 | 第14-15页 |
| 1.1.2 植物响应非生物胁迫的分子机理 | 第15-22页 |
| 1.1.2.1 植物响应盐胁迫的分子机理 | 第15-17页 |
| 1.1.2.2 植物响应寒冷胁迫的分子机理 | 第17-20页 |
| 1.1.2.3 植物响应干旱胁迫的分子机理 | 第20-22页 |
| 1.2 拟南芥DUF1336家族基因与非生物胁迫 | 第22页 |
| 1.3 立题依据及主要研究内容 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第23页 |
| 2.1.3 酶与各种生化试剂 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-35页 |
| 2.2.1 突变体材料的鉴定及表型分析 | 第23-26页 |
| 2.2.1.1 植物基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.1.2 PCR鉴定纯合突变体植株 | 第24-25页 |
| 2.2.1.3 cde1-1,cde1-2,cde4-1的氯化钠处理 | 第25页 |
| 2.2.1.4 cde1-1,cde1-2,cde4-1的甘露醇处理 | 第25-26页 |
| 2.2.2 CDE家族基因Genomic-GUS表达载体的构建 | 第26-32页 |
| 2.2.2.1 PCR扩增 | 第26-27页 |
| 2.2.2.2 DNA凝胶回收 | 第27页 |
| 2.2.2.3 连接反应 | 第27-28页 |
| 2.2.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
| 2.2.2.5 大肠杆菌细胞的转化 | 第28页 |
| 2.2.2.6 菌落PCR及测序 | 第28-29页 |
| 2.2.2.7 试剂盒法提取大肠杆菌质粒DNA | 第29页 |
| 2.2.2.8 限制性酶切鉴定表达载体 | 第29-30页 |
| 2.2.2.9 LR反应 | 第30页 |
| 2.2.2.10 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第30页 |
| 2.2.2.11 冻融法转化农杆菌细胞 | 第30-31页 |
| 2.2.2.12 拟南芥的转化 | 第31页 |
| 2.2.2.13 转基因拟南芥的鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.3 RNA提取及半定量RT-PCR | 第32-33页 |
| 2.2.3.1 拟南芥RNA的提取(试剂盒法) | 第32页 |
| 2.2.3.2 RNA的反转录 | 第32-33页 |
| 2.2.3.3 半定量RT-PCR | 第33页 |
| 2.2.4 转基因拟南芥材料GUS染色 | 第33-35页 |
| 2.2.4.1 G1US染液 | 第33-34页 |
| 2.2.4.2 GUS染色 | 第34页 |
| 2.2.4.3 CDE家族基因GUS材料的处理及染色 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-42页 |
| 3.1 DUF1336基因家族的生物信息学信息分析 | 第35-37页 |
| 3.1.1 DUF1336基因家族基因分类 | 第35-36页 |
| 3.1.2 DUF1336基因家族多物种序列比对 | 第36-37页 |
| 3.1.3 CDE基因家族蛋白质结构预测及跨膜预测 | 第37页 |
| 3.2 CDE1,CDE4的突变体鉴定及表型分析 | 第37-38页 |
| 3.3 CDE家族基因表达模式分析 | 第38-42页 |
| 3.3.1 半定量RT-PCR分析表达模式 | 第38-39页 |
| 3.3.2 GUS染色分析表达模式 | 第39-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 攻读学位期间发表的论文及成果 | 第50页 |
