| 摘要 | 第3-7页 |
| abstract | 第7-11页 |
| 第1章 引言 | 第17-23页 |
| 1.1 结直肠癌概述 | 第17页 |
| 1.2 PD-L1分子概述 | 第17-20页 |
| 1.3 K-ras基因概述 | 第20-21页 |
| 1.4 研究内容 | 第21-23页 |
| 第2章 PD-L1分子在散发性结直肠癌中的表达特征及临床意义 | 第23-37页 |
| 2.1 前言 | 第23-24页 |
| 2.2 材料和方法 | 第24-29页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第25页 |
| 2.2.3 标本收集 | 第25-27页 |
| 2.2.4 组织芯片制作 | 第27页 |
| 2.2.5 HE方法和步骤 | 第27-28页 |
| 2.2.6 免疫组化染色步骤 | 第28页 |
| 2.2.7 免疫组化染色结果判断： | 第28页 |
| 2.2.8 随访 | 第28-29页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第29页 |
| 2.3 实验结果 | 第29-34页 |
| 2.3.1 PD-L1染色结果 | 第29-30页 |
| 2.3.2 PD-L1在结直肠癌组织中的表达情况 | 第30页 |
| 2.3.3 PD-L1表达水平与结直肠癌临床病理特征的关系 | 第30-32页 |
| 2.3.4 PD-L1表达水平与结直肠癌患者预后的关系 | 第32-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-36页 |
| 2.5 结论 | 第36-37页 |
| 第3章 PD-L1调节结直肠癌细胞生物学行为的作用研究 | 第37-56页 |
| 3.1 前言 | 第37-38页 |
| 3.2 材料和方法 | 第38-45页 |
| 3.2.1 主要试剂和仪器 | 第38页 |
| 3.2.2 细胞株 | 第38-40页 |
| 3.2.3 细胞分组 | 第40页 |
| 3.2.4 质粒提取 | 第40-41页 |
| 3.2.5 慢病毒包装 | 第41-42页 |
| 3.2.6 细胞转染实验 | 第42-43页 |
| 3.2.7 流式检测细胞凋亡 | 第43页 |
| 3.2.8 流式检测细胞周期 | 第43页 |
| 3.2.9 侵袭实验 | 第43页 |
| 3.2.10 划线实验 | 第43-44页 |
| 3.2.11 细胞活性CCK8检测 | 第44页 |
| 3.2.12 杀瘤实验 | 第44-45页 |
| 3.2.13 统计学分析 | 第45页 |
| 3.3 实验结果 | 第45-54页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第45页 |
| 3.3.2 流式检测细胞凋亡 | 第45-47页 |
| 3.3.3 流式检测细胞周期 | 第47-49页 |
| 3.3.4 侵袭实验 | 第49-51页 |
| 3.3.5 划线实验 | 第51-52页 |
| 3.3.6 CCK8检测 | 第52-53页 |
| 3.3.7 杀瘤实验 | 第53-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-55页 |
| 3.5 结论 | 第55-56页 |
| 第4章 PD-L1与K-ras基因及其与PI3K/AKT/mTOR通路相关性研究 | 第56-77页 |
| 4.1 前言 | 第56-57页 |
| 4.2 材料和方法 | 第57-65页 |
| 4.2.1 细胞株 | 第57-58页 |
| 4.2.2 主要试剂和仪器 | 第58页 |
| 4.2.3 结直肠癌细胞株DNA的抽提 | 第58-59页 |
| 4.2.4 细胞株K-ras基因突变检测 | 第59-60页 |
| 4.2.5 结直肠癌组织DNA提取 | 第60页 |
| 4.2.6 PCR扩增 | 第60-61页 |
| 4.2.7 DNA直接测序分析 | 第61页 |
| 4.2.8 RT-PCR检测细胞中的Akt、mTOR、S6K1mRNA的表达 | 第61-63页 |
| 4.2.9 WesternBlot检测细胞中Akt、mTOR、S6K1蛋白表达 | 第63-64页 |
| 4.2.10 统计学分析 | 第64-65页 |
| 4.3 结果 | 第65-72页 |
| 4.3.1 结直肠癌细胞株中K-ras基因状态 | 第65-66页 |
| 4.3.2 结直肠癌细胞中PD-L1表达与K-ras基因状态的关系 | 第66页 |
| 4.3.3 结直肠癌组织中K-ras基因状态 | 第66-68页 |
| 4.3.4 K-ras基因状态与结直肠癌临床病理特征的关系 | 第68-70页 |
| 4.3.5 PD-L1表达与K-ras基因状态的关系 | 第70页 |
| 4.3.6 RT-PCR和Westernbolt检测Akt、mTOR、S6K1mRNA和蛋白的表达情况 | 第70-72页 |
| 4.4 讨论 | 第72-76页 |
| 4.5 结论 | 第76-77页 |
| 第5章 结论与展望 | 第77-80页 |
| 5.1 结论 | 第77-78页 |
| 5.2 进一步工作的方向 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-88页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第88-89页 |
| 综述 | 第89-95页 |
| 参考文献 | 第93-95页 |
