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荧光成像的生物传感新方法研究

摘要第5-8页
Abstract第8-10页
第1章 绪论第15-32页
    1.1 基于纳米材料的荧光探针在细胞成像中的应用第15-20页
        1.1.1 多肽纳米材料第15-18页
        1.1.2 聚合物纳米材料第18-19页
        1.1.3 其他无机荧光纳米材料探针第19-20页
    1.2 基于核酸的荧光探针在细胞成像中的应用第20-27页
        1.2.1 杂交探针第20-21页
        1.2.2 适配体探针第21-23页
        1.2.3 核酸分子放大技术第23-27页
    1.3 有机分子荧光探针在细胞成像中的应用第27-30页
        1.3.1 用于生物硫醇的成像分析第27-28页
        1.3.2 用于活性氧(ROS)与活性氮(RNS)的成像分析第28-29页
        1.3.3 用于荧光成像金属离子第29-30页
    1.4 本研究论文的工作内容第30-32页
第2章 酶可激活式自组装多肽纳米线探针用于肿瘤的靶向治疗和荧光成像第32-46页
    2.1 前言第32-33页
    2.2 实验部分第33-36页
        2.2.1 试剂第33页
        2.2.2 多肽纳米线探针的制备及表征第33-34页
        2.2.3 多肽纳米线的体外酶切分析第34-35页
        2.2.4 细胞培养及荧光成像第35页
        2.2.5 多肽纳米线的毒性和溶血实验分析第35-36页
        2.2.6 动物体内抗肿瘤活性研究第36页
    2.3 结果与讨论第36-45页
        2.3.1 实验设计原理第36-37页
        2.3.2 多肽纳米线的表征第37-39页
        2.3.3 多肽纳米线的体外酶切分析第39-41页
        2.3.4 多肽纳米线选择性靶向肿瘤细胞的荧光成像第41-43页
        2.3.5 多肽纳米线对肿瘤细胞的靶向治疗和溶血实验研究第43-44页
        2.3.6 动物体内抗肿瘤疗效研究第44-45页
    2.4 小结第45-46页
第3章 基于连接介导的支化杂交链式反应用于单个细胞中单分子mRNA突变的原位成像检测第46-63页
    3.1 前言第46-47页
    3.2 实验部分第47-52页
        3.2.1 试剂与仪器第47-49页
        3.2.2 体外验证连接酶介导点突变的识别第49页
        3.2.3 体外bHCR的验证第49页
        3.2.4 琼脂糖凝胶电泳分析第49页
        3.2.5 原子力显微镜分析第49-50页
        3.2.6 细胞培养与固定第50页
        3.2.7 ligation-bHCR FISH分析用于KRAS mRNA突变检测第50-51页
        3.2.8 共聚焦荧光成像分析第51页
        3.2.9 实时荧光定量RT-qPCR检测KRAS mRNA第51页
        3.2.10 ligation-bHCR FISH的控制实验第51-52页
    3.3 结果与讨论第52-62页
        3.3.1 实验设计原理第52-53页
        3.3.2 ligation-bHCR的体外验证第53-57页
        3.3.3 ligation-bHCR原位成像突变的mRNA第57-62页
    3.4 小结第62-63页
第4章 基于支化杂交链式反应用于单个细胞中单分子microRNA的原位成像检测第63-74页
    4.1 前言第63-64页
    4.2 实验部分第64-68页
        4.2.1 试剂与仪器第64-65页
        4.2.2 体外bHCR产物的制备第65页
        4.2.3 电泳分析和原子力显微镜成像分析第65-66页
        4.2.4 细胞培养与固定第66页
        4.2.5 miR-21原位成像第66-67页
        4.2.6 荧光定量PCR检测miR-21第67页
        4.2.7 控制实验第67-68页
    4.3 结果与讨论第68-73页
        4.3.1 实验设计原理第68页
        4.3.2 实验原理的验证第68-70页
        4.3.3 肿瘤细胞中miR-21的原位荧光可视化检测第70-73页
    4.4 小结第73-74页
第5章 基于聚合物纳米颗粒的比率荧光化学传感器用于活细胞中的pH成像第74-88页
    5.1 前言第74-75页
    5.2 实验部分第75-77页
        5.2.1 试剂第75页
        5.2.2 RFPNS的制备及表征第75-76页
        5.2.3 RFPNS在不同pH值缓冲溶液中的荧光测定第76页
        5.2.4 RFPNS在不同pH值中的荧光可逆性第76页
        5.2.5 细胞活性检测第76页
        5.2.6 细胞成像第76-77页
    5.3 结果与讨论第77-87页
        5.3.1 实验设计原理第77-78页
        5.3.2 RFPNS的表征第78-79页
        5.3.3 基于FRET比率检测缓冲溶液中的pH值第79-84页
        5.3.4 细胞内pH成像第84-87页
    5.4 小结第87-88页
第6章 具有快速反应和大斯托克位移的激活式荧光探针用于次氯酸的活细胞成像第88-99页
    6.1 前言第88-89页
    6.2 实验部分第89-91页
        6.2.1 试剂与仪器第89页
        6.2.2 ROS和RNS的制备第89页
        6.2.3 HPBD的制备第89-90页
        6.2.4 细胞的培养第90页
        6.2.5 细胞毒性实验第90页
        6.2.6 活细胞荧光成像第90-91页
    6.3 结果与讨论第91-97页
        6.3.1 实验设计原理第91页
        6.3.2 探针HPBD,HPBD-1,HPBD-2对HOCl荧光响应对比第91-92页
        6.3.3 HPBD对HOCl响应的光物理性能研究第92-96页
        6.3.4 活细胞中HOCl的荧光成像分析第96-97页
    6.4 小结第97-99页
结论第99-101页
参考文献第101-123页
附录A 攻读学位期间发表的学术论文目录第123-124页
致谢第124页

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