| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 脂肪酶 | 第12-15页 |
| 1.1.1 脂肪酶的概述 | 第12页 |
| 1.1.2 脂肪酶的催化酯化 | 第12-14页 |
| 1.1.3 偏甘油酯脂肪酶 | 第14页 |
| 1.1.4 单甘油酯脂肪酶 MGLP | 第14-15页 |
| 1.2 大肠杆菌表达系统 | 第15-17页 |
| 1.2.1 表达载体 | 第15-16页 |
| 1.2.2 外源基因结构 | 第16页 |
| 1.2.3 表达宿主菌 | 第16-17页 |
| 1.3 酶的纯化方法 | 第17-19页 |
| 1.3.1 CBD 纯化体系 | 第17页 |
| 1.3.2 膜处理体系 | 第17-18页 |
| 1.3.3 免疫纯化 | 第18页 |
| 1.3.4 双水相系统纯化 | 第18-19页 |
| 1.4 甘油二脂简介 | 第19-21页 |
| 1.4.1 甘油单酯的概述 | 第19页 |
| 1.4.2 甘油二酯的功能及应用 | 第19-21页 |
| 1.4.3 甘油二酯研究现状 | 第21页 |
| 1.5 背景及研究内容 | 第21-23页 |
| 1.5.1 选题背景以及意义 | 第21-22页 |
| 1.5.2 研究内容概述 | 第22-23页 |
| 第二章 MGLP 的表达条件优化及纯化 | 第23-30页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.1 菌体及载体 | 第23页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 MGLP 脂肪酶的表达及条件优化 | 第24-25页 |
| 2.2.2 纤维素的预处理 | 第25页 |
| 2.2.3 MGLP 脂肪酶的吸附以及纯化 | 第25-26页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第26-29页 |
| 2.3.1 MGLP 基因工程菌构建 | 第26页 |
| 2.3.2 IPTG 浓度对于诱导表达 MGLP 的优化探究分析 | 第26-27页 |
| 2.3.3 诱导温度对表达 MGLP 的优化探究分析 | 第27-28页 |
| 2.3.4 酶切得 MGLP 的纯化过程及效果分析 | 第28-29页 |
| 2.4 本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 MGLP 脂肪酶酶学性质研究 | 第30-42页 |
| 3.1 引言 | 第30页 |
| 3.2 实验材料和仪器 | 第30-31页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第30-31页 |
| 3.3 实验方法 | 第31-32页 |
| 3.3.1 酶活及蛋白含量测定 | 第31页 |
| 3.3.2 最适温度及温度稳定性 | 第31页 |
| 3.3.3 最适 pH 及酸碱耐受性 | 第31页 |
| 3.3.4 金属离子的影响 | 第31-32页 |
| 3.3.5 有机溶剂耐受性 | 第32页 |
| 3.3.6 表面活性剂的影响 | 第32页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第32-41页 |
| 3.4.1 BCA 试剂盒测蛋白浓度标准曲线 | 第32-33页 |
| 3.4.2 最适温度及温度稳定性 | 第33-34页 |
| 3.4.3 最适 pH 及酸碱耐受性 | 第34页 |
| 3.4.4 金属离子对酶活性的影响 | 第34-35页 |
| 3.4.5 有机溶剂耐受性 | 第35-36页 |
| 3.4.6 表面活性剂对酶活性的影响 | 第36-37页 |
| 3.4.7 MGLP 在酯化体系中脂肪酸选择性 | 第37-41页 |
| 3.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第四章 MGLP 的催化水解应用 | 第42-49页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 原料与仪器 | 第42-43页 |
| 4.2.1 原料与试剂 | 第42-43页 |
| 4.2.2 主要仪器和设备 | 第43页 |
| 4.3 实验方法 | 第43-44页 |
| 4.3.1 实验方案 | 第43-44页 |
| 4.3.2 辛酸与甘油酯化产物制备 | 第44页 |
| 4.3.3 液相色谱分析 | 第44页 |
| 4.3.4 MGLP 催化辛酸单甘酯水解 | 第44页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第44-48页 |
| 4.4.1 甘油酯混合物制备 | 第44-45页 |
| 4.4.2 水分添加量对水解反应的影响 | 第45-46页 |
| 4.4.3 加酶量对水解反应的影响 | 第46-47页 |
| 4.4.4 温度对水解反应的影响 | 第47-48页 |
| 4.5 本章小结 | 第48-49页 |
| 结论与展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 答辩委员会对论文的评定意见 | 第59页 |
