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丙酮丁醇梭菌的改造、发酵以及产物分离

摘要第2-4页
Abstract第4-5页
引言第9-11页
1 文献综述第11-25页
    1.1 生物丁醇第11页
        1.1.1 丁醇的性质及应用第11页
        1.1.2 丁醇的制法第11页
    1.2 丁醇发酵底物第11-13页
        1.2.1 葡萄糖基物料第12页
        1.2.2 木糖基物料第12页
        1.2.3 果糖基物料第12-13页
    1.3 丙酮丁醇梭状芽孢杆菌的糖转运系统第13-16页
        1.3.1 PTS系统的糖转运第13-16页
        1.3.2 非PTS系统的糖转运第16页
    1.4 丙酮丁醇梭状芽孢杆菌的代谢途径及相关酶第16-21页
        1.4.1 糖酵解途径第16-18页
        1.4.2 产酸期第18页
        1.4.3 产溶剂期第18页
        1.4.4 产酸期到产溶剂期的转变第18-19页
        1.4.5 代谢过程中的关键酶第19-21页
    1.5 生物丁醇发酵的研究第21-24页
        1.5.1 代谢调控第21-22页
        1.5.2 菌株改造第22-23页
        1.5.3 丁醇分离技术第23-24页
    1.6 课题的目的及意义第24-25页
2 敲除和过表达基因工程菌株构建第25-48页
    2.1 引言第25页
    2.2 材料第25-28页
        2.2.1 菌株和质粒第25-26页
        2.2.2 试剂第26-27页
        2.2.3 培养基及所用抗生素第27-28页
        2.2.4 主要实验仪器第28页
    2.3 实验方法第28-43页
        2.3.1 质粒提取、PCR产物纯化以及切胶回收第28-30页
        2.3.2 E.coli DH5α 感受态细胞制备与转化第30-31页
        2.3.3 丙酮丁醇梭状芽孢杆菌基因组提取第31页
        2.3.4 梭菌的电转与保藏第31-32页
        2.3.5 敲除菌株的构建第32-38页
        2.3.6 过表达菌株构建第38-43页
    2.4 结果与讨论第43-47页
        2.4.1 敲除菌株构建验证第43-44页
        2.4.2 过表达菌株构建验证第44-46页
        2.4.3 空载菌株构建验证第46-47页
        2.4.4 遗传稳定性验证第47页
    2.5 小结第47-48页
3 基因工程菌株发酵动力学第48-72页
    3.1 引言第48页
    3.2 实验材料与仪器第48-49页
        3.2.1 实验菌株第48页
        3.2.2 实验试剂第48-49页
        3.2.3 实验仪器第49页
    3.3 实验方法第49-51页
        3.3.1 培养基第49-50页
        3.3.2 培养方法第50页
        3.3.3 菊芋物料的处理第50页
        3.3.4 样品分析方法第50-51页
    3.4 结果与讨论第51-71页
        3.4.1 敲除菌株的发酵第51-58页
        3.4.2 空载菌株发酵第58-59页
        3.4.3 过表达菌株发酵第59-71页
    3.5 本章小结第71-72页
4 发酵液的丁醇分离第72-79页
    4.1 引言第72页
    4.2 实验材料第72-73页
        4.2.1 原料液第72页
        4.2.2 主要实验试剂第72页
        4.2.3 主要实验仪器第72-73页
    4.3 实验方法第73-74页
        4.3.1 PDMS膜制备第73页
        4.3.2 渗透汽化实验第73-74页
        4.3.3 测定与分析方法第74页
    4.4 结果与分析第74-77页
        4.4.1 混合糖发酵液的丁醇分离第74-75页
        4.4.2 菊芋物料发酵液的丁醇分离第75-77页
    4.5 本章小结第77-79页
结论第79-80页
参考文献第80-85页
附录A cac0231基因序列第85-86页
附录B cac0232基因序列第86-87页
附录C thl启动子基因序列第87-88页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第88-89页
致谢第89-91页

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