| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 常用中英文符号缩写词表 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1.1 番茄病毒病的概述 | 第14-15页 |
| 1.1.1 番茄病毒病的危害 | 第14页 |
| 1.1.2 番茄病毒病害症状 | 第14页 |
| 1.1.3 番茄病毒病的主要分布及种类 | 第14-15页 |
| 1.2 南方番茄病毒的概述 | 第15-17页 |
| 1.2.1 南方番茄病毒的发现 | 第15-16页 |
| 1.2.2 基因组结构和组成 | 第16-17页 |
| 1.2.3 症状表型 | 第17页 |
| 1.2.4 传播途径 | 第17页 |
| 1.2.5 寄主范围 | 第17页 |
| 1.3 酵母双杂交系统 | 第17-20页 |
| 1.3.1 酵母双杂交系统的基本原理 | 第17-19页 |
| 1.3.2 酵母双杂交系统的主要特点 | 第19页 |
| 1.3.3 酵母双杂交系统的优点 | 第19-20页 |
| 1.3.4 酵母双杂交系统的局限性及改进 | 第20页 |
| 1.4 利用酵母双杂研究植物蛋白与病毒蛋白相互作用的研究进展 | 第20-23页 |
| 1.4.1 植物蛋白与病毒外壳蛋白之间的相互作用 | 第20-21页 |
| 1.4.2 植物蛋白与病毒运动蛋白之间旳相互作用 | 第21-22页 |
| 1.4.3 植物蛋白与病毒复制酶类蛋白间的相互作用 | 第22-23页 |
| 1.5 研究意义 | 第23-24页 |
| 第二章 诱饵载体pSos-STV CP、pSos-STV RdRp的构建及自激活检测 | 第24-36页 |
| 2.1 材料 | 第24页 |
| 2.1.1 菌株和质粒载体 | 第24页 |
| 2.1.2 常用试剂及试剂盒 | 第24页 |
| 2.1.3 常用试剂及培养基的配制 | 第24页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第24页 |
| 2.2 方法 | 第24-30页 |
| 2.2.1 诱饵载体pSos-STV CP、pSos-STV RdRp的构建 | 第24-28页 |
| 2.2.2 诱饵载体pSos-STV CP、pSos-STV RdRp的自激活验证 | 第28-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-35页 |
| 2.3.1 STV CP，RdRp基因的扩增 | 第30-31页 |
| 2.3.2 诱饵载体pSos重组质粒的双酶切鉴定 | 第31页 |
| 2.3.3 酵母菌株cdc25H表型的验证 | 第31-32页 |
| 2.3.4 诱饵蛋白STV CP、RdRp的自激活验证 | 第32-35页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第35-36页 |
| 第三章 酵母双杂交筛选与STV RdRp、CMV 2b互作的基因 | 第36-47页 |
| 3.1 材料 | 第36页 |
| 3.1.1 菌株和质粒载体 | 第36页 |
| 3.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第36页 |
| 3.2 方法 | 第36-38页 |
| 3.2.1 共转化筛选与STV RdRp、CMV 2b互作的基因 | 第36-37页 |
| 3.2.2 阳性克隆的鉴定 | 第37-38页 |
| 3.3 结果及分析 | 第38-46页 |
| 3.3.1 共转化结果 | 第38-40页 |
| 3.3.2 与STV RdRp互作的阳性克隆质粒的双酶切结果 | 第40-44页 |
| 3.3.3 与CMV 2b互作的阳性克隆质粒的酶切结果 | 第44-45页 |
| 3.3.4 阳性克隆的测序及序列比对分析 | 第45-46页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第46-47页 |
| 第四章 候选基因的回转酵母验证 | 第47-55页 |
| 4.1 材料 | 第47页 |
| 4.1.1 菌株和质粒载体 | 第47页 |
| 4.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第47页 |
| 4.2 方法 | 第47-51页 |
| 4.2.1 回转验证相关载体的构建 | 第47-50页 |
| 4.2.2 GAL4酵母双杂交系统回转验证互作 | 第50-51页 |
| 4.3 结果与分析 | 第51-54页 |
| 4.3.1 相关基因的PCR扩增 | 第51-52页 |
| 4.3.2 相关T重组质粒的单酶切鉴定 | 第52页 |
| 4.3.3 相关酵母载体的双酶切鉴定 | 第52-53页 |
| 4.3.4 GAL4酵母双杂交系统验证互作 | 第53-54页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第54-55页 |
| 第五章 PT2基因的生物信息学分析及亚细胞定位研究 | 第55-66页 |
| 5.1 材料 | 第55页 |
| 5.1.1 菌株及载体 | 第55页 |
| 5.1.2 主要试剂及培养基 | 第55页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第55页 |
| 5.2 方法 | 第55-60页 |
| 5.2.1 PT2基因的生物信息学分析 | 第55-56页 |
| 5.2.2 PT2基因亚细胞定位载体的构建 | 第56-58页 |
| 5.2.3 亚细胞定位载体 35S:GFP-PT2电击转化农杆菌 | 第58页 |
| 5.2.4 菌落PCR鉴定 | 第58-59页 |
| 5.2.5 烟草的遗传转化 | 第59页 |
| 5.2.6 转基因烟草的鉴定 | 第59-60页 |
| 5.2.7 亚细胞定位的荧光观察 | 第60页 |
| 5.3 结果与分析 | 第60-65页 |
| 5.3.1 PT2的生物信息学分析 | 第60-62页 |
| 5.3.2 PT2基因的PCR扩增 | 第62-63页 |
| 5.3.3 亚细胞定位载体 35S:GFP-PT2的双酶切鉴定 | 第63页 |
| 5.3.4 转基因烟草的PCR检测 | 第63-64页 |
| 5.3.5 亚细胞定位的荧光观察 | 第64-65页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第65-66页 |
| 第六章 对STV感染新疆加工番茄的症状研究 | 第66-72页 |
| 6.1 材料 | 第66页 |
| 6.1.1 番茄种子来源 | 第66页 |
| 6.1.2 常用试剂及试剂盒 | 第66页 |
| 6.2 方法 | 第66-68页 |
| 6.2.1 番茄种子的种植 | 第66页 |
| 6.2.2 植物总RNA的提取 | 第66-67页 |
| 6.2.3 一步法RT-PCR检测 | 第67-68页 |
| 6.2.4 杂交育种 | 第68页 |
| 6.3 结果与分析 | 第68-71页 |
| 6.3.1 一步法RT-PCR检测结果 | 第68-69页 |
| 6.3.2 STV感染新疆加工番茄的症状表现 | 第69-71页 |
| 6.4 小结与讨论 | 第71-72页 |
| 第七章 结论与讨论 | 第72-75页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 附录 常用试剂及培养基的配制 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 作者简介 | 第87-88页 |
| 附件 | 第88页 |
