| 英文缩略词表 | 第8-9页 |
| 中文摘要 | 第9-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 1 引言 | 第16-19页 |
| 2 实验材料 | 第19-27页 |
| 2.1 患者血浆 | 第19页 |
| 2.2 实验动物 | 第19页 |
| 2.3 实验细胞 | 第19页 |
| 2.4 药品与试剂 | 第19-22页 |
| 2.4.1 主要药品与试剂 | 第19-21页 |
| 2.4.2 抗体 | 第21-22页 |
| 2.5 引物基因序列 | 第22-25页 |
| 2.6 仪器与设备 | 第25-26页 |
| 2.7 图像分析软件 | 第26-27页 |
| 3 实验方法 | 第27-42页 |
| 3.1 临床实验部分 | 第27-30页 |
| 3.1.1 实验对象入组标准 | 第27页 |
| 3.1.2 血浆采集 | 第27页 |
| 3.1.3 血浆RNA提取 | 第27-28页 |
| 3.1.4 microarray检测 | 第28页 |
| 3.1.5 microarray检测结果分析 | 第28-29页 |
| 3.1.6 Real-time PCR验证microarray结果 | 第29-30页 |
| 3.1.7 ELISA检测LOX-1表达 | 第30页 |
| 3.2 细胞实验部分 | 第30-39页 |
| 3.2.1 细胞复苏 | 第30-31页 |
| 3.2.2 细胞传代 | 第31页 |
| 3.2.3 细胞冻存 | 第31页 |
| 3.2.4 小鼠腹腔巨噬细胞提取 | 第31-32页 |
| 3.2.5 miRNA在不同细胞中的表达检测 | 第32页 |
| 3.2.6 MTT实验 | 第32页 |
| 3.2.7 细胞摄取Dil-Ox-LDL实验 | 第32页 |
| 3.2.8 Ox-LDL干预实验 | 第32-33页 |
| 3.2.9 miR-98mimic、inhibitor转染实验 | 第33页 |
| 3.2.10 LOX-1免疫荧光实验 | 第33页 |
| 3.2.11 ROS荧光检测 | 第33-34页 |
| 3.2.12 LOX-1 siRNA转染 | 第34页 |
| 3.2.13 内皮细胞通透性检测 | 第34页 |
| 3.2.14 腹腔巨噬细胞油红O染色 | 第34-35页 |
| 3.2.15 细胞总RNA提取 | 第35页 |
| 3.2.16 细胞mRNA检测 | 第35页 |
| 3.2.17 细胞蛋白检测 | 第35-38页 |
| 3.2.17.1 细胞总蛋白提取 | 第35-36页 |
| 3.2.17.2 BCA法蛋白浓度测定 | 第36-37页 |
| 3.2.17.3 SDS-PAGE电泳 | 第37页 |
| 3.2.17.4 转膜 | 第37-38页 |
| 3.2.17.5 化学发光、显影、定影 | 第38页 |
| 3.2.17.6 凝胶图象分析 | 第38页 |
| 3.2.18 荧光素酶报告基因检测靶基因 | 第38-39页 |
| 3.2.19 其他可能存在靶基因检测 | 第39页 |
| 3.3 动物实验部分 | 第39-41页 |
| 3.3.1 构建AS小鼠模型 | 第39页 |
| 3.3.2 AgomiR-98和AntagomiR-98干预 | 第39-40页 |
| 3.3.3 AgomiR-98和AntagomiR-98副作用 | 第40页 |
| 3.3.4 小鼠主动脉分离 | 第40页 |
| 3.3.5 动脉脂质沉积检测 | 第40页 |
| 3.3.6 免疫组化检测小鼠主动脉LOX-1 表达 | 第40-41页 |
| 3.3.7 小鼠主动脉mRNA表达检测 | 第41页 |
| 3.3.8 小鼠主动脉组织蛋白检测 | 第41页 |
| 3.3.9 小鼠内皮通透性检测 | 第41页 |
| 3.3.10 其他可能存在靶基因检测 | 第41页 |
| 3.4 统计学分析 | 第41-42页 |
| 4 结果 | 第42-75页 |
| 4.1 健康志愿者及AS患者各项指标对比 | 第42-43页 |
| 4.2 健康志愿者及AS患者血浆miRNA表达谱对比 | 第43-44页 |
| 4.3 健康志愿者及AS患者血浆mRNA表达谱对比 | 第44-45页 |
| 4.4 miRNA及靶基因的筛选 | 第45-47页 |
| 4.5 microarray表达谱数据验证 | 第47-49页 |
| 4.6 除LOX-1以外的靶基因 | 第49-51页 |
| 4.7 生物信息学预测验证 LOX-1 | 第51-52页 |
| 4.8 健康志愿者及AS患者血浆miR-98及LOX-1表达 | 第52-53页 |
| 4.9 miR-98仅在内皮细胞和巨噬细胞中表达 | 第53-54页 |
| 4.10 Ox-LDL对内皮细胞和巨噬细胞的毒性检测 | 第54-55页 |
| 4.11 内皮细胞和巨噬细胞摄取Ox-LDL能力检测 | 第55-56页 |
| 4.12 Ox-LDL对人主动脉内皮细胞miR-98、LOX-1表达的影响 | 第56-57页 |
| 4.13 miR-98 mimic和inhibitor转染浓度筛选 | 第57-58页 |
| 4.14 miR-98 mimic和inhibitor对LOX-1 表达的影响 | 第58-59页 |
| 4.15 miR-98 mimic和inhibitor对ROS的影响 | 第59-60页 |
| 4.16 Ox-LDL对NF-κB p65及内皮细胞功能的影响 | 第60-61页 |
| 4.17 miR-98 mimic和inhibitor对NF-κB p65及内皮细胞功能的影响 | 第61-63页 |
| 4.18 miR-98 mimic和inhibitor对巨噬细胞LOX-1表达和泡沫细胞形成的影响 | 第63-64页 |
| 4.19 LOX-1 siRNA阻断miR-98 inhibitor对上述因子的影响 | 第64-65页 |
| 4.20 LOX-1是miR-98的靶基因 | 第65-66页 |
| 4.21 其他潜在靶基因对AS的作用 | 第66-67页 |
| 4.22 AgomiR-98和AntagomiR-98注射小鼠脂代谢参数 | 第67-68页 |
| 4.23 AgomiR-98和AntagomiR-98体内干预成功率及副作用 | 第68-70页 |
| 4.24 AgomiR-98和AntagomiR-98对LDLr~(-/-)小鼠胸主动脉LOX-1表达的影响 | 第70-71页 |
| 4.25 AgomiR-98和AntagomiR-98对LDLr~(-/-)小鼠胸主动脉组织NF-κB p65及内皮细胞功能的影响 | 第71-73页 |
| 4.26 AgomiR-98和AntagomiR-98对LDLr~(-/-)小鼠胸主动脉脂质沉积的影响 | 第73-74页 |
| 4.27 AgomiR-98和AntagomiR-98对LDLr~(-/-)小鼠其他潜在靶基因的作用 | 第74-75页 |
| 5 讨论 | 第75-84页 |
| 5.1 miRNA与AS | 第75-76页 |
| 5.2 miRNA与LOX-1 | 第76-77页 |
| 5.3 miR-98与氧化应激 | 第77-79页 |
| 5.4 miR-98与内皮功能 | 第79-81页 |
| 5.5 miR-98与泡沫细胞形成及脂质沉积 | 第81-82页 |
| 5.6 miR-98的靶基因 | 第82页 |
| 5.7 实验局限性 | 第82-83页 |
| 5.8 小结 | 第83-84页 |
| 6 结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-93页 |
| 附录 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| REVIEWS cavenger Receptors and Non-coding RNAs:Relevance inAtherogenesis | 第95-126页 |
| 参考文献 | 第115-126页 |
