| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 GnIH的研究进展 | 第12-18页 |
| 1.1.1 GnIH的命名及结构 | 第12-13页 |
| 1.1.2 GnIH在动物体内的分布 | 第13-15页 |
| 1.1.3 GnIH的生理作用 | 第15-18页 |
| 1.2 基因疫苗与GnIH基因疫苗的研究概况 | 第18-19页 |
| 1.2.1 基因疫苗研究概况 | 第18页 |
| 1.2.2 GnIH基因疫苗的研究概况 | 第18-19页 |
| 1.3 载体蛋白与信号肽的研究概况 | 第19-21页 |
| 1.3.1 载体蛋白 | 第19-20页 |
| 1.3.2 信号肽 | 第20-21页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-39页 |
| 2.1 材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 质粒、菌株、细胞及动物 | 第22页 |
| 2.1.2 主要药品及试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 常用试剂的配制 | 第23-24页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-39页 |
| 2.2.1 非抗性筛选GnIH真核表达质粒构建路线图 | 第25-26页 |
| 2.2.2 目的基因片段及tPA信号肽序列的获得 | 第26页 |
| 2.2.3 pVAX-SGnIH-asd质粒的构建 | 第26-29页 |
| 2.2.4 pVAX-S1-Gn IH-S2-GnIH-asd质粒的构建 | 第29-30页 |
| 2.2.5 pVAX-tPA-S2GnIH-asd质粒的构建 | 第30-33页 |
| 2.2.6 重组质粒转染HeLa细胞 | 第33页 |
| 2.2.7 RT-PCR检测目的基因的转录 | 第33-34页 |
| 2.2.8 Western blot检测融合蛋白 | 第34-35页 |
| 2.2.9 DNA疫苗的大量制备 | 第35页 |
| 2.2.10 疫苗免疫及样品采集 | 第35-36页 |
| 2.2.11 血清GnIH抗体效价的检测 | 第36-37页 |
| 2.2.12 激素浓度的测定 | 第37页 |
| 2.2.13 卵巢组织切片制作 | 第37-38页 |
| 2.2.14 数据分析 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-49页 |
| 3.1 重组质粒pSGnIH-asd的鉴定 | 第39页 |
| 3.2 重组质粒pS2GnIH-asd的鉴定 | 第39-40页 |
| 3.3 重组质粒ptS2Gn IH-asd的鉴定 | 第40-41页 |
| 3.4 GnIH基因疫苗的构建及融合蛋白抗原表位预测 | 第41页 |
| 3.5 ptS2Gn IH-asd质粒转染Hela细胞 | 第41-42页 |
| 3.6 ptS2Gn IH-asd质粒的转录水平检测 | 第42-43页 |
| 3.7 Western blot检测结果 | 第43-44页 |
| 3.8 母羔的生长及性行为观测 | 第44-45页 |
| 3.9 外周血液中抗GnIH抗体的检测 | 第45页 |
| 3.10 外周血液中相关生殖激素的测定 | 第45-47页 |
| 3.10.1 母羔血清中黄体生成素（LH）检测 | 第45-46页 |
| 3.10.2 母羔血清中卵泡刺激素（FSH）检测 | 第46页 |
| 3.10.3 母羔血清中雌二醇（E2）检测 | 第46-47页 |
| 3.10.4 母羔血清中孕酮（P）检测 | 第47页 |
| 3.11 卵巢的组织显微观察 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| 4.1 关于重组质粒构建方式的选择及去内毒素的必要性 | 第49-50页 |
| 4.2 基因疫苗免疫方式及佐剂的选择 | 第50-51页 |
| 4.3 Gn IH基因疫苗对母羔的免疫效果 | 第51-53页 |
| 5 全文结论 | 第53-54页 |
| 5.1 全文结论 | 第53页 |
| 5.2 进一步研究的相关问题 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录I 名词索引 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
