摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一节 前言 | 第9-22页 |
1.1 研究背景 | 第9-10页 |
1.2 文献综述 | 第10-20页 |
1.2.1 褐飞虱的危害及其防治 | 第10-11页 |
1.2.2 吡蚜酮 | 第11-14页 |
1.2.3 昆虫TRPV通道研究进展 | 第14-15页 |
1.2.4 植食性刺吸式昆虫的取食 | 第15-16页 |
1.2.5 刺探电位图谱技术(EPG) | 第16-19页 |
1.2.6 RNA干扰的发展及作用原理 | 第19-20页 |
1.3 研究的目的与意义及技术路线 | 第20-22页 |
1.3.1 研究的目的与意义 | 第20-21页 |
1.3.2 技术路线 | 第21-22页 |
第二节 材料与方法 | 第22-38页 |
2.1 材料 | 第22-24页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第22页 |
2.1.2 供试水稻 | 第22-23页 |
2.1.3 主要试剂 | 第23页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第23-24页 |
2.2 褐飞虱RNA的抽提及cDNA的合成 | 第24-25页 |
2.2.1 褐飞虱头部总的RNA提取 | 第24-25页 |
2.2.2 cDNA的合成 | 第25页 |
2.3 褐飞虱Iav、Nan基因片段的PCR扩增、克隆及测序 | 第25-28页 |
2.3.1 褐飞虱Iav和Nan基因片段的PCR扩增 | 第26页 |
2.3.2 褐飞虱Iav和Nan基因片段的克隆 | 第26-27页 |
2.3.3 褐飞虱Iav和Nan基因的测序 | 第27-28页 |
2.4 褐飞虱Iav和Nan基因的dsRNA的合成 | 第28-31页 |
2.4.1 dsRNA合成模板的制备 | 第28-29页 |
2.4.2 cDNA的纯化 | 第29-30页 |
2.4.3 dsRNA的合成 | 第30页 |
2.4.4 dsRNA纯化 | 第30-31页 |
2.5 褐飞虱Iav和Nan基因的dsRNA的显微注射 | 第31-32页 |
2.6 RNA干扰后干扰效率的检测 | 第32-36页 |
2.6.1 褐飞虱总RNA的抽提及cDNA的合成 | 第32-34页 |
2.6.2 扩增Actin基因来检测cDNA的质量 | 第34页 |
2.6.3 荧光定量检测干扰效率 | 第34-36页 |
2.7 RNA干扰后褐飞虱取食水稻植株的监测 | 第36-37页 |
2.8 RNA干扰后褐飞虱取食蔗糖溶液的监测 | 第37页 |
2.9 数据分析 | 第37-38页 |
第三节 结果与分析 | 第38-57页 |
3.1 褐飞虱Iav和Nan基因片段的克隆及序列分析 | 第38-39页 |
3.2 RNAi沉默效果 | 第39-40页 |
3.3 沉默Iav基因和Nan基因对褐飞虱存活率及形态的影响 | 第40-43页 |
3.3.1 Iav基因沉默对褐飞虱存活率的影响 | 第40-41页 |
3.3.2 Nan基因沉默对褐飞虱存活率的影响 | 第41-42页 |
3.3.3 Iav和Nan基因分别RNA干扰后对表型的影响 | 第42-43页 |
3.4 Iav和Nan基因沉默后对成虫取食水稻植株的影响 | 第43-51页 |
3.4.1 Iav基因沉默对成虫取食水稻植株的影响 | 第43-47页 |
3.4.2 Nan基因沉默对成虫取食水稻植株的影响 | 第47-51页 |
3.5 Iav和Nan基因沉默后对成虫取食液态饲料的影响 | 第51-54页 |
3.6 讨论 | 第54-56页 |
3.7 总结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
附录 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |