中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 人免疫缺陷病毒的研究进展 | 第13-22页 |
1.1 艾滋病毒的结构 | 第13页 |
1.2 艾滋病毒的复制周期 | 第13-20页 |
1.2.1 病毒入侵 | 第13-16页 |
1.2.2 早期(整合前)的艾滋病毒复制事件:反转录和核输入 | 第16-17页 |
1.2.3 病毒整合 | 第17-18页 |
1.2.4 晚期(整合后)事件:病毒基因的表达 | 第18-20页 |
1.3 艾滋病毒的包装和释放 | 第20-21页 |
1.4 艾滋病毒的潜伏 | 第21-22页 |
第二章 丙型肝炎病毒分子生物学、复制和免疫反应概述 | 第22-32页 |
2.1 HCV结构蛋白 | 第23-24页 |
2.1.1 核心蛋白 | 第23页 |
2.1.2 包膜糖蛋白 | 第23-24页 |
2.1.3 P7蛋白 | 第24页 |
2.2 HCV非结构蛋白 | 第24-27页 |
2.2.1 NS2 | 第24-25页 |
2.2.2 NS3 | 第25页 |
2.2.3 NS4A | 第25-26页 |
2.2.4 NS4B | 第26页 |
2.2.5 NS5A | 第26-27页 |
2.2.6 NS5B | 第27页 |
2.3 HCV病毒学 | 第27-28页 |
2.4 病毒入侵 | 第28-29页 |
2.5 病毒RNA的复制和翻译 | 第29-30页 |
2.6 治疗丙型肝炎病毒 | 第30-32页 |
第三章 丙型肝炎病毒和人免疫缺陷病毒共感染的研究进展 | 第32-43页 |
3.1 丙型肝炎病毒对艾滋病毒感染的影响 | 第32-33页 |
3.2 艾滋病对丙型肝炎病毒感染毒的影响 | 第33-34页 |
3.3 在HCV/HIV共感染中细胞介导的免疫 | 第34-38页 |
3.3.1 丙型肝炎病毒特异性免疫反应 | 第34-36页 |
3.3.2 肝损伤是细胞介导的免疫应答的结果 | 第36-38页 |
3.4 HIV-HCV共感染病人的治疗 | 第38-40页 |
3.5 未来:更新、更有效的药物和靶向治疗 | 第40-43页 |
第四章 人免疫缺陷病毒REV蛋白功能简介 | 第43-52页 |
4.1 REV蛋白和REV应答元件(RRE) | 第43-45页 |
4.2 REv穿梭和病毒RNA输出 | 第45-46页 |
4.3 REV和翻译 | 第46-50页 |
4.3.1 Rev和翻译有关 | 第46-47页 |
4.3.3 Rev调控翻译的证据 | 第47-49页 |
4.3.4 HIV-1基因组RNA上第二个Rev的结合位点 | 第49-50页 |
4.4 REV和基因组包装 | 第50-52页 |
第五章 HIV-1上调HCV基因表达的研究 | 第52-69页 |
5.1 前言 | 第52-53页 |
5.2 实验材料 | 第53-54页 |
5.2.1 质粒和细菌菌株 | 第53页 |
5.2.2 哺乳动物细胞系 | 第53页 |
5.2.3 工具酶 | 第53-54页 |
5.2.4 试剂和抗体 | 第54页 |
5.3 实验方法 | 第54-64页 |
5.3.1 感受态细菌的制备及转化 | 第54-55页 |
5.3.2 碱裂解法质粒的提取 | 第55-56页 |
5.3.3 凝胶回收DNA片段 | 第56页 |
5.3.4 Rev蛋白突变质粒的构建 | 第56-59页 |
5.3.5 RNA的体外转录 | 第59-60页 |
5.3.6 细胞培养基配置 | 第60页 |
5.3.7 细胞培养、复苏和冻存 | 第60-61页 |
5.3.8 细胞脂质体转染 | 第61页 |
5.3.9 检测荧光素酶活性 | 第61页 |
5.3.10 蛋白免疫印迹实验 | 第61-63页 |
5.3.11 体内免疫共沉淀 | 第63-64页 |
5.4 实验结果 | 第64-67页 |
5.4.1 HIV上调HCV基因表达 | 第64页 |
5.4.2 筛选上调HCV基因表达的HIV蛋白 | 第64-65页 |
5.4.3 HIV Rev蛋白突变体的构建 | 第65页 |
5.4.4 HIV Rev蛋白特异性的上调HCV基因的表达 | 第65-67页 |
5.4.5 HIV Rev蛋白能与HCV RNA相互作用 | 第67页 |
5.5 讨论 | 第67-69页 |
第六章 REV蛋白与HCV 5'UTR相互作用的研究 | 第69-88页 |
6.1 前言 | 第69-71页 |
6.2 实验材料 | 第71-72页 |
6.2.1 质粒和细菌菌种 | 第71页 |
6.2.2 工具酶 | 第71页 |
6.2.3 试剂、抗体和蛋白 | 第71-72页 |
6.3 实验方法 | 第72-79页 |
6.3.1 感受态细菌的制备及转化(见上一章) | 第72页 |
6.3.2 碱裂解法质粒提取(见上一章) | 第72页 |
6.3.3 凝胶回收DNA片段(见上一章) | 第72页 |
6.3.4 Rev蛋白及其突变蛋白表达质粒的构建 | 第72-73页 |
6.3.5 Rev蛋白及其突变蛋白的诱导表达及鉴定 | 第73-75页 |
6.3.6 pHCV 5’+3’质粒的构建 | 第75-76页 |
6.3.7 RNA的制备 | 第76-78页 |
6.3.8 RNA探针的制备 | 第78页 |
6.3.9 EMSA实验 | 第78-79页 |
6.4 实验结果 | 第79-86页 |
6.4.1 Rev及其突变蛋白的原核表达、纯化及鉴定 | 第79-80页 |
6.4.2 EMSA实验所需RNA的制备 | 第80-82页 |
6.4.3 Rev蛋白与HCV 5'-UTRRNA结合 | 第82-83页 |
6.4.4 Rev蛋白与HCV 5'-UTRRNA结合的蛋白特异性 | 第83页 |
6.4.5 Rev蛋白与HCV 5'-UTRRNA结合的RNA特异性 | 第83-84页 |
6.4.6 Rev蛋白与HCV 5'-UTR截短RNA的相互作用 | 第84-85页 |
6.4.7 Rev蛋白与HCV 5'-UTR第三区域缺失突变RNA的相互作用 | 第85-86页 |
6.4.8 Rev蛋白与HCV 5'-UTR第三区第一个内部环结构域突变RNA的相互作用 | 第86页 |
6.5 讨论 | 第86-88页 |
第七章 REV上调HCV IRES介导的翻译 | 第88-94页 |
7.1 前言 | 第88-89页 |
7.2 实验材料 | 第89页 |
7.3 实验方法 | 第89-90页 |
7.3.1 单顺反子报告因子RNA制备 | 第89-90页 |
7.4 实验结果 | 第90-92页 |
7.4.1 单顺反子报告因子RNA制备 | 第90-91页 |
7.4.2 Rev蛋白激活HCV IRES RNA的翻译 | 第91页 |
7.4.3 Rev蛋白激活HCV IRES RNA的翻译依赖于HCV结合位点 | 第91-92页 |
7.5 讨论 | 第92-94页 |
研究意义和创新 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-124页 |
博士在读期间发表与待发表论文 | 第124-125页 |
致谢 | 第125页 |