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肿瘤相关自身抗体及microRNAs联合检测在食管鳞癌中的诊断价值

摘要第5-8页
Abstract第8-11页
英文缩略词表第16-17页
1 前言第17-21页
2 材料与方法第21-42页
    2.1 实验材料第21-30页
        2.1.1 实验试剂及耗材第21-23页
        2.1.2 实验仪器设备第23-24页
        2.1.3 相关溶液的配制第24-27页
        2.1.4 质粒第27-28页
        2.1.5 研究对象及标本第28-30页
            2.1.5.1 研究对象第28-29页
            2.1.5.2 血浆标本第29-30页
    2.2 实验方法与步骤第30-39页
        2.2.1 技术路线第30-31页
        2.2.2 HCCR-1重组蛋白的原核表达第31-34页
            2.2.2.1 将HCCR-1重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)化学感受态细胞第31页
            2.2.2.2 挑取单克隆扩增培养与保存菌种第31页
            2.2.2.3 HCCR-1重组蛋白的小量诱导表达第31-32页
            2.2.2.4 SDS-PAGE鉴定HCCR-1重组蛋白的诱导表达第32-33页
            2.2.2.5 HCCR-1重组蛋白的大量诱导表达第33页
            2.2.2.6 HCCR-1重组蛋白的可溶性分析第33-34页
        2.2.3 镍离子亲和层析法纯化HCCR-1重组蛋白第34-35页
            2.2.3.1 细菌裂解产物的收集第34页
            2.2.3.2 变性条件下梯度p H洗脱法纯化HCCR-1重组蛋白第34-35页
        2.2.4 其它六种蛋白的获得第35页
        2.2.5 Bradford法测定蛋白浓度第35-36页
        2.2.6 间接ELISA法测定血浆中各种TAAbs的表达水平第36-37页
        2.2.7 血浆中miR-21和miR-25表达水平的测定第37-39页
            2.2.7.1 提取血浆总RNA第37-38页
            2.2.7.2 总RNA的鉴定第38页
            2.2.7.3 将RNA逆转录成cDNA第38-39页
            2.2.7.4 荧光定量PCR检测miR-21和miR-25的表达水平第39页
    2.3 统计学分析第39-42页
3 结果第42-61页
    3.1 HCCR-1重组蛋白的原核表达和纯化第42-44页
        3.1.1 HCCR-1重组蛋白的诱导表达和可溶性分析第42-43页
        3.1.2 HCCR-1重组蛋白的纯化第43页
        3.1.3 HCCR-1重组蛋白浓度的测定第43-44页
    3.2 研究对象的临床基本特征第44-46页
    3.3 评价各种TAABS在食管鳞癌中的诊断价值第46-53页
        3.3.1 各种TAABS在食管鳞癌患者和正常对照血浆中表达水平的比较第46页
        3.3.2 各种TAABS在食管鳞癌患者和正常对照血浆中诊断价值的比较第46-49页
        3.3.3 各种TAABS与食管鳞癌患者临床基本特征之间的关系第49-51页
        3.3.4 多种TAABS并联检测在食管鳞癌中诊断价值的评价第51-53页
    3.4 评价MIR-21和MIR-25在食管鳞癌中的诊断价值第53-58页
        3.4.1 MIR-21和MIR-25在食管鳞癌患者和正常对照血浆中表达水平的比较第53-54页
        3.4.2 MIR-21和MIR-25与食管鳞癌患者临床基本特征之间的关系第54-55页
        3.4.3 MIR-21和MIR-25对早期食管鳞癌患者诊断价值的比较第55-58页
    3.5 MIR-21和TAAB(S)联合检测在食管鳞癌中的诊断价值第58-61页
        3.5.1 MIR-21和TAAB(S)以不同组合进行联合检测在食管鳞癌中的诊断价值第58-59页
        3.5.2 MIR-21与五种TAABS联合检测在早期食管鳞癌中的诊断价值第59-61页
4 讨论第61-67页
    4.1 HCCR-1重组蛋白的原核表达和纯化第61-62页
    4.2 TAAB(S)的检测在食管鳞癌中的诊断价值第62-64页
    4.3 MIRNA的检测在食管鳞癌中的诊断价值第64-65页
    4.4 MIR-21与TAAB(S)联合检测在食管鳞癌中的诊断价值第65-66页
    4.5 研究的局限性第66页
    4.6 工作展望第66-67页
5 结论第67-68页
参考文献第68-72页
综述第72-89页
    参考文献第85-89页
个人简历及在校期间发表学术论文第89-90页
致谢第90页

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