摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
英文缩略词表 | 第16-17页 |
1 前言 | 第17-21页 |
2 材料与方法 | 第21-42页 |
2.1 实验材料 | 第21-30页 |
2.1.1 实验试剂及耗材 | 第21-23页 |
2.1.2 实验仪器设备 | 第23-24页 |
2.1.3 相关溶液的配制 | 第24-27页 |
2.1.4 质粒 | 第27-28页 |
2.1.5 研究对象及标本 | 第28-30页 |
2.1.5.1 研究对象 | 第28-29页 |
2.1.5.2 血浆标本 | 第29-30页 |
2.2 实验方法与步骤 | 第30-39页 |
2.2.1 技术路线 | 第30-31页 |
2.2.2 HCCR-1重组蛋白的原核表达 | 第31-34页 |
2.2.2.1 将HCCR-1重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)化学感受态细胞 | 第31页 |
2.2.2.2 挑取单克隆扩增培养与保存菌种 | 第31页 |
2.2.2.3 HCCR-1重组蛋白的小量诱导表达 | 第31-32页 |
2.2.2.4 SDS-PAGE鉴定HCCR-1重组蛋白的诱导表达 | 第32-33页 |
2.2.2.5 HCCR-1重组蛋白的大量诱导表达 | 第33页 |
2.2.2.6 HCCR-1重组蛋白的可溶性分析 | 第33-34页 |
2.2.3 镍离子亲和层析法纯化HCCR-1重组蛋白 | 第34-35页 |
2.2.3.1 细菌裂解产物的收集 | 第34页 |
2.2.3.2 变性条件下梯度p H洗脱法纯化HCCR-1重组蛋白 | 第34-35页 |
2.2.4 其它六种蛋白的获得 | 第35页 |
2.2.5 Bradford法测定蛋白浓度 | 第35-36页 |
2.2.6 间接ELISA法测定血浆中各种TAAbs的表达水平 | 第36-37页 |
2.2.7 血浆中miR-21和miR-25表达水平的测定 | 第37-39页 |
2.2.7.1 提取血浆总RNA | 第37-38页 |
2.2.7.2 总RNA的鉴定 | 第38页 |
2.2.7.3 将RNA逆转录成cDNA | 第38-39页 |
2.2.7.4 荧光定量PCR检测miR-21和miR-25的表达水平 | 第39页 |
2.3 统计学分析 | 第39-42页 |
3 结果 | 第42-61页 |
3.1 HCCR-1重组蛋白的原核表达和纯化 | 第42-44页 |
3.1.1 HCCR-1重组蛋白的诱导表达和可溶性分析 | 第42-43页 |
3.1.2 HCCR-1重组蛋白的纯化 | 第43页 |
3.1.3 HCCR-1重组蛋白浓度的测定 | 第43-44页 |
3.2 研究对象的临床基本特征 | 第44-46页 |
3.3 评价各种TAABS在食管鳞癌中的诊断价值 | 第46-53页 |
3.3.1 各种TAABS在食管鳞癌患者和正常对照血浆中表达水平的比较 | 第46页 |
3.3.2 各种TAABS在食管鳞癌患者和正常对照血浆中诊断价值的比较 | 第46-49页 |
3.3.3 各种TAABS与食管鳞癌患者临床基本特征之间的关系 | 第49-51页 |
3.3.4 多种TAABS并联检测在食管鳞癌中诊断价值的评价 | 第51-53页 |
3.4 评价MIR-21和MIR-25在食管鳞癌中的诊断价值 | 第53-58页 |
3.4.1 MIR-21和MIR-25在食管鳞癌患者和正常对照血浆中表达水平的比较 | 第53-54页 |
3.4.2 MIR-21和MIR-25与食管鳞癌患者临床基本特征之间的关系 | 第54-55页 |
3.4.3 MIR-21和MIR-25对早期食管鳞癌患者诊断价值的比较 | 第55-58页 |
3.5 MIR-21和TAAB(S)联合检测在食管鳞癌中的诊断价值 | 第58-61页 |
3.5.1 MIR-21和TAAB(S)以不同组合进行联合检测在食管鳞癌中的诊断价值 | 第58-59页 |
3.5.2 MIR-21与五种TAABS联合检测在早期食管鳞癌中的诊断价值 | 第59-61页 |
4 讨论 | 第61-67页 |
4.1 HCCR-1重组蛋白的原核表达和纯化 | 第61-62页 |
4.2 TAAB(S)的检测在食管鳞癌中的诊断价值 | 第62-64页 |
4.3 MIRNA的检测在食管鳞癌中的诊断价值 | 第64-65页 |
4.4 MIR-21与TAAB(S)联合检测在食管鳞癌中的诊断价值 | 第65-66页 |
4.5 研究的局限性 | 第66页 |
4.6 工作展望 | 第66-67页 |
5 结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-72页 |
综述 | 第72-89页 |
参考文献 | 第85-89页 |
个人简历及在校期间发表学术论文 | 第89-90页 |
致谢 | 第90页 |