| 摘要 | 第9-13页 |
| ABSTRACT | 第13-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-34页 |
| 1.1 MMPs基质金属蛋白酶家族 | 第18-30页 |
| 1.1.1 MMPs基质金属蛋白酶家族的进化 | 第18-19页 |
| 1.1.2 MMPs基质金属蛋白酶家族的分类 | 第19-20页 |
| 1.1.3 MMPs基质金属蛋白酶家族的结构特征 | 第20-21页 |
| 1.1.4 MMPs基质金属蛋白酶家族的活性调控 | 第21-23页 |
| 1.1.5 MMPs基质金属蛋白酶家族的功能 | 第23-30页 |
| 1.2 TIMPs组织金属蛋白酶抑制剂家族 | 第30-34页 |
| 1.2.1 TIMPs家族的发现及结构 | 第30-31页 |
| 1.2.2 TIMPs家族的功能 | 第31-34页 |
| 第二章 引言 | 第34-38页 |
| 2.1 研究背景和目的意义 | 第34页 |
| 2.2 主要研究内容 | 第34-35页 |
| 2.3 技术路线 | 第35-38页 |
| 第三章 BmMMPs和BmTIMP基因的鉴定及表达特征分析 | 第38-64页 |
| 3.1 材料与方法 | 第38-49页 |
| 3.1.1 细胞、病毒与细菌 | 第38页 |
| 3.1.2 主要试剂及溶液配制 | 第38-41页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第41-42页 |
| 3.1.4 主要实验方法及步骤 | 第42-49页 |
| 3.2 结果与分析 | 第49-61页 |
| 3.2.1 家蚕MMPs家族基因和TIMP基因序列分析 | 第49-52页 |
| 3.2.2 MMPs家族和TIMP的组织和时期表达分析 | 第52-54页 |
| 3.2.3 MMPs和TIMP的亚细胞定位及与定位相关的结构域鉴定 | 第54-57页 |
| 3.2.4 不同免疫诱导刺激下MMPs和TIMP的表达模式 | 第57-61页 |
| 3.3 讨论 | 第61-64页 |
| 第四章 BmMMPs和BmTIMP的相互作用鉴定 | 第64-72页 |
| 4.1 材料与方法 | 第64-66页 |
| 4.1.1 细胞 | 第64页 |
| 4.1.2 主要试剂及溶液配制 | 第64-65页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第65页 |
| 4.1.4 主要实验方法及步骤 | 第65-66页 |
| 4.2 结果与分析 | 第66-69页 |
| 4.2.1 荧光共定位分析MMPs与TIMP的相互作用 | 第66-67页 |
| 4.2.2 BiFC分析MMPs与TIMP的相互作用 | 第67-68页 |
| 4.2.3 Co-IP分析MMPs与TIMP的相互作用 | 第68-69页 |
| 4.3 讨论 | 第69-72页 |
| 第五章 BmMMPs和BmTIMP对BmNPV侵染的影响 | 第72-88页 |
| 5.1 材料与方法 | 第72-76页 |
| 5.1.1 细胞与病毒 | 第72页 |
| 5.1.2 主要试剂及溶液配制 | 第72-73页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第73页 |
| 5.1.4 主要实验方法及步骤 | 第73-76页 |
| 5.2 结果与分析 | 第76-84页 |
| 5.2.1 MMPs与TIMP基因的过表达效果检测 | 第76-77页 |
| 5.2.2 过表达MMPs与TIMP对BmNPV侵染的影响 | 第77-79页 |
| 5.2.3 MMPs与TIMP基因的CRISPR/Cas9敲除效果检测 | 第79-80页 |
| 5.2.4 CRISPR/Cas9敲除MMPs与TIMP对BmNPV侵染的影响 | 第80-82页 |
| 5.2.5 MMPs的蛋白酶活性对BmNPV侵染的影响 | 第82-84页 |
| 5.3 讨论 | 第84-88页 |
| 第六章 转基因过表达BmMMP3和BmTIMP对BmNPV增殖及家蚕变态发育影响 | 第88-96页 |
| 6.1 材料与方法 | 第88-90页 |
| 6.1.1 家蚕、病毒与载体 | 第88页 |
| 6.1.2 主要试剂及溶液配制 | 第88-89页 |
| 6.1.3 主要仪器 | 第89页 |
| 6.1.4 主要实验方法及步骤 | 第89-90页 |
| 6.2 结果与分析 | 第90-95页 |
| 6.2.1 MMP3-OE与TIMP-OE转基因品系的建立及鉴定 | 第90-91页 |
| 6.2.2 MMP3-OE转基因品系的表型分析及对BmNPV侵染的影响 | 第91-93页 |
| 6.2.3 TIMP-OE转基因品系的表型分析 | 第93-95页 |
| 6.3 讨论 | 第95-96页 |
| 第七章 转基因杂交敲除BmMMPs家族基因对BmNPV增殖及家蚕变态发育影响 | 第96-116页 |
| 7.1 材料与方法 | 第96-98页 |
| 7.1.1 家蚕、病毒与载体 | 第96页 |
| 7.1.2 主要试剂及溶液配制 | 第96-97页 |
| 7.1.3 主要仪器 | 第97页 |
| 7.1.4 主要实验方法及步骤 | 第97-98页 |
| 7.2 结果与分析 | 第98-114页 |
| 7.2.1 Cas9-OE与MMPs-sgRNA转基因品系的建立及鉴定 | 第98-100页 |
| 7.2.2 MMP1-KO转基因杂交敲除品系的鉴定及表型分析 | 第100-103页 |
| 7.2.3 MMP2-KO转基因杂交敲除品系的鉴定及表型分析 | 第103-111页 |
| 7.2.4 MMP3-KO转基因杂交敲除品系的鉴定及表型分析 | 第111-113页 |
| 7.2.5 MMPs-KO品系对BmNPV侵染活力的影响 | 第113-114页 |
| 7.3 讨论 | 第114-116页 |
| 第八章 BmMMPs和BmTIMP作用机制的探究及相互作用蛋白的鉴定 | 第116-124页 |
| 8.1 材料与方法 | 第116-118页 |
| 8.1.1 家蚕、病毒与载体 | 第116页 |
| 8.1.2 主要试剂及溶液配制 | 第116-117页 |
| 8.1.3 主要仪器 | 第117页 |
| 8.1.4 主要实验方法及步骤 | 第117-118页 |
| 8.2 结果与分析 | 第118-123页 |
| 8.2.1 BmNPV的关键基因对MMPs家族基因的诱导调控 | 第118-119页 |
| 8.2.2 MMPs与TIMP之间的的诱导调控 | 第119-120页 |
| 8.2.3 MMPs调控Caspase的活性 | 第120页 |
| 8.2.4 MMP1a和MMP3互作蛋白的钓取 | 第120-122页 |
| 8.2.5 MMP1a和MMP3互作蛋白的克隆及初步鉴定 | 第122-123页 |
| 8.3 讨论 | 第123-124页 |
| 第九章 全文总结与展望 | 第124-128页 |
| 9.1 全文总结 | 第124-126页 |
| 9.2 展望 | 第126-128页 |
| 论文创新点 | 第128-130页 |
| 参考文献 | 第130-142页 |
| 附录 | 第142-146页 |
| 在读期间发表学术论文及参研课题情况 | 第146-148页 |
| 致谢 | 第148-149页 |
