| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第10-21页 |
| 1.1 GLP-1R相关特性概况 | 第11-16页 |
| 1.1.1 GLP-1R的表达与糖基化修饰 | 第11-12页 |
| 1.1.2 GLP-1R胞外域（ECD）相关特征 | 第12-15页 |
| 1.1.3 GLP-1R跨膜域（TMD）相关特征 | 第15-16页 |
| 1.2 GLP-1R功能相关性研究 | 第16-19页 |
| 1.2.1 GLP-1 受体激活 | 第16-17页 |
| 1.2.2 GLP-1R信号传导调控 | 第17-18页 |
| 1.2.3 GLP-1R的生理功能 | 第18-19页 |
| 1.3 课题研究的重大意义及创新性 | 第19-21页 |
| 1.3.1 课题研究的意义 | 第19页 |
| 1.3.2 课题研究创新性 | 第19-21页 |
| 第2章 GLP-1R跨膜段TMD的制备方法 | 第21-47页 |
| 2.1 简介 | 第21-23页 |
| 2.1.1 GLP-1R跨膜域结构特点 | 第21-22页 |
| 2.1.2 GLP-1R跨膜域的制备策略 | 第22-23页 |
| 2.2 实验材料和方法 | 第23-36页 |
| 2.2.1 常用材料 | 第23-26页 |
| 2.2.1.1 菌种与载体 | 第23页 |
| 2.2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 2.2.1.3 常用培养基及试剂配制 | 第23-26页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.2.3 实验方法 | 第27-36页 |
| 2.2.3.1 GLP-1R跨膜域基因的密码子优化 | 第27页 |
| 2.2.3.2 构建载体pMFH-TMD | 第27-32页 |
| 2.2.3.3 GLP-1R跨膜域（TMD）的表达与鉴定 | 第32-34页 |
| 2.2.3.4 GLP-1R跨膜域（TMD）的纯化与水解 | 第34-36页 |
| 2.3 结果与分析 | 第36-45页 |
| 2.3.1 重组载体pMFH-TMD的构建与鉴定 | 第36-40页 |
| 2.3.1.1 GLP-1R跨膜域（TMD）基因优化分析 | 第36页 |
| 2.3.1.2 pMFH-TMD的构建 | 第36-38页 |
| 2.3.1.3 重组载体pMFH-TMD测序验证 | 第38-40页 |
| 2.3.2 重组载体pMFH-TMD在大肠杆菌中表达 | 第40-44页 |
| 2.3.2.1 重组载体pMFH-TMD在DH5α-Top10中的表达鉴定 | 第40页 |
| 2.3.2.2 重组载体pMFH-TMD在BL21pLysS中的表达鉴定 | 第40-43页 |
| 2.3.2.3 重组载体pMFH-TMD在BL21pLysS中的表达纯化 | 第43-44页 |
| 2.3.3 纯化蛋白进行酶切水解 | 第44-45页 |
| 2.4 本章小结与讨论 | 第45-47页 |
| 第3章 GLP-1R胞外域ECD的制备方法 | 第47-82页 |
| 3.1 简介 | 第47-48页 |
| 3.2 实验材料和方法 | 第48-66页 |
| 3.2.1 常用材料 | 第48-52页 |
| 3.2.1.1 菌种和载体 | 第48页 |
| 3.2.1.2 主要试剂 | 第48-49页 |
| 3.2.1.3 常用培养基及试剂配制 | 第49-52页 |
| 3.2.2 常用仪器 | 第52-53页 |
| 3.2.3 实验方法 | 第53-66页 |
| 3.2.3.1 GLP-1R胞外域(ECD)基因的真核表达 | 第53-54页 |
| 3.2.3.2 重组载体pPICZa A-S的构建 | 第54-62页 |
| 3.2.3.3 重组菌株pPICZaA-S/X33的筛选鉴定 | 第62-65页 |
| 3.2.3.4 GLP-1R胞外域（ECD）的表达与纯化 | 第65-66页 |
| 3.3 结果与分析 | 第66-81页 |
| 3.3.1 胞外域ECD克隆载体构建与表达 | 第66-78页 |
| 3.3.2 胞外域ECD的表达鉴定 | 第78-80页 |
| 3.3.3 胞外域ECD纯化 | 第80-81页 |
| 3.4 本章小结 | 第81-82页 |
| 第4章 总结与展望 | 第82-84页 |
| 4.1 总结和讨论 | 第82页 |
| 4.2 创新点 | 第82-83页 |
| 4.3 展望 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 附录 | 第90-95页 |
| 符号说明 | 第95页 |
