| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词表 | 第11-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-26页 |
| 1.1 PI3K/AKT信号通路 | 第13-16页 |
| 1.1.1 PI3K/Akt信号通路的组成与功能 | 第13-14页 |
| 1.1.2 PI3K/Akt信号通路与肿瘤的关系 | 第14-16页 |
| 1.2 IA型PI3K调节亚基的生物学功能的研究现状 | 第16-19页 |
| 1.2.1 IA型PI3K调节亚基的结构与定位 | 第16-18页 |
| 1.2.2 IA型PI3K调节亚基与肿瘤的关系 | 第18-19页 |
| 1.3 P55PIK的细胞生物学功能 | 第19-23页 |
| 1.3.1 p55PIK参与细胞增殖的调控 | 第19-21页 |
| 1.3.2 p55PIK参与细胞周期的调控 | 第21页 |
| 1.3.3 p55PIK在IGF-1 中的作用 | 第21-22页 |
| 1.3.4 p55PIK促进细胞迁移 | 第22-23页 |
| 1.3.5 N24多肽对细胞的调控 | 第23页 |
| 1.4 本课题主要研究意义 | 第23-26页 |
| 1.4.1 PI3K抑制剂的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.4.2 靶向p55PIK的抗癌药物的研究方向 | 第24-26页 |
| 第2章 p55PIK的系统发育进化分析 | 第26-35页 |
| 2.1 简介 | 第26-28页 |
| 2.1.1 序列搜索 | 第26-27页 |
| 2.1.2 非加权组平均法 | 第27页 |
| 2.1.3 邻接法 | 第27页 |
| 2.1.4 最大简约法 | 第27-28页 |
| 2.1.5 最大似然法 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-29页 |
| 2.2.1 数据搜集 | 第28-29页 |
| 2.2.2 序列比对与系统发育树的构建方法 | 第29页 |
| 2.2.3 同线性分析 | 第29页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第29-34页 |
| 2.3.1 多重序列比对结果 | 第29-30页 |
| 2.3.2 邻接法对p55PIK进行系统发育分析 | 第30-31页 |
| 2.3.3 最大似然法对p55PIK进行系统发育分析 | 第31页 |
| 2.3.4 邻接法无根树对p55PIK进行系统发育分析 | 第31-32页 |
| 2.3.5 同线性分析结果 | 第32-34页 |
| 2.4 小结 | 第34-35页 |
| 第3章 p55PIK表达载体的构建及鉴定 | 第35-48页 |
| 3.1 材料 | 第35-37页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第35页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第35-36页 |
| 3.1.3 试剂和耗材 | 第36页 |
| 3.1.4 常用试剂的配制 | 第36-37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-45页 |
| 3.2.1 p55PIK cDNA文库的获取 | 第37-38页 |
| 3.2.2 p55PIK序列信息 | 第38-39页 |
| 3.2.3 目的基因的克隆 | 第39-44页 |
| 3.2.4 目的基因的鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第45-47页 |
| 3.3.1 总RNA的提取 | 第45-46页 |
| 3.3.2 p55PIK基因的扩增 | 第46页 |
| 3.3.3 慢病毒表达载体和 3flag表达载体鉴定 | 第46-47页 |
| 3.4 小结 | 第47-48页 |
| 第4章 p55PIK及其不同亚型的表达和功能分析 | 第48-62页 |
| 4.1 材料 | 第48-50页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第48页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第48页 |
| 4.1.3 试剂和耗材 | 第48-49页 |
| 4.1.4 常用试剂的配制 | 第49-50页 |
| 4.2 实验方法 | 第50-54页 |
| 4.2.1 脂质体转染 | 第50-51页 |
| 4.2.2 慢病毒包装 | 第51页 |
| 4.2.3 细胞感染 | 第51-52页 |
| 4.2.4 Western blot | 第52页 |
| 4.2.5 流式细胞仪检测细胞周期 | 第52-53页 |
| 4.2.6 Edu染色检测细胞周期 | 第53页 |
| 4.2.7 免疫荧光 | 第53-54页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第54-60页 |
| 4.3.1 western检测蛋白表达 | 第54-55页 |
| 4.3.2 p55PIK的干涉 | 第55-58页 |
| 4.3.3 p55PIK,p50PIK和p48PIK对细胞周期的影响 | 第58-60页 |
| 4.3.4 p55PIK，p50PIK和p48PIK在细胞中的定位 | 第60页 |
| 4.4 小结 | 第60-62页 |
| 第5章 总结与展望 | 第62-65页 |
| 5.1 本文工作总结 | 第62-63页 |
| 5.2 未来工作展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第71页 |
